Пастеризация является процессом нагревания молока до уровня, который близок к точке закипания. Однако, процесса закипания при этом не допускается, так как это приведет к изменению свойств этого продукта. Основной целью пастеризации является уничтожение различных микроорганизмов, которые могут там находиться и оказать вредное воздействие. При этом, степень этого воздействия, как правило, определяется температурой, до которой молоко нагревают.
Эффективность пастеризации молока и молочных продуктов контролируют химическим методом по ГОСТ 3623 «Молоко и молочные продукты. Методы определения пастеризации», микробиологическим методом в соответствии с Инструкцией по техническому контролю на предприятиях молочной промышленности [6, 7]. Определять эффективность пастеризации химическим методом (ферментные пробы) необходимо из каждой наполненной пастеризованным молоком емкости. На переработку или розлив молоко можно направлять только после получения отрицательной реакции на фосфатазу.
Для контроля качества молока и молочной продукции в цистернах по физико-химическим и микробиологическим показателям отбирают объединенную пробу от каждой партии продукции. Объем объединенной пробы составляет не менее 1,0 дм³.
Посуда, которой производится отбор проб, должна быть изготовлена из металла, фарфора или полимерных материалов. При отборе посуда должна быть сухой, чистой, без запаха и иметь соответствующую вместимость и форму.
В случае, если исследование не может быть проведено сразу после взятия проб, их хранят у холодильнике при температуре 4±2ºС не более суток.
При выполнении измерений в лаборатории должны соблюдаться следующие условия:
- Температура окружающего воздуха 20±5ºС;
- Относительная влажность воздуха 65±15%;
- Атмосферное давление 96±10кПа.
Для контроля качества пастеризации молока проводят следующие реакции:
1. Определение пероксидазы:
а) определение пероксидазы методом реакции с солянокислым парафенилендиамидом;
б) определение пероксидазы методом реакции с йодистокалиевым крахмалом.
2. Определение фосфатазы
а) определение фосфатазы в реакции с 4-аминоантипирином;
б) определение фосфатазы по реакции с фенолфталеинфосфатом натрия.
3. Опеределение кислой фосфатазы.
Методика определения пероксидазы основана на разложении этим ферментом перекиси водорода, которая содержится в молоке. Освобождающийся при разложении перекиси водорода активный кислород реагирует с парафенилендиамином, либо с йодистокалиевым крахмалом (в зависимости от проводимой реакции), образуя соединение синего цвета.
При отсутствии пероксидазы в молоке при постановке реакций цвет содержимого пробирок не изменяется. Следовательно, молоко подвергалось пастеризации при температуре не ниже 80ºС.
При нарушении режима пастеризации или при низкой температуре пастеризации (63-72 оС), а также при наличии примеси непастеризованного молока (5-10%), содержимое пробирки быстро приобретает цвет от синеватого до темно-синего. Учет реакции проводят не более, чем через две минуты после добавления к молоку реактивов. Посинение содержимого пробирки позже 2-х минут не учитывается, так как последующее разложение реактивов (перекиси водорода) может вызвать окрашивание даже кипяченого молока.
Метод определения фосфатазы с 4-аминоантипирином основан на изменении цвета содержимого пробирки, которое происходит при реакции свободного фенола, содержащегося в молоке, с реагентом в присутствии окислителя. Свободный фенол в молоке образуется вследствие гидролиза фосфатазой фенилфосфорной кислоты.
В реакции с фенолфталеинфосфатом натрия под действием фосфатазы происходит гидролиз, в результате которого освобождается фенолфталеин, который в щелочной среде дает розовое окрашивание.
Если фермент отсутствует в молоке и молочных продуктах, цвет исследуемого образца не изменяется, т. е. аналогичен цвету контрольного образца. Поэтому считают, что молоко и молочные продукты были пастеризованы при температуре не ниже 63 °С. При наличии фосфатазы в молоке и молочных продуктах исследуемый образец имеет окрашивание от светло-розового до темно-красного. Следовательно, молоко и молочные продукты пастеризовали при температуре ниже 63 "С или они были смешаны с непастеризованными молочными продуктами [9, 10].
Определение кислой фосфатазы основано на свойстве данного соединения, которое при рН 4,00±0.05 катализирует гидролиз динатриевой соли фенилфосфорной кислоты с образованием фенола и фосфата натрия. При реакции фенола с 4-аминоантипирином в условиях щелочной реакции при добавлении осадителя цвет содержимого пробирки изменяется. По разности интенсивности окраски в опытных и контрольных группах определяют активность кислой фосфатазы.
При полной инактивация кислой фосфатазы в молоке окраска опытных не отличается от окраски контрольных проб. Следовательно, молоко прошло пастеризацию с соблюдением температурных режимов.
Если окраска опытных проб изменяется, то это свидетельствует об активности кислой фосфатазы и свидетельствует о несоблюдении режимов термической обработки.
Таким образом, химические методы основаны на определении присутствия пероксидазы и фосфатазы в сыром молоке и приготовленных из него продуктах и отсутствия этих ферментов в пастеризованном молоке и продуктах, выработанных из него. Сущность химических методов заключается в разложении (пероксидазой) или гидролизе (фосфатазой) внесенных в молоко химических реактивов и изменении при этом его цвета. Температура инактивации (разрушения) ферментов выше температуры, при которой погибают патогенные микроорганизмы. Если в молоке отсутствуют эти ферменты, то отсутствуют и патогенные бактерии, а молоко считают пастеризованным при заданном режиме и безопасным в санитарно-гигиеническом отношении [8-10].
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
ТР ТС 033/2013 «О безопасности молока и молочной продукции» : Решение от 10.12.2013 г. №297: принят Советом Евразийской экономической Комиссией.
ГОСТ 3623 «Молоко и молочные продукты. Методы определения пастеризации».
ГОСТ 26809.1 – 2014. Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу