XVI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2024

С лекарственным средством «кислота ацетилсалициловая», больше известной под торговым наименованием «аспирин», человечество знакомо уже более ста лет. Несмотря на длительное пребывание на лекарственном рынке современных нестероидных противовоспалительных средств (НПВС), многие врачи до сих пор назначают данный препарат разным возрастным группам пациентов. Причин к тому несколько: кислота ацетилсалициловая хорошо известна, недорога и эффективна, имеет ряд преимуществ перед другими НПВС.

Препараты ацетилсалициловой кислоты занимают значительное место в медикаментозной практике. Они широко применяются в качестве противовоспалительного, жаропонижающего, анальгезирующего средства для купирования осложнений при развитии инфаркта миокарда. Открытие антиагрегантных свойств ацетилсалициловой кислоты расширило область ее применения. В небольших дозах по 75-300 мг ее назначают при различных сосудистых заболеваниях для профилактики тромбозов и тромбоэмболии. Выпускают также комбинированные препараты ацетилсалициловой кислоты с витамином С, антигистаминными и сосудорасширяющими лекарственными веществами, облегчающими симптомы ОРЗ и гриппа. Ацетилсалициловая кислота входит в список важнейших лекарственных средств ВОЗ, а также в перечень жизненно необходимых и важных лекарственных средств РФ.

По оценкам специалистов, во всем мире ежегодно производится примерно 45 тысяч тонн кислоты ацетилсалициловой. При этом вопросы контроля качества данного лекарственного средства приобретают особое значение. В связи с тем, что в литературе описаны разнообразные методы идентификации и количественного определения кислоты ацетилсалициловой, представляет интерес сравнительный анализ этих методик с целью выявления наиболее точных, воспроизводимых и чувствительных.

Целью данной выпускной квалификационной работы является сравнительный анализ методик количественного определения субстанции кислоты ацетилсалициловой и выявление наиболее простых, эффективных и воспроизводимых.

Для осуществления поставленной цели решались следующие задачи:

1. Изучить особенности химической структуры и физико-химические свойства кислоты ацетилсалициловой, а также ее механизм действия и биотрансформацию.

2. Выявить наиболее распространенные и доступные методики качественного и количественного определения кислоты ацетилсалициловой.

3. Провести количественное определение фармацевтической кислоты ацетилсалициловой методом нейтрализации.

4. Провести количественное определение фармацевтической кислоты ацетилсалициловой методом спектрофотометрии в УФ-области спектра.

Объект исследования – фармацевтическая субстанция кислоты ацетилсалициловой.

Методы исследования: контент-анализ, методы качественного и количественного анализа: алкалиметрия, спектрофотометрия в УФ-области спектра.

ГЛАВА 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАЧЕСТВА КИСЛОТЫ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ

1.1. История открытия и применения кислоты ацетилсалициловой

Ацетилсалициловая кислота – первое лекарственное средство, синтезированное человеком. Испокон веков человечество использовало лечебные растения, затем научились выделять из экстрактов растений лекарственные вещества в чистом виде, но первым лекарством, полноценного аналога которого не существует в природе, стала ацетилсалициловая кислота [3]. Препарат впервые был синтезирован французским ученым Шарлем Фредериком Жераром а 1853 году, основой для этого служила кора дерева ивы. Но в форме, пригодной для медицинского применения, ацетилсалициловую кислоту создали в лабораториях компании Bayer 10 августа 1897 года, автором синтеза является немецкий химик Феликс Хоффман [1].

Рисунок 1. Аспирин и его создатель Феликс Хоффман

Клинические испытания нового препарата продолжались полтора года. Фактически аспирин стал официальной торговой маркой компании Bayer с 6 марта 1899 года. Согласно законам германской империи, того времени, химические соединения не подлежали патентованию, но сложно было зарегистрировать уникальный торговый знак. Поэтому для наименования нового препарата придумали слово «аспирин». «А» взяли от «ацетила», «spir» - от латинского названия травы лабазник – sperea, богатой салицином, «in» - как типичное окончание для слова, обозначающего лекарственный препарат. Сначала аспирин продавался в виде порошка, а с 1904 года – уже в форме таблеток (рисунок 2), а с 1915 года – без рецепта. Аспирин, будучи недорогим, эффективным и относительно безвредным, быстро стал самым популярным обезболивающим. Изначально был известен лишь жаропонижающий эффект аспирина, позже выяснилось его болеутоляющее и противовоспалительные свойства.

