XVI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2024

Полимерные производные гуанидина находят широкое применение в качестве активных веществ для дезинфицирующих препаратов. Данный тип веществ имеет следующие преимущества: широкий спектр антимикробной активности (бактерии, вирусы, грибки); высокая эффективность, что позволяет применять рабочие растворы дезинфицирующих препаратов с низкими концентрациями активных веществ и соответственно с низкой токсичностью для людей и домашних животных; отсутствие коррозионной активности, цвета, запаха и т.д.

В данной работе представлены результаты анализа бактерицидных, фунгицидных и вироцидных свойств препаратов созданных на основе «Тефлекс- индустриальный» произведенный по новой технологии 40% полигексаметиленгуанидин гидрохлорид (ПГМГ), (1).

Также впервые показано наличие спороцидных свойств у препаратов на основе ПГМГ.

Тефлекс испытан на токсичность и безопасность в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 (п. 1.2, 1.3), «Нормативные показатели безопасности и эффективности дезинфекционных средств, подлежащие контролю при проведении обязательной сертификации» № 01-12/75-97 (п. 1.1 – 1.7, 2.1 – 2.9); МУ 1.2.1105-02 и «Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности» М., 1998, ч.1,2. в Аккредитованном испытательном центре ФГУ «РНИИТО им. Р.Р. Вредена Росмедтехнологий».

Параметры оценки включали острую токсичность при введении в желудок, на неповрежденную кожу, при ингаляции, на слизистые, аллергенные свойства (ГНТ, ГЗТ). По изученным параметрам препарат Тефлекс относится к 1V и V классу мало опасных веществ, не обладает раздражающим действием на кожу, не обладает сенсибилизирующей активностью.

Вирулоцидные свойства препарата изучены в суспензионных опытах с тест – вирусами: аденовирусом 6 серотипа, вирусом полиомиелита 1 типа и вирусом гепатита В в культуре клеток Hep-2 методами световой микроскопии и методами флюоресцирующих антител и ПЦР в экспертной лаборатории МЗРФ «Городского диагностического вирусологического центра СПб» и в Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р.Р. Вредена Росмедтехнологий».

Антибактериальные и антифунгальные свойства препарата in vitro определяли против Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Escherichia coli, Candida albicans, Penicillium chrysogenum и Aspergillus fumigatus в Испытательном центре кафедры микробиологии СПбГМА им. И.И. Мечникова.

Экспертная оценка антисептических свойств Тефлекса in vivo была проведена в Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р.Р. Вредена Росмедтехнологий» с участием 15 испытателей в условиях искусственного обсеменения поверхности рук взвесью тест-культуры E. coli, в отношении естественной микрофлоры рук, при обработке рук хирургов, кожи инъекционного и операционного поля.

Спороцидная активность Тефлекса против бактериальных эндоспор определялась в 3-х независимых лабораториях:

1. В Аккредитованном Испытательном лабораторном центре (ИЛЦ) ФГУ «РНИИТО им. Р.Р. Вредена Росмедтехнологий» в 2008 году в отношении спор тест – штамма Clostridium perfringens № 276 чашечно-суспензионным методом при микробной нагрузке 105 КОЕ/мл и 107 КОЕ/мл при времени действия препарата 10 сек, в том числе в условиях органической нагрузки (50% сыворотки).

2. Laboratory of Hygiene and Microbiology, Dept. of Public Health, University of Helsinki в 2006 году проводила исследования спороцидной активности в соответствии с европейским стандартом EN 13704 IDS с тест-штаммом Bacillus subtilis (АТСС 6633) суспензионным методом

3. Prince Edward Island Food Technology Center, Bedfordshire, England. Исследования проводились в декабре 2007 года с тест-штаммом Clostridium difficile (АТСС 9689) суспензионным методом с временем контакта с препаратом от 28 сек до 15 мин.

Материалы и методы

Рабочие растворы приготовлялись ex tempore смешиванием соответствующих количеств препарата и водопроводной воды. Были протестированы рабочие растворы следующих концентраций: 0,1%; 0,3%;0,5%;1%;2%;3%;4%;5%. Рабочие растворы 10% и 15% концентраций были протестированы на эффективность в отношении Aspergillus niger. Всу рабочие растворы были прозрачными и бесцветными.

