Обсуждение работы СОЗДАНИЕ ЭФФЕКТИВНЫХ ПРОДУЦЕНТОВ НАНОАНТИТЕЛ ПРОТИВ МИКОПЛАЗМЕННЫХ ИНФЕКЦИЙ - Студенческий научный форум

VI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2014

Личный портфель

Обсуждение работы СОЗДАНИЕ ЭФФЕКТИВНЫХ ПРОДУЦЕНТОВ НАНОАНТИТЕЛ ПРОТИВ МИКОПЛАЗМЕННЫХ ИНФЕКЦИЙ

Усупжанова Д.Ю. 1, Рогожин В.Н. 1, Рогожин В.Н. 2
1ФГБОУ ВПО «Московская Государственная Академия Ветеринарной Медицины и Биотехнологии им. К.И.Скрябина»
2Образовательный ЕГЭ-центр "ПАРАМИТА"
  • Сысолятина Елена 18.02.14 в 14:39 #
    Добрый день, Дарья! Скажите, пожалуйста, какие на сегодняшний день существуют методы идентификации M.hominis? Каковы их преимущества и недостатки? Спасибо.
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 16:22 #
      Добрый день,Елена! Культивировать Mycoplasma hominis в условиях in vitro довольно трудно, поэтому диагностика микробиологическими методами затруднена. Выявления классических антител в сыворотке крови имеет меньшее применение вследствие того, что Mycoplasma hominis обладает внутриклеточной локализацией, поэтому иммунный ответ организма выражен слабо. А значит, в сыворотке крови количество антител минимально. Наиболее адекватным современным методом диагностики Mycoplasma hominis является ПЦР- пол
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Брунчуков Виталик 20.02.14 в 08:10 #
    Здравствуйте. Скажите, для каких животных помимо верблюдов характерно упрощенное строение антител?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 16:30 #
      Здравствуй,Виталий! Столь упрощенное строение антител характерно для еще одного представителя семейства Верблюдовых - альпак и представителей класса Хрящевых рыб.
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

      • Брунчуков Виталик 30.03.14 в 22:52 #
        Большое спасибо за ответ. Буду в дальнейшем следить за Вашими работами. Успехов Вам и желаю удачи!)
        Ответить

        Обсуждение работ закрыто!

        • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 22:54 #
          Спасибо большое!
          Ответить

          Обсуждение работ закрыто!

  • [email protected] 21.02.14 в 01:16 #
    Здравствуйте. Дарья, не могли бы Вы объяснить почему классические антитела могут быть получены только в специальных эукариотических системах-гибридомах?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 17:07 #
      Добрый день,Елизавета! Почему классические антитела могут быть получены только в специальных ЭУкариотических клетках? Все дело в том, что классические антитела состоят из двух тяжелых и двух легких цепей,а каждая из них, в свою очередь из нескольких доменов. Это значит, что классическое антитело построено из нескольких белков, для правильной сборки которых необходимы специальные механизмы, которые у прокариот (E.coli) отсутствуют. В отличие от классических антител, наноантитела устроены проще -
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

      • [email protected] 30.03.14 в 22:02 #
        Спасибо, Дарья, за ответ. Желаю Вам успехов! Вы выбрали очень интересную тему. С нетерпением жду новых работ!
        Ответить

        Обсуждение работ закрыто!

        • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 22:12 #
          Спасибо! Исследования продолжаются!
          Ответить

          Обсуждение работ закрыто!