Рисунок 2. Формы выпуска аспирина

После Второй мировой войны калифорнийский врач Лоуренс Крейвен опытным путём обнаружил, что аспирин серьёзно снижает риск кардиологических заболеваний. Сегодня большая часть аспирина именно с этой целью и используется – для профилактики сердечно-сосудистых заболеваний. В 1952 году появился детский аспирин щадящей концентрации, а в 1969 таблеткиаспирина включили в аптеки ассортиментов «Аполлона». В 1971 году фармаколог Джон Вейн продемонстрировал, что ацетилсалициловая кислота подавляет синтез простагландинов и тромбоксанов. За это открытие в 1982 году, а также Суне Бергстрёму и Бенгту Самуэльсону была присуждена Нобелевская премия по медицине [1].

В современном мире кислота ацетилсалициловая продается более чем под

400 торговых наименований, существует как минимум в 15 лекарственных формах и, по приблизительным оценкам, входит в состав около полутора тысяч комбинированных препаратов. Кислота ацетилсалициловая является так же самым изучаемым препаратом из применяемых в настоящее время. Исследовательская деятельность вокруг свойств аспирина не утихает до сих пор. Так, по данным исследований профессора Питера Ротуэлла из Оксфордского университета, регулярный прием ацетилсалициловой кислоты сокращает 20-летний риск развития рака простаты на 10%, рака легких – на 30%, рака кишечника – на 40%, рака пищевода и горла – на 60% [2].

По данным исследователей из Университета Алабамы (США) и Университета Оттавы (Канада), аспирин снижает ещё и риск развития рака печени. Те испытуемые, которые принимали аспирин в течении 10 лет, реже страдали от гепатоцеллюлярной карциномы и на 45% реже умирали от хронических заболеваний печени.

Учёные из Университета Западной Австралии в Перте утверждают, аспирин помогает пожилым людям бороться с депрессией. А голландские специалисты из университета нейронаук Академического медицинского центра установили, что ежедневный приём аспирина для профилактики болезней сердца чреват для пожилых людей потерей зрения. Риск возрастает в 2 раза по сравнению с теми, кто не принимает аспирин. Но польза от аспирина в профилактике заболеваний сердца признана более значимой, чем наносимый им вред для глаз.

В настоящее время кислота ацетилсалициловая входит в группу нестероидных противовоспалительных средств (НПВС), по химической классификации она относится к группе салицилатов, а в соответствии с фармакологической классификацией – по селективности воздействия на изоферменты циклооксигеназы (цог), - к группе селективных ингибиторов ЦОГ-1.

По своей химической природе она является сложным эфиром салициловой и уксусной кислот.

Рациональное название по ИЮПАК 2-(ацетилокси)бензойная кислота. Эмпирическая формула C9H8O4. Молекулярная масса: 180,2 [20].

Субстанция кислоты ацетилсалициловой представляет собой белые мелкие игольчатые кристаллы или белый кристаллический порошок, не имеющий запаха, мало растворимый в воде при комнатной температуре, лучше растворимый в спирте, эфире, хлороформе одна часть ацетилсалициловой кислоты растворяется в: 300 частях воды, 20 частях эфира, 17 частях хлороформа, 7 частях 96% этанола, растворах едких и углекислых щелочей. Температура плавления 133-1380С [20].