Следующие штаммы микроорганизмов были использованы как тест объекты: Escherichia coli 1257; Staphylococcus aureus 906; Pseudomonas aeruginosa 15442; Candida albicans 15; Trichophyton gypseum, Aspergillus niger; Mycobacterium B₅; (получен из Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов) вирус гепатита Б (изолирован из сыворотки крови пациентов инфецированных HBV с высоким содержанием HBsAg антигена (позитивный сигнал на ИФА с разведениями до 10^-9)); вирус полиомиелита первого типа (штамм Сабина), вакцинный, Рег N584/02, полученный из коллекции National Institute for Biological Standards and Control, UK; аденовирус шестого типа.

Клеточная культура Hep-2 для вируса полиомиелита была получена из Национального центра диагностики полиомиелита. Клеточная культура для аденовируса была получена из музея клеточных культур Института гриппа.

В процессе исследования бактерицидной и фунгицидной активности был использован универсальный нейтрализующий раствор содержащий Твин-80, сапонин, гистидин, лецитин, цистеин. В процессе исследования вируцидной активности в качестве нейтрализующего раствора была использована инактивированная сыворотка крупного рогатого скота.

Были использованы следующие тест-объекты контаминированные микроорганизмами: поверхности различных материалов: линолеум, плитка, окрашенная и неокрашенная древесина, окрашенный металл, пластик, стекло, кожзаменитель, кожа.

Методы обработки: протиранием и орошением (горизонтальная ориентация, для плитки и окрашенного дерева – вертикальная ориентация); расход препарата при орошении: 150 мл/м² распылителем «Квазар»; расход препарата при протирании: 100 мл/м².

Исследование бактерицидной и фунгицидной активности

Обсемененные объекты инкубировали с рабочими растворами препарата в течение 60 минут при комнатной температуре. Физраствор был использован в качестве контроля. Дезинфекцию останавливали добавлением нейтрализующего раствора (см. выше).

Исследование вируцидной активности

Вируцидная активность исследовалась на следующих объектах: плитка, кожзаменитель, дерево

Индекс эффективности дезинфекции при вирусной обсемененности: не менее 100%.

Для вируса полиомиелита

Предварительный эксперимент in vitro

Замороженные пробы вируса полиомиелита были проведены через 1-2пассажа на клеточной культуре для восстановления инфекционного титра. Полученная вирусная суспензия титровалась в клеточной культуре в разведении 10^-3 – 10^-8.

Суспензионный метод исследования без органического загрязнения

Для получения разведения 10^-1, 0,5 мл вирусной суспензии разбавлялось с 4,5 мл среды DMEM.

Одинаковые объемы вирусной суспензии и растворов Тефлекса смешивались и оставлялись на время экспозиции.

1 мл каждой смеси смешивались далее с 5 мл нейтрализующего раствора (40% инактивированной сыворотки крупного рогатого скота) и оставлялось на 5-10 минут. Далее смесь распределялась по 4 пробиркам с клеточной культурой, 0,2 мл на пробирку.

Пробирки инкубировались при 37 °С. Наблюдения проводились каждый день в течение пятидневного периода.

Контроль (4 пробирки):

Чистая клеточная культура

Вирус (смесь вирусной суспензии в разведении 10^-1 и среды DMEM в объеме равном объему смеси препарата и нейтрализующего раствора в эксперименте)

Соответствующие растворы препарата (вместо смеси вирусной суспензии и нейтрализующего раствора добавлялись соответствующие объемы среды)

Нейтрализующий раствор (вместо дезинфицирующего раствора добавлялись соответствующие объемы среды)

Результаты предварительного эксперимента in vitro

Пять дней наблюдений не выявили цитопатического влияния на клеточные культуры во всех случаях. Вместе с контрольнымирезультатами это подтверждает полную нейтрализацию вирусов протестированными разведениями средства Тефлекс при соответствующих экспозициях.

Основной эксперимент

В дальнейшем исследовались контаминированные объекты по той же методике.

Для аденовируса

Предварительный эксперимент in vitro

Предварительно аденовирус был проведен через 1-2пассажа на клеточной культуре для восстановления инфекционной активности.

Клеточная культура Hep-2 выращивалась на чашках с покровными стеклами в среде DMEM c 10% сывороткой крупного рогатого скота.

Покровные стекла использовались для проведения экспериментов с флуоресцентными антителами из их набора для флуоресцентной диагностики аденовируса произведенного Институтом гриппа. Жидкая фаза использовалась для изучения присутствия ДНК аденовируса методом ПЦР с использованием набора произведенного институтом иммунологии.

