XVII Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2025

Цель: Изучение влияния препарата дибазол на различные аспекты полового поведения крыс самцов и уровень сывороточного тестостерона в крови.

Задачи исследования.

1. Исследовать влияние дибазола на сексуальные мотивации и копулятивное поведение у крыс самцов с помощью методики Агмо А.

2. Изучить влияние препарата дибазола на процептивное и рецептивное половое поведение крыс-самцов.

3. Определить влияние исследуемого препарата на содержание половых гормонов в крови у крыс-самцов.

Актуальность

Производные бензимидазолов широко и давно используются в клинической практике. Препарат дибазол применяется с середины XX столетия в качестве гипотензивного средства. Установлено также, что наряду с антигипертензивной активностью, препарат обладает иммуномодулирующими и адаптогенными свойствами. Учитывая, что данный препарат может назначаться здоровым людям детородного возраста, сочли целесообразным провести комплекс исследований направленных на изучение репродуктивной токсичности, в которую входят методики изучения полового, сексуального и копулятивного поведения и определение содержания половых гормонов в крови.

Дизайн исследования.

Влияние препарата дибазол на сексуальные мотивации, половое и копулятивное поведение и уровень тестостерона в крови проводили по окончанию курса введения препаратов опытным самцам крыс.

Половое поведение у животных исследовали в установке «открытое поле», модифицированной под «площадку зоосоциальных предпочтений» (ПЗП). В центр площадки за 20 мин. до начала тестирования подсаживали испытуемого самца. Впоследствии, в центральную часть установки помещали испытуемую крысу самку. Наблюдения за животными вели в течение 1 часа при инфракрасном освещении. Отмечали: латентный период половой активности (время от подсадки самки до первого проявления самцом элементов «ухаживания» облизывания, обнюхивания, груминг); длительность половой активности (общий период времени, затраченное самцом на «ухаживание» за самкой и ее покрытий); число «эмоциональных» подходов самца к самке, а также количество покрытий самцом самку.

Изучение сексуальных мотиваций у самцов исследовали по методу AgmoA. В этих экспериментах использовали установку, которая представляет собой прозрачную арену из поликарбоната с прозрачными бортиками, разделенную на 3 отсека. Прозрачность боковых стенок и пола арены позволяет отслеживать поведение животных сверху, сбоку и снизу и, вести запись на компьютерной установке через видеокамеру без присутствия экспериментатора. После тестирования, просматривая видеозапись, оценивали сексуальные мотивации по следующим параметрам:

1. Время, проведенное в зоне стимуляции самца (социальный стимул)

2. Время, проведенное в зоне стимуляции самки (сексуальный стимул)

3. Количество посещений самцом зоны стимуляции самца

4. Количество посещений самцом зоны стимуляции самки

5. Балл предпочтения высчитывали по следующей формуле: время, проведенное в зоне сексуального стимула/ время, проведенное в зоне сексуального стимула+ время, проведенное в зоне социального стимула.

Уровень тестостеронаопределяли в сыворотке крови с помощью DRG FREE TESTOSTERONE ELISA KIT для твердофазного иммуноферментного анализа in vitro у человека согласно прилагаемой инструкции, предварительной раститровкой набора и подбором оптимального разведения сывороток крыс, выполнением теста на удвоение и теста внутреннего стандарта.

Принцип определения. Определяемый гормон из сыворотки исследуемой или калибровочной пробы связывается с первыми моноклональными антителами к гормону, нанесенными на поверхность лунки. С ним реагируют вторые моноклональные антитела к гормону, конъюгированные с пероксидазой хрена, образуя комплекс. После инкубации несвязанный конъюгат вымывали дистиллированной водой. Связанный фермент определяли количественно с помощью цветной реакции с хромогенным субстратом. Интенсивность проявляемого окрашивания пропорциональна концентрации свободного тестостерона в образце.

Подсчет результатов производится автоматически с помощью многоканального плашетного спектрофотометра ELx800, BioTec, США при длине волны 450 нм.

Результаты и обсуждения.

При изучении сексуальных мотиваций у крыс-самцов, выявлено, что препарат дибазол в дозировке 5 мг/кг и 160 мг/кг способствует трансформированному повышению сексуальных мотиваций у опытных самцов.

Препарат дибазол при 2-х месячном введении крысам-самцам влияет на половое поведение, активирует процептивность, на фоне угнетающего рецептивного поведения в дозе 5 мг/кг, и повышает половую активность при дозе 160 мг/кг.

Действие дибазола неоднозначно влияет на уровень половых гормонов в сыворотке крови. Так, препарат дибазол в дозе 5мг/кг при 2-х месячном введении самцам способствует увеличению уровня тестостерона в сыворотке крови, при приеме дибазола в дозе 160 мг/кг наблюдается обратный эффект. Также можно отметить, что у самцов получавших препарат в дозах 5 мг/кг и 160 мг/кг, наблюдается значительное увеличение прогестерона в крови. В случае определения уровня эстрадиола в сыворотке крови, при приеме дибазола в дозе 5 мг/кг зафиксировано недостоверное снижение гормона, однако при дозе 160 мг/кг уровень эстрадиола повышается

Литература

1. Аляутдин Р.Н. / Фармакология / под ред. Р.Н. Аляутдина – 2-изд., испр. - Москва ГЭОТАР-МЕД ,2004 -592с.

2. Ашмарин И.П., Фрейдлин И.С. Гипотеза об антителах как новейших регуляторах физиологических функций, созданных эволюцией // Журн. эволюц. биохим. и физиол. 1989. Т. XXV, № 2. С. 176-182.

3. Аничков С.В., Порай-Кошиц Б.А., Эфрос Л.С., Гинзбург О.Ф. Спазмолитическое средство «дибазол». Авт. свид. № 528095. Заявл. 25.11.1949. Опубл. 15.09.1976. Бюлл. № 34, 1976. С. 14–15.

4. Аничков С.В., Беленький М.А. Учебник фармакологии. Л.: Медгиз. Ленингр. отд-ние, 1955. 452 с.

5. Амстиславская Т.Г., Гладких Д.В., Белоусова И.И., Маслова Л.Н., Попова Н.К. Влияние сексуального опыта на половое мотивационное и копуляторное поведение самцов крыс. Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2010. 96 (2): 154–162.

6. Амстиславская Т.Г., Осипов К.В. Половая активация самцов крыс: поведение и гормональный ответ. Бюл. СОРАМН. 2003. 3: 112–114.

7. Белозерцева И.В. К методике изучения фармакологической активации полового поведения самцов крыс. Журн. высш. нервн. деят. им. И.П. Павлова. 2000. 50 (4): 724–729.