Рисунок 3. Фармацевтическая субстанция кислоты ацетилсалициловой

Синтез кислоты ацетилсалициловой достаточно прост и не представляет особых сложностей. В лабораторных условиях и в промышленности ацетилсалициловую кислоту получают взаимодействием салициловой кислоты и уксусного ангидрида в присутствии серной кислоты:

1.2. Механизм действия, фармакокинетика, фармакодинамика и биотрансформация кислоты ацетилсалициловой

Ингибируя фермент циклооксигеназу (ЦОГ-1 и ЦОГ-2) и необратимо тормозя циклооксигеназный путь метаболизма арахидоновой кислоты, ацетилсалициловая кислота блокирует синтез простагландинов и тромбоксана. Уменьшает гиперемию, эксудацию, проницаемость капилляров, активностьгиалуронидазы, ограничивает энергетическое обеспечение воспалительного процесса путем угнетения продукции АПФ. Препарат влияет на подкорковые центры терморегуляции и болевой чувствительности. Снижает содержания простагландинов в центре терморегуляции приводит к понижению температуры тела вследствие расширения сосудов кожи и увеличения потоотделения [6].

Обезболивающий эффект кислоты ацетилсалициловой обусловлен влиянием на центр болевой чувствительности, а также периферическим противовоспалительным действием и способностью салицилатов снижать альгогенное действие брадикардина.

Уменьшение содержания тромбоксана А2 в тромбоцитах приводит к необратимому подавлении агрегации, несколько расширяет сосуды. Антиагрегантное действие сохраняется в течение 7 суток после однократного приема. В ходе ряда клинических исследований показано, что существенное ингибирование склеиваемости кровяных пластинок достигается при дозах до 30 мл. препарат увиличивает фибринолитическую активность плазмы и снижает концентрацию витамин К-зависимых факторов свертывания. Стимулирует выведение мочевой кислоты, поскольку нарушается её реабсорция в канальцах почек.

После приема внутрь препарат достаточно полно всасывается. При наличии кишечнорастворимой оболочки (устойчива к действию в желудке) абсорбируется в верхнем отделе тонкого кишечника. Во время абсорбции подвергается пресистемной элиминации в стенке кишечника и в печени (деацитилируется). Абсорбированная часть очень быстро гидролизуется специальными эстеразами, поэтому период полувыведения ацетилсалициловой кислоты составляет не более 15-20 минут. В организме циркулирует на 75-90% в связи с альбумином и распределяется в тканях в виде аниона салициловой кислоты. Максимальная концентрация достигается примерно через 2 часа. С белками плазмы крови ацетилсалициловая кислота практически не связывается [7].

При биотрансформации в печени образуются метаболиты, обнаруживаемые во многих тканях и моче. Экскреция салицилатов осуществляется преимущественно путем активной секреции в канальцах почек в неизмененной форме и в виде метаболитов. Выведение неизмененного вещества и метаболитов зависят от рН мочи (при подщелачивании мочи возникает ионизирование салицилатов, ухудшается их реабсорбция и значительно увеличивается экскреция).

Как противовоспалительное, анальгезирующее и жаропонижающее средство, а также угнетающее агрегацию тромбоцитов, кислота ацетилсалициловая показана при ревматизме, ревматоидном артрите, инфекционно-аллергическом миокарде; лихорадке при инфекционно- воспалительных заболеваниях; болевом синдроме слабой и средней интенсивности различного генеза (в том числе невралгия, миалгия, головная боль); профилактике тромбозов и эмболий; первичной и вторичной профилактике инфаркта миокарда; профилактике нарушений мозгового кровообращения по ишемическому типу [19]. В клинической иммунологии и аллергологии препарат используется в постепенно нарастающих дозах для продолжительной «аспириновой» десенситизации и формирования тойкой толерантности к НПВС у больных с «аспириновой» астмой и «аспириновой» триадой.

Побочное действие со стороны сердечно-сосудистой системы и крови (кроветворение, гемостаз): тромбоцитопения, анемия, лейкопения. Со стороны органов ЖКТ: НПВС-гастропатия (диспепсия, боль в эпигастральной области, изжога, тошнота и рвота, тяжелые кровотечения в ЖКТ), снижение аппетита. Возможны аллергические реакции: реакции гиперчувствительности (бронхоспазм, отек гортани и крапивница), формирование на основегаптенового механизма «аспираторной» бронхиальной астмы и «аспираторной» триады (эозинофильный ринит, рецидивирующий полипоз носа, гиперпластический синусит). При длительном применении – головокружение, головная боль, шум в ушах, снижение остроты слуха, нарушение зрения, интерстициальный нефрит, преренальная азотемия с повышением уровня креатина и гиперкальциемией, папиллярный некроз, острая почечная недостаточность, нефротический синдром, заболевания крови, асептический менингит, усиление синдромов застойной сердечной недостаточности, отеки, повышение уровня аминотрансфераз в крови.