Использовалось разведение аденовируса 10^-1.

Равные объемы вирусной суспензии (10^-1) и растворов Тефлекс смешивались и оставлялись на время экспозиции.

Один миллилитр каждой смеси смешивался с 5 мл нейтрализующего раствора (40% инактивированной сыворотки крупного рогатого скота) и оставлялся на 5-10 минут. 0,2 мл каждой смеси использовалось затем для инфицирования чашек с клеточной культурой.

Контроли:

Клеточная культура (не инфицированная)

Клеточная культура инфицированная аденовирусом (10^-1)

Клеточная культура с добавлением препарата (вместо вирусной суспензии и нейтрализующего раствора добавлялась среда)

Клеточная культура с добавленным нейтрализующим раствором (вместо вирусной суспензии и препарата добавлялась среда)

Чашки инкубировались при температуре 37 °С, клеточные культуры ежедневно проверялись под микроскопом в течение пятидневного периода. Пробы для тестирования брались в день 1 (24 часа после инфицирования) и в день 5.

Результаты предварительного эксперимента invitro

Микроскопия

В условиях эксперимента (клеточная культура + аденовирус (10^-1) + соответствующие рабочие растворы препарата с нейтрализующими растворами) в течение 5 дней наблюдений не было выявлено разрушение клеточного монослоя. В этом смысле результаты соответствовали контролю клеточной культуры.

Разрушение клеточного монослоя наблюдалось в следующих чашках:

Клеточная культура инфицированная аденовирусом: цитопатическа активность (++++) – на четвертый день наблюдений.

Клеточная культура с добавлением препарата: разрушение клеток (++++) на второй день наблюдений.

Флуоресцентные антитела

Монослой клеток Hep-2 (в эксперименте и контроле) на покровных стеклах был исследован на присутствие аденовирусов с помощью флуоресцентного аденовирусного иммуноглобулина.

Пробы приготавливались согласно стандартной методике и изучались под люминесцентным микроскопом с иммерсионным объективом х90.

Эксперимент выявил присутствие специфической флуоресценции только в цитоплазме клеток Hep-2 в контрольной пробе клеточной культуры инфицированной аденовирусом.

В пробах предварительного эксперимента и контрольных пробах содержащих препарат и нейтрализующий раствор не было выявлено специфической флуоресценции.

ПЦР

Одновременно со снятием покровных стекол брались пробы для определения аденовируса с помощью ПЦР в первый и пятый дни. Брались пробы предварительного эксперимента и всех контролей.

Аденовирусная ДНК была выявлена только в контрольной пробе клеточной культуры инфицированной аденовирусом. В пробах первичного эксперимента и всех других контролях аденовирусная ДНК не была выявлена.

Основной эксперимент

В дальнейшем исследовались контаминированные объекты по той же методике.

Для вируса гепатита В

Было использовано непрямое определение инактивации ВГВ:

Демонстрация нарушения ВГВ антигенности (поверхностный антиген ВГВ и HBeAg)

Разрушение ВГВ ДНК

В качестве субстрата была использована сыворотка с высокой белковой нагрузкой (52% с добавленным сухим человеческим альбумином) и высокой концентрацией вирусов. При подготовке субстрата были получены следующие параметры:

HBsAg – позитивная реакция, концентрация 150 нг/мл

HBeAg – позитивная реакция

Концентрация HBV – 1,5х10⁶ Geq/ml

Определение начальных параметров субстрата для тестирования дезинфектанта проводилось с помощью набора Hoffman-La Roche на автоматическом анализаторе CobasCore II для ИФА анализа и на CobasAmplicore для ПЦР.

Для тестирования дезинфекции поверхностей в помещениях 50 мкл субстрата в тестируемых разведениях носилось на плитку или на кожзаменитель и высушивалось в течение 60 минут при комнатной температуре. Препарат наносился путем протирания или орошения согласно инструкции производителя при температуре 25°С +/- 2°С (5). После обработки поверхность высушивалась и субстрат экстрагировался с 1 мл физиологического раствора в течение 120 минут. Далее экстракт анализировался на присутствие ВГВ описанными выше методами.

Согласно методическим указаниям DGHM (Немецкое общество гигиены и микробиологии), способность препарата инактивировать ВГВ также свидетельствует о его эффективности в отношении ВИЧ.

