XVII Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2025

Исследования в области иммуногенетики туберкулёза являются одними из приоритетных направлений, поскольку эффективность лечения и, следовательно, исход заболевания в большинстве случаев определяются иммунными и генетическими особенностями макроорганизма [1–4]. Противотуберкулёзный иммунитет связан с хелперами первого порядка, что характеризуется повышением уровня IL-2, TNFα, IFNγ [5–7]. Именно протекторная роль иммунитета связана с продукцией IFNγ, а низкая эффективность обусловлена хелперами второго порядка и, как следствие, продукцией IL-4 [8,9].

Считается, что прогрессирование туберкулёза лёгких связано с повышенной продукцией провоспалительных цитокинов [10]. TNFα участвует во многих иммунологических реакциях, обеспечивающих надёжный гомеостаз, и рассматривается как ключевой медиатор гранулематозного воспаления, обеспечивающего контроль туберкулёзной инфекции в организме человека [10]. Таким образом, TNFα — один из ведущих цитокинов, ответственных за развитие тканевых поражений и некроза лёгочной ткани.

Цель данного исследования — изучить взаимосвязь полиморфизма гена TNFa с эффективностью проведения интенсивной фазы химиотерапии у больных туберкулёзом лёгких и формированием размеров полостей распада.

Методика исследования. Исследование выполнено в соответствии со стандартами надлежащей клинической практики (Good Clinical Practice) и принципами Хельсинкской декларации. Протокол исследования одобрен комитетом по этике КГМА-филиал ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России (вы- писка из Протокола № 04/05 от 27.05.2021 г.). У 100 пациентов для проведения молекулярногенетических исследований брали образцы цельной венозной крови в пробирку с ЭДТА. Геномную ДНК выделяли с помощью наборов реагентов Arrow Blood DNA 500 из цельной крови (на станции NorDiag Arrow). Проводили постановку ПЦР в режиме реального времени с использованием наборов реагентов для генотипирования однонуклеодитных полиморфизмов: -308G>A (rs1800629) гена TNF (ООО НПФ «Литех», кат. № 01177–100, "Мутация фактора некроза опухоли альфа, 120 реакций. Комплект реагентов для АС-ПЦР выявления полиморфизма G-308A в гене TNF").

Постановка проводилась согласно протоколу производителя реагентов. Все пациенты были разделены на две группы: с наличием (57 человек) и отсутствием (43 человека; группа сравнения) деструктивных изменений в лёгких.

Исследованный полиморфизм -308G>A гена TNFа в выборке находился в соответствии с равновесием Харди—Вайнберга (р>0.05).

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием программных пакетов IBM SPSS Statistica 26.0 и MS Excel 2013. Ассоциации генотипов изученных ДНК-маркеров с предрасположенностью к туберкулёзу лёгких оценивали с помощью анализа таблиц сопряжённости 2×2 с расчётом критерия 2(df=1) и отношения шансов (OR) с 95 % доверительными интервалами (CI) [11].

Результаты исследования. Ранее нами установлено [10], что впервые выявленный туберкулёз лёгких ассоциировался с генотипом GG гена TNFа в 93.3 % (p=0.027) с формированием деструктивных изменений в лёгких, а рецессивный генотип GA гена TNFа в 71.9 % связан с отсутствием деструктивных изменений в лёгочной ткани (p=0.027). Представлялось интересным провести анализ ассоциации полиморфизма гена TNFа с формированием диаметра полостей распада и эффективностью интенсивной фазы химиотерапии у больных туберкулёзом лёгких (табл. 1).

Выявлено, что генотип GG гена TNFа в 2.3 раза чаще ассоциирован с формированием полости распада до 2 см (р<0.0001), в 4.5 раза чаще — с формированием полости распада от 2 до 4 см в диаметре (р=0.38) и в 2 раза — с полостью распада более 4 см в диаметре (р=0.1) по сравнению с генотипом GА (табл. 1).

ЛИТЕРАТУРА

1. Bo H., Moure U.A.E., Yang Y., Pan J., Li L., Wang M., Ke X., Cui H. Mycobacterium tuberculosis-macrophage interaction: Molecular updates // Front Cell. Infect. Microbiol. 2023. Vol. 13. ID 1062963. doi: 10.3389/ fcimb.2023.1062963

2. Ndong Sima C.A.A., Smith D., Petersen D.C., Schurz H., Uren C., Möller M. The immunogenetics of tuberculosis (TB) susceptibility // Immunogenetics. 2023. Vol. 75, N 3. P. 215–230. doi: 10.1007/s00251-022-01290-5

3. da Silva Graça Amoras E., de Morais T.G., do Nascimen- to Ferreira R., Gomes S.T.M., de Sousa F.D.M., de Paula Souza I., Ishak R., Vallinoto A.C.R., Queiroz M.A.F. Association of cytokine gene polymorphisms and their impact on active and latent tuberculosis in Brazil’s amazon region // Biomolecules. 2023. Vol. 13, N 10. ID 1541. doi: 10.3390/biom13101541

4. Natarajan S., Ranganathan M., Hanna L.E., Tripathy S. Transcriptional profiling and deriving a seven-gene sig- nature that discriminates active and latent tuberculosis: an integrative bioinformatics approach // Genes (Basel). 2022. Vol. 13, N 4. ID 616. doi: 10.3390/genes13040616

5. Suzukawa M., Takeda K., Akashi S., Asari I., Kawashi- ma M., Ohshima N., Inoue E., Sato R., Shimada M., Suzuki J., Yamane A., Tamura A., Ohta K., Tohma S.,Teruya K., Nagai H. Evaluation of cytokine levels using QuantiFERON-TB Gold Plus in patients with active tuberculosis // J. Infect. 2020. Vol. 80, N 5. P. 547–553. doi: 10.1016/j.jinf.2020.02.007

6. Bade P., Simonetti F., Sans S., Laboudie P., Kissane K., Chappat N., Lagrange S., Apparailly F., Roubert C., Duroux-Richard I. Integrative Analysis of human macrophage inflammatory response related to mycobacterium tuberculosis virulence // Front. Immunol. 2021. Vol. 12. ID 668060. doi: 10.3389/fimmu.2021.668060

7. Boni F.G., Hamdi I., Koundi L.M., Shrestha K., Xie J. Cytokine storm in tuberculosis and IL-6 involvement // Infect. Genet. Evol. 2022. Vol. 97. ID 105166. doi: 10.1016/j.meegid.2021.105166

8. Чурина Е.Г., Уразова О.И., Новицкий В.В., Ситни- кова А.В., Бармина С.Э. Функциональный поли- морфизм генов провоспалительных цитокинов при туберкулезе легких // Мед. иммунол. 2019. Т. 21, № 1. С. 149–156. doi: 10.15789/1563-0625-2019-1-149-156

9. Тарасова Л.Г., Стрельцова Е.Н., Попова Н.А. Пато- генетическая роль TNF-α, IL-1β, IL-10 и аутоантител к коллагену I и III типов при туберкулезе легких // Туберкулез и болезни легких. 2015. № 5. С. 177–178.

10. Алыменко М.А., Валиев Р.Ш., Валиев Н.Р., Полони- ков А.В., Трагира И.Н., Шеенков Н.В. Ассоциация полиморфных вариантов генов ферментов био- трансформации ксенобиотиков и цитокинов с деструкцией легочной ткани у больных туберкулезом // Туберкулез и болезни легких. 2022. Т. 100, № 8. С. 25–30. doi: 10.21292/2075-1230-2022-100-8-25-30