1.3. Методы анализа кислоты ацетилсалициловой

Качественный анализ кислоты ацетилсалициловой

Для доказательства подлинности кислоты ацетилсалициловой используют как современные физико-химические методы, так и химические реакции. При этом нормативная документация на субстанцию кислоты ацетилсалициловой регламентирует изучение ИК-спектра и спектров поглощения в УФ-области. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области частот от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра стандартного образца кислоты ацетилсалициловой (рисунок 4) [20;8].

Рисунок 4. ИК-спектр стандартного образца кислоты ацетилсалициловой

Кроме этого, Государственная фармакопея (ГФ) рекомендует проводить изучение УФ-спектров препарата: ультрафиолетовый спектр поглощения 0,007% раствора субстанции в хлороформе в области от 260 до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 278 нм, а ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001% раствора субстанции в 0,1 М растворе серной кислоты в области от 220 до 350 нм должен иметь максимумы поглощения при 228 нм и 276 нм и минимум поглощения при 257 нм [20].

Для исследования ацетилсалициловой кислоты рекомендуется использовать спектры в ближайшей инфракрасной области (БИК-спектры) полученный с помощью оптоволоконного датчика методом диффузного отражения. Разрешение – 8 см-1, количество сканов – 16, область измерения – от 4 000 до 12 500 см-1, фазовое разрешение – 32, интерполяция – 2, базовая линия

– по эталону тефлона. Идентификация ацетилсалициловой кислоты проводят в ультрафиолетовой области спектра при максимуме поглощения при l= 308 нм. Способ предназначен для определения ацетилсалициловой кислоты, образующей окрашенные комплексы с Fe3+ в водных растворах. Недостаткамиметода являются высокие пределы обнаружения кислоты (0,02 мг/дм3), большая погрешность определения (15%).

Из химических реакций для доказательства субстанции ацетилсалициловой кислоты фармакопейная статья (ФС) регламентирует следующие:

1. Реакции с хлоридом железа (III) после щелочного гидролиза: 0,5 г субстанции кипятят в течение 3 минут с 5 мл раствора натрия гидроксида, охлаждают, нейтрализуют серной кислотой, разведенной 16%; образуется белый кристаллический осадок. К осадку прибавляют 0,1 мл раствора железа

(III) хлорида; должно появится фиолетовое окрашивание. Схема реакции представлена на рисунке 5:

Рисунок 5. Схема реакции щелочного гидролиза

2. Реакция с реактивом Марки: к 0,2 г субстанции прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной, перемешивают, прибавляют 0,1 мл воды; должен появится запах уксусной кислоты. Прибавляют 0,1 мл формалина; должно появиться розовое окрашивание (образование ауринового красителя).

  Рисунок 6. Схема получения ауринового красителя

Помимо фармакопейных, существуют другие качественные реакции, подтверждающие подлинность ацетилсалициловой кислоты. К ним относятся:

3. Реакция обнаружения продуктов гидролиза в кислой или щелочной среде: кислоту ацетилсалициловую подвергают гидролизу в щелочной среде, в результате чего образуются натриевые соли салициловой и уксусной кислоты. Затем реакционную смесь подкисляют разведенной серной кислотой и наблюдают образование белого кристаллического осадка кислоты салициловой (рисунок 7):

Рисунок 7, Реакция обнаружения продукта гидролиза кислоты ацетилсалициловой

Полученный осадок отфильтровывают, промывают и сушат, можно далее определить температур плавления кислоты ацетилсалициловой (158-1610С). К фильтрату, содержащему уксусную кислоту, прибавляют этанол и концентрированную серную кислоту – образуется уксусный эфир, имеющий характерный запах (рисунок 8):

Рисунок 8. Схема реакции образования эфира уксусной кислоты

Кислоту ацетилсалициловую можно подвергнуть и кислотному гидролизу. При добавлении концентрированной серной кислоты и воды ощущается запах уксусной кислоты (рисунок 9).