Исследование спороцидной активности

Исследование спороцидной активности проводилось согласно стандарту ЕС EN14347 (Химические дезинфектанты - Количественный суспензионный тест для оценки спороцидной активности, фаза 1). Для оценки спороцидной активности был использован штамм BacillussubtilisАТСС 6633 (Bactec, USA).

Растворы тестируемого препарата приготовлялись на жесткой воде в трех разведениях, включая разведение рабочего раствора препарата.

Применялся метод разведения-нейтрализации. Перед тестированием все реагенты приводились к температуре 20°С на водной бане.

В пробирке смешивались 8 мл раствора препарата и 1 мл воды. К смеси добавлялся 1 мл споровой суспензии содержащей 3,0х10⁸ – 1х10⁹ КОЕ/мл. Содержимое пробирки перемешивалось и инкубировалось при 20°С в течение 60 минут.

Далее 0,1 мл протестированного раствора переносилось в пробирку с 10 мл нейтрализующего раствора (30г/л полисорбат 80 + 3 г/л лецитин). Компоненты смешивались и инкубировались на водяной бане в течении 30 минут. После нейтрализации брались две пробыпо 1 мл и переносились на чашки Петри с TSA. Чашки инкубировались при 36°С 24 часа. Далее определялось количество КОЕ.

Изучение спороцидной активности с помощью электронной микроскопии

1 мл споровой суспензии в концентрации 5х10⁴ спор/мл смешивалось с 1 мл препарата Тефлекс. В контрольную пробу вместо препарата добавлялся 1 мл воды. Пробы инкубировались 2 часа, 24 часа и 48 часов при постоянном перемешивании. Споры отмывались в 10-кратном объеме дистиллированной воды и центрифугировались. Осадок использовался для электронной микроскопии. Пробы спор фиксировались 10-12 часов в 2.5% растворе глютарового альдегида в 0,15 М фосфатном буфере (рН 7,2), отмывались в том же буфере и помещались в Аральдит. Сверхтонкие срезы производились алмазным ножом на ультратоме LKB и контрастировались уранил ацетатом и цитратом свинца. Пробы визуализировались в JEM-100C электронном микроскопе.

Результаты исследования и их обсуждение:

Таблица 1. Эффективность препаратов Тефлекс для дезинфекции различных тест-объектов контаминированных Staphylococcus aureus

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Среднее число микроорганизмов после обработки, M+/-m (n=18)	Редукция числа микроорганизмов	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
0,1	0,01	60	3	5x104	протирание
0,5	0,05	15 30	29.3+/-3.1 1	5x103 1,5x105
0,1	0,01	60	0	>1,5x105	орошение

Изначальная обсемененность тест-объектов S. aureus (1.5+/-0.2)x10⁵ КОЕ/см2

Таблица 2. Эффективность препаратов Тефлекс для дезинфекции различных тест-объектов контаминированных Pseudomonas aeruginosa

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Среднее число микроорганизмов после обработки, M+/-m (n=18)	Редукция числа микроорганизмов	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
0,1	0,01	60	5	3,2x104	протирание
0,5	0,05	15 30	31.2+/-2.5 1	5x103 1,6x104
0,1	0,01	60	0	>1,6x105	орошение

Изначальная обсемененность тест-объектов P. aeruginosa (1.6+/-0.1)x10⁵ КОЕ/см2

Таблица 3. Эффективность препарата Тефлекс для дезинфекции различных тест-объектов контаминированных Escherichia coli

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Среднее число микроорганизмов после обработки, M+/-m (n=18)	Редукция числа микроорганизмов	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
0,1	0,01	60	2	8x104	протирание
0,5	0,05	15 30	9 0	1,8x104 >1,6x105
0,1	0,01	60	0	>1,6x105	орошение

Изначальная обсемененность тест-объектов E. coli (1.6+/-0.1)x10⁵ КОЕ/см2

Таблица 4. Эффективность препарата Тефлекс для дезинфекции различных тест-объектов контаминированных MyicobacteriumB₅

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Число тест-объектов/число дезинфецированных тест-объектов (n=20)	Эффективность дезинфекции,%	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
0.5	0.05	90 120	20/12 20/20	60 100	протирание
1.0	0.1	60 90	20/11 20/20	55 100
2.0	0.2	60 90	20/10 20/20	50 100	орошение

Результаты приведенные в таблицах 1-3 показывают, что препаратов Тефлекс обладает бактерицидными свойствами уже в очень низких концентрациях (0,05% по действующему веществу). Редукция числа жизнеспособных микроорганизмов составила 10⁴. Данные результаты согласуются с результатами тестов на бактерицидность проведенными согласно стандартам EN (результаты не показаны). Mycobacterium B₅ показала более высокую резистентность по отношению к дезинфецирующему средству, что выразилось в необходимости более длительных экспозиций.

