XVI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2024

Оспа - остро протекающая, инфекционная болезнь, характеризуется образованием специфических узелков и пузырьков, называемых оспинами. Последние развиваются стадийно и часто локализуются в области вымени и сосков, реже на других участках тела [1]. 

Оспу у коров чаше вызывал вирус оспованцины, передающийся молочным коровам от доярок, вакцинированных оспенным детритом.

Возбудители - эпителиотропные вирусы. У коров оспу может вызывать как вирус истинной коровьей оспы, так и вирус осповакцины. Биологические свойства этих вирусов различны, но морфологически они сходны [3].

Химический состав вирусов очень сложен. В состав вириона входят углерод, азот, фосфор, медь, сера, углеводы, липиды и другие вещества. Вирусы оспы коров и осповакцины обнаруживаются в эпителиальных клетках и в струпе из пораженных участков кожи больных коров. Для их выявления готовят мазки, окрашивают по Пашену, Морозову или Романовскому и исследуют под микроскопом с использованием иммерсионной системы. Элементарные тельца вирусов имеют вид круглых шариков или точек.
Вирусы оспы коров и осповакцины очень сходны по антигенным и иммуногенным свойствам. Оба отнесены к семейству Поксвириде рода Ортопосвирусов. Идентифицировать их можно по комплексному антигену, находящемуся на их наружной оболочке [4]. 

Устойчивость. Вирусы оспы коров и осповакцины во внешней среде, особенно если находятся в погибших, но не гниющих тканях и других белковых субстратах, сравнительно устойчивы. Они хорошо переносят высушивание, а низкая температура их консервирует.

Патогенез. Вирусы оспы могут проникать в организм животных через кожу вымени и слизистую оболочку ротовой и носовой полостей. Развитие инфекционного процесса зависит от путей проникновения и вирулентности возбудителя. На месте инокуляции вируса в результате взаимодействия его с эпителиальными клетками возникает специфическое воспаление. Однако при авитаминозе А проникновение вируса возможно и через неповрежденную кожу. На месте инокуляции вируса в результате взаимодействия его с чувствительными клетками возникает специфическое воспаление. Клетки эпидермиса набухают [1].

Патологоанатомические изменения характеризуются появлением описанных выше оспенных поражений на коже и слизистых оболочках. В силу особенностей строения слизистых оболочек на них не бывает папул и струпьев, а видны лишь следы лопнувших мацерированных везикул и образовавшиеся на их месте эрозии и язвы. При ярко выраженной генерализации процесса (множественного высыпания оспин) обнаруживают признаки лимфаденита и лимфангоита, а при осложнениях находят в подкожной клетчатке абсцессы и флегмоны [2].

Диагностика проводится по требованиям Методических указаний оспы крупного рогатого скота, овец, коз, свиней и верблюдов от 12 ноября 1985 г., N 115-6а.

Лабораторная диагностика оспы животных включает в себя:

- обнаружение в патологическом материале оспенных частиц (вирионов) методом вирусоскопии;

- обнаружение цитоплазматических ацидофильных включений в пораженных участках кожи больного или зараженного животного гистологическим
методом;

- выделение вируса на куриных эмбрионах (КЭ) с последующей eгo идентификацией;

- биологическую пробу (в сомнительных случаях) на естественно-восприимчивых животных. 

Патологический материал отбирают не менее чем с 5 участков пораженной кожи. Для сбора консервирования материала используют стерильные инструменты, посуду и консервирующие растворы. Материал от больных животных, обработанных моющими или дезинфицирующими растворами, к исследованию не пригоден.

Для исследования лабораторию направляют:

- мазки, сделанные из содержимого везикул, и мазки-отпечатки с оспенных поражений кожи;

- патологический материал от больных животных.

Мазки высушивают на воздухе, складывая так, чтобы они не соприкасались между собой, и упаковывают в целлофан. Везикулярную жидкость собирают в капилляры пастеровских пипеток, которые затем помещают в пробирки с резиновыми пробками. Папулы и пустулы иссекают ножницами вместе с отечной тканью и помещают в два стерильных флакона: один - с 50%-ным раствором глицерина, второй - с 10%-ным раствором формалина.