Рисунок 9. Схема реакции кислотного гидролиза ацетилсалициловой кислоты

4. Для кислоты ацетилсалициловой характерна реакция образования индиго при нагревании с кристаллическим кальция гидроксидом и последующим взаимодействием с орто-нитробензальдегидом (рисунок 10).

Рисунок 10. Схема реакции образования индиго

Кроме этого в литературе описана реакция обнаружения кислоты ацетилсалициловой при взаимодействии с 2%-ными растворами 4- аминоатриптилина и гексацианоферрата (III) калия, при добавлении к реакционной смеси хлороформа, слой хлороформа приобретает желтое окрашивание.

Методы количественного определения кислоты ацетилсалициловой

1. Для количественного определения кислоты ацетилсалициловой ФС рекомендован способ, основанный на её нейтрализации без предварительного гидролиза (рисунок 12) по следующей методике: кислоту ацетилсалициловую растворяют в нейтрализованном и охлажденном до 8-100С этаноле и титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия до появления розового окрашивания по индикатору фенолфталеину, устойчивому в течение 30 секунд [4].

2. Кислоту ацетилсалициловую количественно можно определить методом обратной цериметрии, основанным на окислении вещества церия (IV) сульфатом до образования глуатаровой, муравьиной и другихалифатических кислот. Конец определяют йодометрически (рисунок 11) [10]. Рисунок 11. Схема цериметрического определения кислоты ацетилсалициловой

3. В основу количественного определения кислоты ацетилсалициловой может быть положена реакция щелочного гидролиза. Для этого берут избыток 0,5 М раствора гидроксида натрия (не содержащего карбонатов) и гидролизуют кислоту ацетилсалициловую при нагревании кипящей водяной бане с обратным холодильником. Избыток титрованного раствора гидроксида натрия оттитровывают 0,5 М раствором хлороводородной кислоты по индикатору метиловому оранжевому:

NaOH + HCl → NaCl + H2O

Для количественного определения кислоты ацетилсалициловой также применяют физико-химические методы анализа. Разработаны методики количественного определения препарата в субстанции и в составе нерастворимых форм методом высокоэффективной жидкости хроматографии. Метод ионоэксклюзионной хроматографии (ИЭХ) оказался одним из наиболее эффективных. Для определения кислоты ацетилсалициловой использовались жидкости хроматографы Цвет-3006 с кондуктометрическим детектором БИЭ-03 и Kontron-430A со спектрофотометрическим детектором. В качестве сорбентов выбраны катионообменники марок Aminex Q-15S и Aminex-?5, размер колонок составил 8х300 и 6х250 мм. Метод отличается експрессностью, простотой пробоподготовки, высокой воспроизводимостью, точностью анализа [10].

Предложен метод количественного определения кислоты ацетилсалициловой в таблетках методом флоуриметрии. Анализируемую пробу растворяют в этаноле и обрабатывают 5% раствором борной кислоты в концентрированной серной кислоте в присутствии пропанола. Объемноесоотношение анализируемый раствор: пропанол составляет 1:3-3,5. Затем добавляют концентрированную серную кислоту, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флоуресценции по отношению к стандартному раствору с содержанием ацетилсалициловой кислоты 10мкг/мл. Спектр возбуждения флоуресценции лежит от 310 до 390 нм с максимумом возбуждения 345 нм, а спектр излучения флоуресценции лежит от 380 до 520 нм с максимумом 440 нм. Прямолинейная зависимость между интенсивностью флоуресценции и концентрацией ацетилсалициловой кислоты лежит от 0,1 до

45 мкг/мл. Измеряют интенсивность флоуресценции в УФ-свете со светофильтром УФС-3, наблюдают голубую флоуресценцию. Таким методом проводится количественное определение кислоты ацетилсалициловой в лекарственном препарате «Аскофен» и «Цитрамон».

Таким образом, в результате изучения литературных источников по данной теме были изучены история открытия, методы синтеза кислоты. Дана полная характеристика фармацевтической субстанции кислоты ацетилсалициловой, необходимая для сравнительного анализа. Изучены методы установления подлинности и количественного определения. Для полной характеристики был исследован их механизм действия и биотрансформация, а также применение кислоты ацетилсалициловой.