Фунгицидные свойства препарата проявлялись при более высоких концентрациях действующего вещества (таблицы 5-7). Candida albicans показал наиболее слабую резистентность к препарату с наличием фунгицидного эффекта уже при 0,05% концентрации, в то время как для Aspergillus niger требовалась концентрация 1,5% и более длительная экспозиция. Эти данные также соответствуют результатам полученным в экспериментах выполненных согласно стандартам EN (результаты не показаны).

Таблица 5. Эффективность препаратов Тефлекс для дезинфекции различных тест-объектов контаминированных Candida albicans

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Среднее число микроорганизмов после обработки, M+/-m (n=18)	Редукция числа микроорганизмов	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
0.5	0.05	30 60	26.1+/-2.0 2	0.6x104 8x104	протирание
1.0	0.1	15 30	23.9+/-1.6 0	0.7x104 >1,6x105
2.0	0.2	30 60	25.7+/-2.8 2	0.6x104 8x104	орошение

Изначальная обсемененность тест-объектов C. Albicans(1.6+/-0.1)x10⁵ КОЕ/см2

Таблица 6. Эффективность препаратов Тефлекс для дезинфекции различных тест-объектов контаминированных Trichophyton gypseum

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Число тест-объектов/число дезинфецированных тест-объектов (n=20)	Эффективность дезинфекции,%	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
2.0	0.2	60 90	20/15 20/20	<99.99 100	протирание
3.0	0.3	30 60	20/13 20/20	<99.99 100
2.0	0.2	30 60	20/17 20/20	<99.99 100	орошение

Таблица 7. Эффективность препаратов Тефлекс для дезинфекции различных тест-объектов контаминированных Aspergillus niger

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Число тест-объектов/число дезинфецированных тест-объектов (n=20)	Эффективность дезинфекции,%	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
10.0	1.0	90 120 180	10/0 10/2 10/2	<99.99 <99.99 <99.99	Двойное протирание с 15-минутными интервалами
15.0	1,5	120 180 240	10/3 10/8 10/10	<99.99 <99.99 100	Двойное орошение с 15-минутными интервалами

Таблица 8. Вируцидная активность препаратов Тефлекс против вируса гепатита В (ВГВ)

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Число тест-объектов/число дезинфецированных тест-объектов (n=20)	Эффективность дезинфекции,%	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
2.0	0.2	30 60	15/11 15/15	<99.99 100	протирание
3.0	0.3	30 60	15/10 15/15	<99.99 100	орошение
4.0	0.4	15 30	15/12 15/15	<99.99 100

Таблица 9. Вируцидная активность препаратов Тефлекс против вируса полиомиелита

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Число тест-объектов/число дезинфецированных тест-объектов (n=20)	Эффективность дезинфекции,%	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
3.0	0.3	30 60	12/11 12/12	<99.99 100	протирание
3.0	0.3	60 90	12/7 12/12	<99.99 100	орошение
4.0	0.4	30 60	12/10 12/12	<99.99 100

Таблица 10. Вируцидная активность препаратов Тефлекс против аденовируса

Рабочие растворы, %		Время экспозиции, мин	Число тест-объектов/число дезинфецированных тест-объектов (n=20)	Эффективность дезинфекции,%	Метод обработки
По препарату	По ПГМГ
3.0	0.3	30 60	12/9 12/12	<99.99 100	протирание
3.0	0.3	60 90	12/10 12/12	<99.99 100	орошение
4.0	0.4	30 60	12/11 12/12	<99.99 100

Вируцидные свойства препарата проявляются при концентрациях и времени экспозиции схожих с данными параметрами для фунгицидности (таблицы 8-10). Между различными штаммами вирусов не было выявлено различий в чувствительности к препарату.

