Хранение спермы животных. При хранении неразбавленной и разбавленной спермы вне организма изменяется плазма и нарушается акросомный аппарат спермиев. Поэтому чем дольше удастся сохранить жизнеспособность спермиев вне организма животного, тем шире можно применять метод искусственного осеменения, так как запасы спермы позволяют без задержки осеменять маток в любое время года, а главное – дают возможность перевозить сперму на различные расстояния и осеменять маток в хозяйствах, расположенных в десятках и даже тысячах километров от станции искусственного осеменения .Существующие способы хранения спермиев вне организма основаны, на их физиологической способности переходить в состояние анабиоза, в котором они находятся, продвигаясь по каналу придатка тестикула. В естественных условиях анабиоз спермиев вызывается повышенным содержанием угольной кислоты (кислотный анабиоз) [2].
Для хранения спермы хряков широко используют хелатные среды. Хелатон (трилон Б) – сокращенное название двунатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты. Это соединение при комнатной температуре инактивирует ферменты, подавляя, таким образом, обмен веществ у спермиев. Действие хелатона снимается, если сперма оказывается подогретой до температуры тела животного и спермин начинают двигаться. Это происходит после введения спермы, разбавленной хелатной средой, в половые органы самки. Известны также среды с угольной кислотой для хранения спермы быков, баранов и хряков при комнатной температуре, но они не получили широкого распространения. Кратковременное хранение спермы при температуре тающего льда (2-5°С). Такая температура пригодна для хранения спермы быка, барана и жеребца. Температура, близкая к 0°С, значительно удлиняет переживаемость спермиев и замедляет обменные процессы; дыхание и фруктолиз спермиев быка и барана тормозятся в 20-25 раз, по сравнению с интенсивностью этих процессов при температуре тела животных. Для охлаждения спермы используют холодильник или термосы различной конструкции, в которых температура сохраняется до 2-5°С. Применение желточных разбавителей значительно повышает устойчивость спермиев к температурному шоку, но полностью не устраняет его. Поэтому сперму необходимо охлаждать медленно и постепенно. После разбавления сперму быка выдерживают при комнатной температуре (18-20°С) 20-30 мин. Затем ампулы, флаконы или пробирки со спермой обертывают небольшим слоем ваты, помещают в полиэтиленовые мешочки и кладут в холодильник или термос со льдом. Мешочки со спермой укладывают так, чтобы они сверху были закрыты кусочками льда, что обеспечивает необходимую температуру (2-5°С).
При такой методике хранения сперму быка используют для осеменения коров максимум 3 суток с активностью не ниже 7 баллов, хотя се жизнеспособность сохраняется более длительное время. Через 24 ч хранения разбавленной спермы быка при температуре 2°С перфораторий спермия несколько увеличивается, становится более контрастным, а через 72 ч он набухает и начинает распадаться. Следовательно, качество спермы и ее оплодотворяющая способность с каждым днем хранения снижаются.
Разбавленную сперму барана используют для осеменения овец в течение 24 ч с активностью не ниже 8 баллов.
Сперму жеребца используют для осеменения кобыл после хранения ее не более 2 суток с активностью не ниже 5 баллов. При хранении спермы любым способом всегда следует учитывать неодинаковую способность спермиев реагировать на охлаждение. Такое свойство спермиев отмечается не только у разных производителей, но и у разных эякулятов одного и того же производителя. У некоторых быков и хряков сперма при 0°С сохраняется плохо, а при температуре 4-5°С получаются удовлетворительные результаты. В термосах, заполненных водой, при сильных морозах сперма сможет храниться в течение 2-3 суток. (до замерзания 2/3 воды) [1].
Долговременное хранение спермы. В процессе хранения спермы при 2-5°С в ней протекают обменные процессы, отрицательно влияющие на оплодотворяющую способность спермиев. Длительное хранение половых клеток возможно только в условиях полного анабиоза, когда все биохимические процессы сильно замедляются.
Хранение спермы в жидком азоте позволяет значительно улучшить породные качества разводимого скота, так как в тысячи раз увеличивается количество самок, осеменяемых спермой ценных производителей. Осеменение коров такой спермой возможно на протяжении ряда лет. Метод долговременного хранения спермы значительно увеличивает возможность организации международного обмена спермой выдающихся быков. Для хранения спермы таких быков внутри страны и ее экспорта во многих странах организованы специальные банки спермы. Для хранения спермы в жидком азоте используется специальное холодильное оборудование. Известно, что замороженная сперма сохраняет свои качества, когда ее хранят погруженной в жидкий азот. Поскольку азот постоянно испаряется из сосудов Дьюара, его необходимо периодически доливать.
В современных сосудах Дьюара канистры имеют боковое отверстие, через которое в них затекает жидкий азот при погружении и вытекает часть его при подъеме канистры к горловине сосуда. При замораживании спермы можно использовать несколько вариантов расфасовки, при каждом из которых применяют соответствующую среду. Наиболее выраженными криозащитными свойствами обладают желток куриных яиц, лактоза и глицерин. Но в растворах этих веществ морфологические изменения спермиев начинаются уже при разбавлении спермы, а после эквилибрации ее патологические спермии составляют в среднем 30%. Для замораживания спермы в открытых гранулах берут фторопластовую пластину, на которой с двух сторон имеется по 300-324 лунки для накалывания спермы, обеззараживают ее с помощью бактерицидных ламп, опускают в широкогорлый сосуд с жидким азотом и охлаждают до тех пор, пока не прекратится кипение азота. Охлажденную пластину приподнимают над поверхностью жидкого азота и при помощи шприца наносят разбавленную сперму объемом по 0,1 мл в каждую лунку. Спустя 2-3 мин после нанесения спермы в последнюю лунку пластину погружают в жидкий азот на 1-2 мин. После этого, вынув пластину, замороженные гранулы собирают в пластмассовые коробочки с небольшими отверстиями (или в марлевые мешочки) и хранят в жидком азоте. При таком способе замораживания температура внутри гранул спермы понижается более равномерно, что обусловливает лучшее сохранение и высокую активность спермиев в оттаянной сперме. Главный недостаток замораживания спермы в гранулах – их незащищенность [3].
Библиографический список:
1 Акушерство и гинекология : учебное пособие / Х. Б. Баймишев,М. Х. Баймишев. – Кинель : ИБЦ Самарского ГАУ, 2021. – 400 с
2. Мастит: этиология, профилактика, диагностика, лечение. Учебное пособие / Составитель С.В. Щепеткина. - СПб.: Издательство ФГБОУ ВОСПбГАВМ, 2020. – 308 с.: с илл
3. Полянцев, Н.И. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных /Н.И. Полянцев, А.И Афанасьев.- Изд-во «Лань», 2012.- 400 с.