ГЛАВА II. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ХИМИЧЕСКИХ И ФИЗИКО- ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУБСТАНЦИИ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ

2.1. Объект, материалы и методы исследования

В качестве объекта исследования нами была использована фармацевтическая субстанция кислоты ацетилсалициловой, производитель Хебэй Цзихэн Фармасьютикал Ко «Ling», Китай.

Структурная формула:

Описание: белый кристаллический порошок, без запаха, легко растворим в спирте этиловом 96%, растворим в хлороформе, малорастворим в воде  

Рисунок 12. Внешний вид субстанции кислоты ацетилсалициловой

В работе использованы следующие реактивы, титрованные растворы, индикаторы:

- Вода очищенная;

- Раствор натрия гидроксида;

- Раствор кислоты серной;

- Спирт этиловый;

- Раствор железа (III) хлорида;

- Концентрированная серная кислота;

- Раствор формальдегида;

- 0,1 Н раствор натрия гидроксида;

- Раствор фенолфталеина;

- Ацетатно-буферный раствор, который готовили по следующей методике: 2,97 г натрия ацетата поместили в мерную колбу вместимостью 1000 мл, прибавили 500 мл воды очищенной, прибавили 1,66 мл ледяной уксусной кислоты и объем раствора доводим до метки водой.

Химическая посуда, приборы, оборудование:

- Мерные колбы вместительностью 100 и 50 мл;

- Химические стаканы;

- Колбы для титрования емкостью 100 и 250 мл;

- Мерные градуированные пипетки объемом 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 мл;

- Стеклянные воронки;

Для титриметрического анализа использовали бюретку. Навеску взвешивали на часовых стеклах.

Измерение оптической плотности проводили в кварцевых кюветах на спектрофотометре СФ-2000 (рисунок 13).

Рисунок 13. Спектрофотометр СФ-2000.

Точные навески кислоты ацетилсалициловой для количественного определения брали с помощью электрических аналитических весов типа Pioneer (рисунок 14).

Рисунок 14. Аналитические весы типа Pioneer

Для определения показателей качества использовали следующие методы:

- физический (отмеривание, отвешивание);

- химический (выполнение качественных реакций, количественное определение);

- физико-химический (спектрофотометрия);

2.2. Определение подлинности

Определение подлинности проводили в соответствии с требованиями фармакопейной статьи (ФС) 2.1.0006.15 «Ацетилсалициловая кислота».

Идентификацию кислоты ацетилсалициловой проводи следующими реакциями:

1. Реакция гидролитического расщепления в щелочной среде.

Для этого 0,5 г субстанции кислоты ацетилсалициловой кипятили с разведенной серной кислотой, выделяется белый кристаллический осадок.

Рисунок 15. Образование салициловой кислоты

Затем полученный раствор фильтровали через бумажный фильтр. Фильтрат сливали в другую пробирку и добавляют к нему 2 мл спирта и 2 мл концентрированной серной кислоты; ощущался запах уксусно-этилового эфира.

К осадку добавляют 1-2 кап раствора хлорида окисного железа; появляется фиолетовое окрашивание.

Рисунок 16. Эффект реакции с раствором железа III хлорида

2. Реакция образования ауринового красителя

Для этого 0,2 г субстанции кислоты ацетилсалициловой помещали в фарфоровую чашку, добавляли 0,5 мл концентрированной серной кислоты, перемешивали и добавляют 1-2 кап воды - ощущался запах уксусной кислоты, а после добавления 1-2 кап раствора формалина появлялось розовое окрашивание.

Заключение: исследуемый образец фармацевтической субстанции кислоты ацетилсалициловой, произведенный компанией Хебэй Цзихэн Фармасьютикал Ко «Ling», Китай дал положительные реакции в описанных химических тестах, что соответствует нормативной документации (ФС 2.1.0006.15 «Ацетилсалициловая кислота»).