Таблица 11. Спороцидная активность препаратов Тефлекс

Bacillus subtilis	Исходное количество	После теста	Редукция
0.005%	1.12 x 108	>1 x 104	< 1x104
0.05%	1.12 x 108	>1 x 104	< 1x104
0.4%	1.12 x 108	2.82 x 103	8.38x103

Таблица 12. Спороцидная активность Тефлекса

Bacillus subtilis	Исходное количество	После теста	Редукция
0.4%	1.12 x 108	1.03 x 103	9x103
1%	1.12 x 108	4.8 x 102	6.4x104

Данные представленные в таблицах 11-12 впервые демонстрируют наличие спороцидной активности препаратов на основе ПГМГ. Данная активность проявляется при концентрации препаратов выше 1%. Наличие спороцидной активности является очень важной характеристикой дезинфицирующих средств, позволяющей классифицировать их как дезинфектанты высокого уровня. До настоящего времени, согласно нашим данным, для препаратов на основе ПГМГ синтезированного по традиционным технологиям не было показано спороцидной активности.

С целью дальнейшего изучения механизма спороцидной активности препаратов было проведено электронно-микроскопическое исследование. Как показано на рисунке 1, обработка Тефлексом вызывала градуальное разрыхление оболочки с последующих истончением и стратификацией в виде круглых формаций и частичного разрушения мембраны и экзоспорума. При длительных экспозициях (24 и 48 часов) эти эффекты усиливались и приводили к значительным деструктивным изменениям в мембранных структурах споры.

Рисунок 1. Морфологические изменения в спорах B.cereus spores после обработки 1% раствором Тефлекс.

a) контроль; б)экспозиция 2 часа; в)экспозиция 24 часа; г) экспозиция 48 часов

a. б.

в. г.

Выводы.Биоцидная эффективность препаратов на основе производных гуанидина хорошо описана в литературе (2). Среди полимерных производных гуанидина полигексаметиленбигуанидин гидрохлорид (ПГМБ) наиболее часто используется в качестве действующего вещества для дезинфицирующих средств. Однако средства на основе других полимерных производных гуанидина приобретают все большую популярность. Одним из таких производных является ПГМГ, который обладает более высокой биоцидной эффективностью по сравнению с ПГМБ (3).

Высокая бактерицидная и фунгицидная эффективность ПГМГ была описана ранее (3,4,5). Однако для препаратов основанных на ПГМГ синтезированном согласно традиционной технологии, спороцидные свойства не были выявлены.

В данной статье мы представляем результаты исследований биоцидных, фунгицидных и вируцидных свойств препаратов Тефлекс, в которых в качестве активного вещества используется ПГМГ произведенный по новой технологии (1).

Наши данные подтверждают наличие бактерицидных и фунгицидных свойств у нового ПГМГ и впервые описывают вируцидные и спороцидные свойства ПГМГ, что позволяет расширить сферы применения дезинфицирующих средств произведенных на основе этого действующего вещества. Для других полимерных производных гуанидина ранее также было показано наличие вируцидных и спороцидных свойств (6,7, данные не приводятся).

В России зарегистрированы и разрешены к применению аналоги на основе ПГМГ препараты Полисепт (полигексаметиленгуанидин-гидрохлорид) и Фогуцид (полигексаметиленгуанидин-фосфат) для целей дезинфекции в быту, на предприятиях пищевой промышленности и в медицинских учреждениях. На основе ПГМГ разработаны и выпускаются высокоэффективные моюще-дезинфицирующие средства: БИОР, АВАНСЕПТ, Славин (Белоруссия). В 2007 году зарегистрировано в качестве нового антисептика средство «Тефлекс А», синтезированное в ООО «Софт-Протектор» (Санкт-Петербург) на основе ПГМГ-гидрохлорида. Новое средство «Тефлекс А» предназначено для обработки рук хирургов, операционных медицинских сестер, акушерок и других лиц, участвующих в проведении операций, приеме родов; локтевых сгибов доноров, а также для обработки кожи операционного и инъекционного полей пациентов ЛПУ: для гигиенической обработки рук медицинского персонала ЛПУ, медицинских работников детских дошкольных и школьных учреждений, учреждений соцобеспечения, работников химико-фармацевтических, биотехнологических и парфюмерно-косметических предприятий, санаторно-курортных учреждений, предприятий общественного питания, объектов коммунальных служб, а также для гигиенической обработки кожи рук и инъекционного поля населением в быту. Сравнение активности «Тефлекс А» с 18 наиболее популярными в России антисептиками (АХД 2000 – специаль, Amphisept, хлоргексидина раствор 0,05%, люголя раствор с глицерином, протаргола раствор 2%, мирамистина раствор 0,01%, йодинол, эфирное масло чайного дерева, раствор борной кислоты 3%, фукарцин, йода раствор 5%, бриллиантового зеленого раствор 1%, масло Тимиана Кочи, масло эвкалиптовое, масло мятное, тминное масло, фурацилина раствор 0,02%, раствор спирта 70%) показало, что по антибактериальной и антигрибковой активности он находится в группе из 4-х таких наиболее активных препаратов, как АХД 2000 – специаль, хлоргексидина раствор 0,05%, раствор йода 5%.Пронтосан, Ловосепт

