Набухание ‑ процесс избирательный, т.е. высокомолекулярное соединение способно набухать только в тех жидкостях, которые по отношению к нему являются «хорошими» растворителями. Например, желатин набухает в воде, каучук – в углеводородах.
Причиной набухания является диффузия молекул воды в высокомолекулярное вещество. На первой стадии процесса поглощается небольшое количество жидкости. При этом выделяется тепло и происходит объемное сжатие (контракция). На второй стадии набухания поглощается больше жидкости, но без выделения тепла. При набухании часть воды поглощается продуктом, в результате диффузии молекул жидкости в продукт, а часть расходуется на сольватацию – взаимодействие растворителя с молекулами полимера. При увеличении воды в системе все большее количество белка переходит в раствор.
Набухание характеризуют степенью набухания а , под которой понимают относительное увеличение массы или объема полимера к определенному моменту времени при данной температуре, что описывается формулой:
или
где m0, m – масса полимера до и после набухания; V0, V – объем полимера до и после набухания.
На степень набухания полимера в одном и том же растворителе влияют температура, давление, рН среды, наличие электролитов.
Влияние рН среды особенно велико для высокомолекулярных полиэлектролитов (белков, целлюлозы). Минимальное набухание полиэлектролитов наблюдается в области изоэлектрической точки (например, для желатина при рН = 4,7), так как в этом случае макромолекула не заряжена, степень гидратации полярных групп минимальна и гибкая макромолекула сворачивается в клубок. При более низких или более высоких рН степень набухания растет. Зависимость степени набухания от рН раствора часто выражается седлообразной кривой с минимумом, соответствующим изоэлектрической точке, и двумя максимумами.
Набухание белков зависит от присутствия в растворителе электролитов, причем решающее влияние оказывают ионы, заряд которых противоположен заряду макромолекулы белка. Так, в щелочных растворах макромолекула белка несет отрицательный заряд, поэтому на набухание оказывают влияние катионы, в кислых растворах – анионы.
По способности влиять на процесс набухания анионы (при одном и том же катионе) могут быть расположены в определенной последовательности, называемой лиотропным рядом:
SO42- > C2O42- > CH3COO- > Cl- > NO3- > Br- > I- > CSN- .
Каждый предыдущий член такого ряда снижает степень набухания сильнее, чем последующий. Так в присутствии SO42- желатин набухает хуже, чем в чистой воде, а CSN- и I- усиливают процесс вплоть до перехода ограниченного набухания в неограниченное.
Степень набухания определяют весовыми или объемными методами. В объемных методах измеряют уменьшение объема жидкости, в которой происходит процесс набухания или оценивают увеличение объема набухающего полимера.
Цель работы ‑ изучение влияния рН среды на набухание желатина.
Порядок выполнения работы.В 7 мерных пробирок одинакового диаметра вносят по 0,3 г порошка желатина и наливают компоненты ацетатной буферной смеси в соответствии с нижеприведенной таблицей. Содержимое пробирок перемешивают, после оседания желатина измеряют объем слоя до набухания (V0) и оставляют на 30-40 минут, изредка перемешивая. Затем измеряют объем слоя набухшего желатина (V). Рассчитывают степень набухания (a), результаты измерений и расчетов заносят в таблицу.
№ |
Состав буферной смеси |
рН раствора |
Объем слоя желатина |
Степень набухания a |
||
0,2 моль/дм3 СН3СООNa |
0,2 моль/дм3 СН3СООН |
до набухания V0, см3 |
после набухания V, см3 |
|||
1 |
0,75 |
9,25 |
3,6 |
1 |
4 |
3 |
2 |
1,80 |
8,20 |
4,0 |
1 |
3,5 |
2,5 |
3 |
3,70 |
6,30 |
4,4 |
1 |
2,6 |
1,6 |
4 |
5,90 |
4,10 |
4,8 |
1 |
2,5 |
1,5 |
5 |
6,80 |
3,20 |
5,4 |
1 |
2,8 |
1,8 |
6 |
9,40 |
0,60 |
5,8 |
1 |
3,4 |
2,4 |
7 |
10 см3 дистиллированной воды |
1 |
4 |
3 |
Таким образом, при изучении влияния pH среды на набухание желатина было установлено, что минимум набухания наблюдается в изоэлектрической точке. Объясняется это тем, что в изоэлектрической точке заряд макромолекул белков минимален, а также минимальна и степень гидратации белковых ионов.