2.3. Алкалиметрическое определение субстанции ацетилсалициловой кислоты

На следующем этапе исследования проводим количественное определение кислоты ацетилсалициловой методом нейтрализации (алкалиметрия) по следующей методике:

около 0,5 г субстанции (точная навеска) кислоты ацетилсалициловой растворили в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину и охлажденного до температуры 8-100С спирта 96% и титровали 0,1 раствором натрия гидроксида до появления розового окрашивания, сохраняющегося в течение 30 секунд (индикатор – 0,1 мл 1% раствора фенолфталеина) (рисунок 18). Параллельно проводили контрольный опыт.

1 мл 0,1 н раствора натрия гидроксида соответствует 0,01502 мг кислоты ацетилсалициловой.

Содержание кислоты ацетилсалициловой, согласно ФС 2.1.0006.15 должно быть в пределах от 99,5% до 100,5%.

Рисунок 18. Фиксирование точки эквивалентности

Для количественного определения субстанции кислоты ацетилсалициловой проводили шесть независимых определений, результаты которых представлены в таблице 1

Таблица 1

Результаты количественного определения субстанции кислоты ацетилсалициловой методом алкалиметрии

№ п/п	Взято кислоты ацетилсалициловой, г	Найдено кислоты ацетилсалициловой
		г	%
1	0,5156	0,5136	99,61
2	0,5119	0,5119	100,00
3	0,4955	0,4956	100,02
4	0,4976	0,4991	100,30
5	0,5476	0,5496	100,37
6	0,5177	0,5203	100,50
Допустимый интервал по ФС – 99,5% - 100,5%

Заключение: как видно из данных таблиц содержание кислоты ацетилсалициловой в фармацевтической субстанции, произведенной компанией Хебэй Цзихэн Фармасьютикал Ко «Ling», Китай, соответствует требованиям фармакопейной статьи ФС.2.1.0006.15 «Ацетилсалициловая кислота».

2.4. Спектрофотометрическое определение субстанции ацетилсалициловой кислоты

На следующем этапе нашего исследования, для количественного определения фармацевтической субстанции ацетилсалициловой кислоты, применим физико-химический метод – спектрофотометрию. Данный метод является точным, доступным и не требует больших временных затрат.

Определение проводили по следующей методике: точную навеску 0,1 г фармацевтической субстанции кислоты ацетилсалициловой количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл ацетатно- буферного раствора и тщательно перемешивали до полного растворения субстанции, после чего доводили растворителем (ацетатно-буферным раствором до метки). Полученный раствор перемешивали и 1 мл помещали в мерную колбу на 100 мл, долее доводили до метки тем же растворителем и определяли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре СФ-2000 в кювете толщиной слоя 1 см при длине волны 266,7 нм на фоне растворителя (рисунок 19).

Рисунок 19. Спектр поглощения кислоты ацетилсалициловой в ацетатно- буферном растворе

Параллельно готовили раствор стандартного образца (РСО).субстанции кислоты ацетилсалициловой: 0,1 г (точную навеску) препарата, соответствующего требованиям ФС.2.1.006.15 растворяли в ацетатно-буферном растворе, доводили в мерной колбе на 100 мл растворителем до метки, 1 мл полученного раствора переносили в мерную колбу на 100 мл и доводили ацетатно-буферным раствором до метки. Полученный раствор тщательно перемешивали и определяли оптическую плотность на фоне растворителя в условиях, описанных выше.

Результаты шести независимых определений, результаты которых представлены в таблице 3.

Таблица 3

Результаты количественного определения субстанции кислоты ацетилсалициловой методом спектрофотометрии

№ п/п	Взято кислоты ацетилсалициловой, г	Найдено кислоты ацетилсалициловой
		г	%
1	0,1003	0,0999	99,67
2	0,1009	0,1013	100,39
3	0,1005	0,1008	100,34
4	0,1019	0,1010	99,12
5	0,1010	0,1001	99,11
6	0,1001	0,1008	100,5
Допустимый интервал по ФС – 99,5% - 100,5%

Заключение: как видно из данных таблиц содержание кислоты ацетилсалициловой в фармацевтической субстанции, произведенной компанией Хебэй Цзихэн Фармасьютикал Ко «Ling», Китай, находится в допустимых пределах, что соответствует требованиям фармакопейной статьи ФС.2.1.0006.15 «Ацетилсалициловая кислота».

