XVII Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2025

Актуальность:Коронавирусная инфекция (COVID-19) — это инфекционное заболевание, которое вызывается вирусом SARS-CoV-2, от которого в 2019-2020 г. погибло более 6 млн. человек. В настоящее время коронавирусная инфекция является одной из самых распространённых инфекциий, которая входит в перечень сезонных заболеваний. Актуальным является изучение метода ELISPOT для оценки Т-клеточного ответа на вирусSARS-CoV-2.

Цель работы :изучитьособенности метода ELISPOT при оценке Т-клеточного ответа на вирус SARS-CoV-2.

Метод ELISPOT (от англ. Enzyme-Linked ImmunoSpot) был разработан в 1983 году в Швеции группой под руководством Cecil Czerkinsky. Исходно он предназначался для количественного определения В-лимфоцитов, секретирующих специфические антитела. В дальнейшем этот анализ был адаптирован к различным задачам, и, прежде всего, к идентификации и количественному определению клеток, вырабатывающих цитокины.

Метод ELISPOT позволяет выявить в кровиспецифические Т-лимфоциты (Т-клетки), которые играют ключевую роль в формировании ответной реакции на антигены вируса SARS-CoV-2.Т-клеточныйиммунитетспособен распознаватьи уничтожать инфицированные вирусом клетки, обеспечивая тем самым длительную защиту от Covid-19, даже в отсутствие антител.

Т-клетки начинают формироваться в организме раньше, чем антитела. Так называемая Т-клетка-хелпер посылает сигнал организму для синтеза антител. Т-клетка памяти обеспечивает долговременную защиту от инфекций, а Т-клетка-киллер атакует и уничтожает клетки, инфицированные вирусом. Оценка Т-клеточного иммунитета может служить дополнительным маркером для комплексной оценки иммунной защиты организма.[1]

Коронавирус SARS-CoV-2 проявляется в широком спектре клинических симптомов: от полностью бессимптомных случаев до тяжелых форм с серьезным поражением внутренних органов, что может привести к летальному исходу. Уровень иммунной защиты организма может играть ключевую роль в понимании индивидуальных особенностей течения заболевания. Для полноценной оценки иммунной защиты требуется провести комплексное исследование гуморального иммунитета (IgG, IgM) и Т-клеточного иммунитета.

Согласно результатам исследования, у 60% людей, перенесших новую коронавирусную инфекцию, обнаружены антитела класса G. В то же время Т-клетки сенсибилизирующие были выявлены у 93% из них.

Проведение исследования Т-клеточного иммунитета рекомендовано:

• тем людям, которые переболели Covid-19, но антитела IgG в их крови не обнаруживаются,

• людям с симптомами коронавируса, включая специфическую картинку на КТ, не имеющих в крови антител,

• тем, кто контактировал с людьми с подтвержденным коронавирусом,

• людям, прошедшим вакцинацию.[2]

Особенности метода ELISPOT при оценке Т-клеточного ответа:Моноклональные или поликлональные антитела, направленные против определённого антигена, наносятся на специальный носитель. Затем к этому носителю добавляются клетки из образца крови пациента и специфический антиген. Образец помещается в условия инкубации на определённое время. Если клетки из образца крови ранее контактировали с данным антигеном, они активируются и начинают выделять специфические цитокины (ɣ-интерфирон). Эти цитокины связываются с антителами, которые находятся на поверхности носителя. По завершении инкубации клетки, антиген и субстрат смываются с носителя, оставляя только антитела и связанные с ними цитокины. Затем образец проходит несколько этапов окрашивания по специальной методике, при которой краситель связывается исключительно с образовавшимися комплексами антитело - цитокин. В результате окрашивания на образце формируются специфические пятна, которые дают возможность провести анализ. По количеству пятен делается заключение о контакте человека с вирусом.[3]

Заключение: Лабораторный метод ELISPOT позволяет дать точную оценку эффективности Т-клеточного ответа на вирус SARS-CoV-2 .

Литература:

1. Внедрение нового метода определения клеточного иммунного ответа на основе технологии ELISPOT.Научно-исследовательский центр ОрГМУ.

2. К.Ю. Мухин ИДВНЭ ИМ. СВТ. ЛУКИ.

3. ОЦЕНКА ИММУННОГО ОТВЕТА SARS-СOV-2-СПЕЦИФИЧНЫХ Т-КЛЕТОК МЕТОДОМ ELISPOT. Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»Герасимова В.В., Колесник С.В., Кудлай Д.А., Гольдерова А.С.