Помимо высокой активности препарата против вегетативных форм бактерий, установлено его высокое (до 10-4 – 10-5) спороцидное действие против эндоспор бактерий родов Bacillus и Clodosporium.

Мы считаем, что по полученным нами совокупным данным, «Тефлекс А» как новый спороцидный вариант ПГМГ, следует отнести к антисептику с лекарственным эффектом для обработки всех частей тела человека как наружных , так и внутренних

— антисептическая обработка в ходе хирургического лечения инфицированных ран и поверхностных повреждений мягких тканей;

—орошение операционного поля в ходе оперативного вмешательства

—орошение операционного поля при проведении операций с существующей угрозой инфицирования;

—антисептическая защита открытых ран;

—промывание полостей через дренажные трубки с использованием активного дренирования;

—обработка ожоговых поверхностей;

—антисептическая обработка при проведении челюстно-лицевых операций;

—обработка хирургических инструментов, перевязочного материала и предметов ухода за больными.

- обработка в качестве профилактики и лечения воспалений любых слизистых поверхностей, в том числе носоглотки, ротовой полости, вагинальных поверхностях и на поверхностях промежности, кроме слизистой глаз.

- обработка ран при кровотечениях, как кровоостанавливающее средство

- пропитка для для ИМН (перевязочные материалы, специальные бинты, салфетки, тампоны, ранозаживляющие повязки, в т.ч. закрывающие раны и ожоги и т.д.)

Выведение на рынок лекарственных форм нового поколения российского производства позволит

Заместить импортные дорогостоящие антисептики без потери качества и результата их использования

Список литературы и использованных источников

1. Patent RU 2345794 C2

2. Antiseptics and Disinfectants: Activity, Action and ResistanceGerald McDonnell and A. Denver Russell Clin. Microbiol. Rev. January 1999 vol. 12 no. 1 147-17

3. Synthesis and antimicrobial activity of polymeric guanidine and biguanidine salts, Yumei Zhang, Jianming Jiang, Yanmo Chen, Polymer 40 (1999), 6189 - 6198

4. Polyhexamethylene guanidine hydrochloride-based disinfectant: a novel tool to fight meticillin-resistant Staphylococcus aureus and nosocomial infections., Azinwi R, Bernier AM, Kablan T, Maupertuis AM, Mauler S, Nevry RK, Dembélé K, Forbes L, Diop L. Oulé MK, J Med Microbiol. 2008 Dec;57(Pt 12):1523-8

5. In vitro antimicrobial activity of the novel polymeric guanidine Akacid plus. Kratzer C, Tobudic S, Graninger W, Buxbaum A, Georgopoulos A. J Hosp Infect 2006 Jul;63(3):316-22. Epub 2006 May 15.

6. Polybiguanides, particularly polyethylene hexamethylene biguanide, have activity against human immunodeficiency virus type 1. Krebs FC, Miller SR, Ferguson ML, Labib M, Rando RF, Wigdahl B. Biomed Pharmacother. 2005 Sep;59(8):438-45.

7. Effect of surfactants, temperature, and sonication on the virucidal activity of polyhexamethylene biguanide against the bacteriophage MS2. Pinto F, Maillard JY, Denyer SP. Am J Infect Control. 2010 Jun;38(5):393-8. Epub 2009 Dec 16.

8. Interactions of biocidal guanidine hydrochloride polymer analogs with model membranes: a comparative biophysical study. Zhou Z, Zheng A, Zhong J. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 2011 Sep;43(9):729-37. doi: 10.1093/abbs/gmr067. Epub 2011 Jul 31.

9. Damage of Escherichia coli membrane by bactericidal agent polyhexamethylene guanidine hydrochloride: micrographic evidences. Zhou ZX, Wei DF, Guan Y, Zheng AN, Zhong JJ. J Appl Microbiol. 2010 Mar;108(3):898-907. Epub 2009 Jul 20.

Код для цитирования: Скопировать