Для дифференциации вируса оспы верблюдов от вируса оспы овец, коров и осповакцины переболевшему оспой и здоровому (контрольному) животным наносят глазной пипеткой на свежескарифицированную поверхность кожи 2-3 капли растворенной сухой оспенной вакцины, изготовленной из вируса осповакцины.

Развитие на месте скарификации кожи на 6-7-й день после нанесения вакцины пустул у подопытного и контрольного животных показывает на наличие в хозяйстве оспы, вызванной вирусом оспы верблюдов. Отсутствие реакции у подопытного животного (при положительной поствакцинальной реакции у здорового контрольного животного) свидетельствует о наличии в хозяйстве оспы, вызванной вирусом оспы коров или осповакцины. 

Диагноз на оспу животных считают установленным при получении положительного результата по одному из методов исследования.

Срок исследования: вирусоскопического - 1 день; гистологического - 3-4 дня; выделения возбудителя - 6-12 дней.

Метод окрашивания элементарных частиц.

Окраска по Морозову. Для окрашивания по Морозову предварительно готовят три реактива:

■ реактив № 1 (жидкость Руге): 1 мл ледяной уксусной кислоты, 2мл 40%-ого формальдегида и 100 мл дистиллированной воды;

■ реактив № 2: 5 г танина, 100 мл дистиллированной воды и 1 мл жидкой карболовой кислоты;

■ реактив № 3: 5 г кристаллического азотнокислого серебра растворяют в 100 мл дистиллированной воды; из этого раствора в отдельный сосуд отливают 20 мл.

К 80 мл оставшегося раствора по каплям добавляют 25%-ный раствор аммиака, пока образующийся желтовато-коричневый, а затем буро-черный осадок не растворяется и не останется лишь легкая опалесценция.

Если добавление аммиака вовремя не прекращено, то берут раствор азотнокислого серебра (из 20 мл) и добавляют его по каплям до появления легкой опалесценции. Для окраски препаратов готовый реактив разбавляют дистиллированной водой в соотношении 1:10.

На приготовленные препараты наносят реактив № 1 (жидкость Руге), который через 1 мин сливают; промывают дистиллированной водой и протравливают реактивом №2 при подогревании над пламенем спиртовки до появления паров (1-2 мин). Затем после промывания водой препараты покрывают одним слоем фильтровальной бумаги и обрабатывают реактивом №3 при легком подогревании, пока мазки приобретут темно-коричневую окраску, после чего их вновь тщательно промывают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и просматривают под иммерсионной системой микроскопа.

Окраска по Пашену. Для окраски по методу Пашена предварительно готовят раствор для протравы по Леффлеру, состоящий из 20%-ого водяного раствора танина - 100 мл насыщенного водного раствора сернокислого записного аммиачного железа - 50 мл и насыщенного спиртового раствора основного фуксина - 10 мл.

Перед окраской раствор фильтруют, наносят его на препараты, осторожно подогревают до появления паров и оставляют на несколько минут для остывания, затем смывают дистиллированной водой и наносят на препараты карболовый фуксин Циля; осторожно подогревают до появления паров, оставляют для остывания и снова промывают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и просматривают под иммерсионной системой микроскопа.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Кадыров У.Г., Борисович Ю.Ф. Оспа животных. – М.: Колос, 1981. - 168 с.

2. Ветеринарная вирусология: учебное пособие / П.И. Барышников.- М.: ФОРУМ, 2009.- 96 с.

3. Латыпов Д.Г., Муллакаев О.Т. Справочник по патологоанатомической диагностике заразных болезней крупного рогатого скота: Учебное пособие. - СПб.: Издательство «Лань», 2022. - 348 с.

4. Частная ветеринарно-санитарная микробиология и вирусология [Электронный ресурс]: / Р.Г. Госманов, А.К. Галиуллин, А.Х. Волков, Ф.М. Нургалиев, Г.Г. Идрисов, А.В. Андреева. - Уфа, 2022. - 316 с.

5. Белоусова Р.В., Троценко Н.И., Преображенская Э.А. Практикум по ветеринарной вирусологии. - 3-с изд., перераб. и доп. - М.: КолосС, 2006, - 248с.

Код для цитирования: Скопировать