  • Толмачева Виктория Алексеевна 21.02.14 в 11:51 #
    Добрый день,Дарья! Скажите, пожалуйста, каковы основные клинические признаки заболевания, вызываемого Mycoplasma hominis? Спасибо.
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 17:21 #
      Здравствуйте,Виктория! До недавнего времени Mycoplasma hominis считались условно-патогенным микробами и нормальными компонентом микрофлоры человека. Однако, недавние исследования показали ошибочность данной точки зрения. Mycoplasma hominis способна вызвать у мужчин уретрит, эпидимит, к тому же около 34% раковых гиперплазий и опухолей простаты являются следствием вялотекущего хронического воспаления, вызванного микоплазмой. У женщин Mycoplasma hominis вызывает -вагинит, воспалительные заболеван
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Vetlova Valeria 22.02.14 в 16:06 #
    Здравствуйте, Дарья. Меня интересует для всех ли классов иммуноглобулинов характерна столь упрощенная форма?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 17:37 #
      Добрый день, Валерия! Столь упрощенная форма характерна лишь для иммуноглобулинов класса G (IgG) представителей семейства Верблюдовые и класса Хрящевых рыб.
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Бендиткис Кирилл Сергеевич 22.02.14 в 19:35 #
    Здравствуйте, Дарья. Не могли бы Вы объяснить что значит высокая валентность и специфичность наноантител ? Спасибо.
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 18:19 #
      Здравствуйте, Кирилл! Валентность - это число активных антигенсвязывающих центров антитела, т.е. суммарное число фрагментов антитела, связывающихся с антигеном (в данном случае- Mycoplasma hominis) Специфичность-это способность антитела распознавать строго определенную детерминанту (часть макромолекулы) антигена. Однако, в своей работе я говорю лишь о высокой специфичности и аффинности наноантител, а не высокой валентности. В свою очередь аффинность – сродство антитела к антигену, определяемое
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Кузьменко Валерия Витальевна 30.03.14 в 16:49 #
    Дарья, уточните, пожалуйста, каков размер наноантител?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 18:29 #
      Добрый день, Валерия! Наноантитела представляют собой всего один вариабельный домен от, и без того, упрощенных IgG верблюдов. Поэтому и размер, и масса у них крайне маленькие, по сравнению с классическими антителами: размер - несколько нанометров, масса – до 20-25 кДа. Это дает наноантитела существенные преимущества перед классическими антителами.
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Валиуллина Тансылу 30.03.14 в 17:07 #
    Здравствуйте , Дарья! что такое полигистидиновая последовательность?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 18:54 #
      Добрый вечер,Тансылу! Полигистидиновая последовательность - это цепочка из шести гистидинов (гистидин - гетероциклическая альфа-аминокислота). В данном случае они необходима нам для очистки наноантител методом Ni-аффинной хроматографии (за счет специфического связывания полигистидиновая последовательности с ионами Ni).
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Харлампиева Ксю 30.03.14 в 17:08 #
    Здравствуйте, Дарья! Скажите, пожалуйста, почему сконструированный ген клонировался под контролем промотора именно лактозного оперона, а не какого-нибудь другого?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 21:00 #
      Добрый вечер,Ксения! Лактозный оперон необходим нам индукции экспрессии наноантител в бактериальных продуцентах. Достигается это за счет добавления в среду с бактериями лактозы. Лактоза - это дешевый материал,поэтому экономически использование лактозного оперона выгодно. Это наиболее удобный, а потому распространенный индуцибельный оперон, используемый в молекулярном клонировании.
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • [email protected] 30.03.14 в 17:27 #
    Почему классические антитела экспрессируются так долго-24 часа?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 21:15 #
      Здравствуйте! Классические антитела состоят из двух тяжелых и двух легких цепей, а каждая из цепей, в свою очередь, состоит из нескольких доменов. Таким образом, каждое такое антитело состоит из нескольких белков, для правильной сборки которых требуются специальные клеточные механизмы. Таким образом, синтез классических антител- процесс трудоемкий, именно поэтому их экспрессия в эукариотических клетках занимает около 24 часов. В отличие от классических антител, наноантитела кодируются одним гено
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Нуруллина Альбина Радиковна 30.03.14 в 17:51 #
    Здравствуйте, Дарья! Собираетесь ли вы продолжать исследования в данной области?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 21:22 #
      Добрый вечер, Альбина! Да, я собираюсь продолжить исследования в данной области. Задачи стоят следующие: 1)Дизайн и внедрение в клиническую диагностику тест-системы для диагностики Mycoplasma hominis; 2)Изучение негативного действия данных наноантител на патоген ; 3)Присоединение к наноантителам видоспецифического Fc-фрагмента для усиленного привлечения макрофагов к борьбе против микоплазменной инфекции; 4)Проведение экспериментов in vivo и доклинические испытания разрабатываемого препарата нано
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Полиенко Александра Евгеньевна 30.03.14 в 17:51 #
    Здравствуйте, Дарья! Какая доля самостоятельно выполненной вами работы?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 21:26 #
      Добрый вечер, Александра! Данная работа была выполнена мной с первого этапа и до последнего. Освоены и применены различные молекулярно-биотехнологические,биохимические и иммунологические методы. Работа проводилась под контролем научного руководителя (соавтора работы) и будет продолжаться в дальнейшем! Спасибо за интерес к работе!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • [email protected] 30.03.14 в 17:59 #
    Дарья, ещё вопрос, применяется ли уже на практике данный диагностический метод?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 21:33 #
      Здравствуйте! На сегодняшний день проводится отработка условий экспрессии и очистки наноантител. Тест-система для диагностики Mycoplasma hominis находится на стадии доработки: проводятся дополнительные исследования и доклинические испытания. О результатах будет доложено позднее в следующем научном докладе, являющимся продолжения данной работы.
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

      • [email protected] 30.03.14 в 23:15 #
        Спасибо большое за развёрнутый ответ. Очень интересная работа затрагивающая актуальную проблему. Написано очень грамотно, понятным и доступным языком.Читать одно удовольствие. Желаю успехов в дальнейших твоих работах.
        Ответить

        Обсуждение работ закрыто!

        • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 23:20 #
          Спасибо! Мы продолжаем исследования и надеемся на успех!
          Ответить

          Обсуждение работ закрыто!

