Некоторые ВМС, содержащие ионогенные группы в молекуле, ведут себя как электролиты, - типичными и наиболее важными представителями высокомолекулярных электролитов являются белки.
Белки амфотерны, так как содержит в своей молекуле как кислотные
(-COOH), так и основные (-NH) группы. Диссоциация белковых молекул происходит по-разному, в зависимости от pH среды:
В кислой среде макроион имеет положительный заряд:
+NН3-R-СОО- + H+
+NН3-R-СООH
в щелочной - отрицательный:
+NН3-R-СОО- + ОН-
NН2-R-СОО- + Н2O
В результате диссоциации ионогенных групп на макромолекуле белка возникает заряд. В нейтральной среде диссоциация кислотных и аминогрупп определяется константами диссоциации кислотных и аминогрупп.
В белках кислотные группы диссоциируют больше, чем аминные, поэтому макромолекула содержит больше отрицательных зарядов и в электрическом поле будет двигаться к аноду.
При добавлении кислоты будет подавляться ионизация кислотных групп и усиливаться основных, что уменьшит число отрицательных зарядов на макромолекуле и увеличит число положительных. Если число диссоциированных амино- и карбоксильных групп одинаковы, то молекула белка в целом электронейтральна. Такое состояние белка называют изоэлектрическим состоянием, а соответствующее ему значение pH раствора - изоэлектрической точкой (ИЭТ). Чаще всего белки - более сильные кислоты, чем основания, и для них ИЭТ лежит при pH < 7. При различных pH изменяется форма макромолекул в растворе. В кислых и щелочных средах в макромолекуле преобладают заряды только одного знака, и вследствие их взаимного отталкивания молекулы распрямляются и существуют в растворе в виде длинных гибких цепочек. В ИЭТ макромолекулы свернуты в клубок вследствие взаимного притяжения разноименных зарядов. При этом происходит вытеснение сольватированного на молекуле белка растворителя, и белковое соединение выпадает в осадок. Практически все свойства растворов белков проходят через экстремальные значения в изоэлектрическом состоянии: осмотическое давление и вязкость минимальны в ИЭТ и сильно возрастают в кислой и щелочной средах вследствие возрастания асимметрии молекул, минимальна также способность вещества к набуханию и электропроводность, оптическая плотность раствора в ИЭТ максимальна. Изучение всех этих свойств используется для определения изоэлектрической точки белков. Значение PH, при котором диссоциация основных и кислотных групп в молекуле идёт в равной мере и полиион имеет наименьший заряд, называется изоэлектрической точкой (ИЭТ).
Для белков точка ИЭТ лежит в кислой среде. Наличие в изоэлектрической точке разноименно заряженных частиц приводит к сворачиванию гибких гигантских белковых молекул в спирали и клубки. В результате изоэлектрической точки многие свойства белков достигает экстремальных значений: становится наибольшей плотности, снижается до минимума их объём, вязкость, способность к набуханию, теряется способность молекулы направленно двигаться в электрическом поле.
По мере удаления от изоэлектрической точки в полиионе увеличивается число одноимённо заряженных групп, и тогда одноименно заряженный ионы, электростатически отталкиваются друг от друга, заставляют распрямляться гибкие молекулы белка, что облегчает проникновение молекул растворителя в белок т.е. способствует набуханию.
На рисунке 1 показано зависимость степени набухания белков от pH среды. Минимум набухания соответствует изоэлектрическому состоянию белка. Такое аномальное поведение белков заставляет технологов определять изоэлектрическую точку используемых белковых веществ и для достижения наилучших технологических результатов строго следят за pH среды перерабатываемого продукта.
Рисунок 1- Влияние pH среды на набухание белков
Обычно кривая содержит несколько экстремумов как справа, так и слева от изоэлектрической точки, это объясняется тем, что в проводимых экспериментах для создания требуемого pH среды используют, как правило, буферные растворы, содержащие определённое количество кислоты и соли. приводит к тому, что в исследуемой среде кроме ионов Н+ и ОН- находится ионы катиона соли и анионы кислоты, которые создают свои дополнительные изоэлектрические точки белка за счёт изменения конфигурации молекул ВМС.
Значительное влияние на набухание полимеров оказывает присутствие неорганических электролитов (нейтральных солей) . При этом неорганические электролиты по-разному снижают набухание ВМС полиэлектролитов.
Экспериментальная часть
Ддя определения ИЭТ белка желатина определяем степень набухания желатиновых пластинок в растворах с различным значением рН. И строим график зависимость степени набухания белков от pH среды.
Название полимера Желатин Температура 25С
Номер тигеля |
рН раствора |
Масса, мг |
||||
Сухой пластины с проволокой (mo) |
Набухшей за время пластины с проволокой (m,) |
Проволоки (g) |
Сухой пластины (mo) без проволоки (mo=mo-g) |
Набухшей пластины (m) без проволоки (m=m,-g) |
||
1 |
3,8 |
130 |
188 |
0 |
130 |
188 |
2 |
4,1 |
78 |
104 |
0 |
78 |
104 |
3 |
4,4 |
76 |
126 |
0 |
76 |
126 |
4 |
4,7 |
105 |
119 |
0 |
109 |
115 |
5 |
5,0 |
110 |
155 |
0 |
110 |
155 |
6 |
5,3 |
98 |
141 |
0 |
98 |
141 |
7 |
5,6 |
64 |
100 |
0 |
64 |
100 |
8 |
5,9 |
95 |
130 |
0 |
95 |
130 |
9 |
6,22 |
91 |
143 |
0 |
91 |
143 |
Определим степень набухания желатиновых пластинок в рН растворе
α1=(188-130)/130=0,45
α2=(104-78)/78=0,33
α3=(126-76)/76=0,64
α4=(115-105)/105=0,09
α5=(155-110)/110=0,41
α6=(141-98)/98=0,44
α7=(100-64)/64=0,56
α8=(130-95)/95=0,37
α9=(143-91)/91=0,57
На основе полученных результатов построим график зависимости степени набухания от рН среды и определим изоэлектрическую точку для желатина
ИЭТ=рН= 4,7
Вывод: Экспериментально весовым методом была определена ИЭТ белка желатина в стандартных условиях , в нашем случае рН=4,7.
Список литературы
Электронный учебно-методический комплекс дисциплины "Физическая и коллоидная химия: учебно-методический комплекс дисциплин Боровская Л.В. Тип: учебное пособие Кубанский государственный технологический университет, 350072, г. Краснодар, ул. Московская ФГУП НТЦ «ИНФОРМРЕГИСТР», », Депозитарий электронных изданий, Год издания: 2010 Место издания: Москва Физическая и коллоидная химия: методические указания по выполнению лабораторных работ для студентов всех форм обучения направления 19.03.04 Технология продукции и организация общественного питания / Сост.: Л.В. Боровская; Кубан. гос., технол. ун-т. Каф. химии. - Краснодар.: 2021. – 180 с. Исследование термодинамических свойств белково-полисахаридной системы методом дифференциальной сканирующей калориметрии . Бугаец Н.А.1, Тамова М.Ю.1, Боровская Л.В.1, МироноваЖурнал: Известия высших учебных заведений. Пищевая технология Учредители: Кубанский государственный технологический университет ISSN: 0579-30Номер: 5-6 (276-277) Год: 2003 |