В ходе выполнения исследовательской части выпускной квалификационной работы был проведен полный химический контрольфармацевтической субстанции кислоты ацетилсалициловой, произведенный компанией Хебэй Цзихэн Фармасьютикал Ко «Ling», Китай. Исследуемый образец дал положительные реакции в описанных химических тестах. Проведено сравнительное количественное определение субстанции методами нейтрализации (алкалиметрии) и спекторофотометрии. Обработка полученных данных показала, что все сравниваемые методики отличаются высокой воспроизводимостью, точностью, правильностью результатов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате выполнения выпускной квалификационной работы проведено изучение литературных данных об истории открытия, структуре, синтезе, физико-химические свойствах кислоты ацетилсалициловой. Изучен механизм действия, фармакокинетика, фармакодинамика и биотрансформация кислоты ацетилсалициловой.

На основании анализа литературных данных установлено, что основными и наиболее часто применяемыми титриметрическим методом количественного определения кислоты ацетилсалициловой является алкалиметрия, из физико- химических методов – спектрофотометрия в УФ-области.

В ходе выполнения исследовательской части выпускной квалификационной работы был проведен полный химический контроль фармацевтической субстанции кислоты ацетилсалициловой, произведенный компанией Хебэй Цзихэн Фармасьютикал Ко «Ling», Китай.

Исследуемый образец дал положительные реакции в описанных химических тестах.

Проведено сравнительное количественное определение субстанции методами нейтрализации (алкалиметрии) и спекторофотометрии. Обработка полученных данных показала, что все сравниваемые методики отличаются высокой воспроизводимостью, точностью, правильностью результатов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бокарев И. Н. К 125-летию ацетилсалициловой кислоты/ Бокарев И. Н., Попова Л. В.// Рациональная фармакотерапия в кардиологии. - 2011. – с. 492-500.

2. Дроздов В. Н. Эффективность и безопасность применения ацетилсалициловой кислоты/ Дроздов В. Н., Ким В. А.// Рациональная фармакотерапия в кардиологии. - 2010. – № 6. – с. 212 - 215.

3. Жиров И. В. Ацетилсалициловая кислота: что нового в старом препарате?/ Жиров И. В.// Рациональная фармакология в кардиологии. - 2012. – №8 – с. 578 - 580.

4. Плетенева Т.В. Фармацевтическая химия: учебник для ВУЗов/ Плетенева Т.В., Абрамов А.Ю. – Москва: ГЭОТАР-медиа, 2017. – с. 421.

5. Кропачева Е.С. Практические основы терапии ацетилсалициловой кислотой/ Кропачева Е.С.// Атмосфера новой кардиологии. - 2011. – № 2.

– с. 28-32.

6. Арзамасцев А.П. Современное состояние проблемы применения ИК- спектроскопии в фармацевтическом анализе лекарственных средств/ Арзамасцев А.П., Садчипова Н.П., Титова А.В.// Химико- фармацевтический журнал. - 2008. – Т.42. – № 8. – с. 26-30.

7. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: учебное пособие/ Беликов В.Г. - 4-е издание, переработка и дополнение. – М.: МЕД пресс-информ. - 2009.

- c. 292.

8. Фармацевтическая химия: учебное пособие для студентов мед. Вузов, обучающихся по специальности 040500 – Фармация/ под ред. Арзамасцева А.П. – ГЭОТАР-медиа, 2006 - с. 635.

9. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21343593/

10. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17488967/

11. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19482214/

12. https://elar.urfu.ru/bitstream/10995/36055/1/978-5-7996-1478-2_2015.pdf

13. https://register.dpma.de/DPMAregister/marke/register/36433/DE

14. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15383474/

15. https://www.studentlibrary.ru/book/ISBN9785970418871.html (дата обращения:)

16. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28622955/

17. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24074752/

18. https://www.vidal.ru/drugs/molecule/12

19. https://www.aspirin.ru

20. https://pharmacopoeia.ru/fs-2-1-0006-15-atsetilsalitsilovaya-kislota/