  • Бубяшева Юлия 30.03.14 в 19:20 #
    Дарья, поясните, пожалуйста, в чем состоит технология фаговых дисплеев?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 22:11 #
      Добрый вечер, Юлия! Суть технологии фаговых дисплеев заключается во встраивании (методами генной инженерии) в геном фага генов некоторых белков( в данном случае наноантител) , которые презентируются на поверхности самого фага. Далее проводят селекцию фагов путем аффинного связывания белков, представленных на поверхности, с антителами или какими-либо другими зондами. Таким образом, через технологию фаговых дисплеев, из множества антител, синтезируемые в организме верблюда в ответ за Mycoplasma
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Мельников Вячеслав 30.03.14 в 21:39 #
    Замечательно, тема занимательная, успехов в данной области исследования!
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 22:12 #
      Спасибо! Исследования продолжаются - нас ждут новые горизонты!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Никифорова Ксенiя 30.03.14 в 22:18 #
    Очень интересна работа. Заслуживает серьезного внимания медиков и биотехнологов. Проблема микоплазмоза, его диагностики и лечения уже давно интересует научные круги. И вот теперь мы стали немного ближе к победе в этой войне с болезнью. Эта работа весьма познавательна и интересна. Особенно поразила характеристика наноантител. В сравнении с обычными антителами, это настоящая находка для исследователя! При всем при том, производство с их использованием резко падает в цене, что позволит заинтерес
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 23:00 #
      Спасибо,Ксения, за столь высокую оценку!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Смарт Кристина 30.03.14 в 22:59 #
    Дарья! Вы выбрали интереснейшую тему для исследовательской работы. Прочитала все вопросы и Ваши ответы. Видно, что Вы человек знающий и перспективный. Удачи Вам в исследованиях, а я с нетерпением жду новых результатов Вашего труда. Тема, действительно, актуальна и заслуживает внимания.
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 23:09 #
      Спасибо,Кристина! Мы продолжим исследования!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Харлампиева Ксю 30.03.14 в 23:01 #
    Дарья, спасибо за ответ! Всё предельно ясно и понятно изложено. Мне очень понравилась Ваша работа. Если честно , я даже не знала, что носителями микоплазменной инфекции является такой высокий процент населения. Надеюсь что, исследования в данной области продолжатся, и проблема диагностики и лечения инфекции будет решена, а Ваши труды безусловно послужат этому. Буду ждать новых результатов исследования!
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 23:08 #
      Спасибо,Ксения! Ваша высокая оценка-лучший результат!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Sidorenko Annabelle 30.03.14 в 23:12 #
    Я придерживаюсь мнения Ксении.Работа перспективная и интересная.Я бы очень хотела ознакомится с дальнейшими исследованиями,т.к. тема животрепещущая и актуальная. Так держать,Дарья!
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 23:14 #
      Спасибо!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Малышева Анастасия 30.03.14 в 23:20 #
    Дарья, огромное спасибо за познавательную и интересную статью. Я думаю, что Ваши исследования очень актуальны и перспективны. Надеюсь, что вскоре Вы порадуете нас новыми результатами вашего исследования. Спасибо!
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 23:26 #
      Спасибо,Анастасия!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Баканова Анна Владимировна 30.03.14 в 23:29 #
    Добрый вечер Дарья,прочитав вашу работу была в восторге от прочитанного, так же я очень многое узнала и открыла для себя, по скольку тема очень интересна и конечно же актуальна, хочется надеяться что ваши исследования благополучно продолжаться и вы все дальше и дальше будете продвигаться в данной области. Хочется пожелать новых открытий и успехов!
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 30.03.14 в 23:59 #
      Спасибо,Анна!Мне дорого Ваше внимание и участие!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

  • Родионов Александр 31.03.14 в 00:55 #
    Здравствуйте, Дарья. Прочёл вашу работу, к слову, весьма перспективную. Хотелось бы уточнить одну деталь: ген, сконструированный на первом этапе включал в себя последовательность, кодирующую некий пептид pelB который направляет синтезированные в клетке наноантитела в периплазматическое пространство бактерии. Что это за пептид и откуда была выделена его кодирующая последовательность? Какова была его изначальная функция в клетке?
    Ответить

    Обсуждение работ закрыто!

    • Усупжанова Дарья Юрьевна 31.03.14 в 01:29 #
      Добрый вечер,Александр! pelB- лидерный пептид пектатлиазы В pelB получен на основе плазмиды pET (rF11)при помощи ПЦР - полимеразной цепной реакции. Изначально pelB был обнаружен у представителей семейства Энтеробактерий - Erwinia carotovora, вызывающих всем хорошо известное заболевание картофеля "черная ножка". Этот пептид принимает непосредственное участие в метаболизме бактерий, являясь частью секреторного аппарата. Спасибо,вопрос интересный!
      Ответить

      Обсуждение работ закрыто!

      • Родионов Александр 31.03.14 в 01:36 #
        Благодарю за ответ и желаю успехов в проведении будущих экспериментов и испытаний!
        Ответить

        Обсуждение работ закрыто!

        • Усупжанова Дарья Юрьевна 31.03.14 в 01:37 #
          Спасибо!
          Ответить

          Обсуждение работ закрыто!

Обсуждение работ закрыто!