XII Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2020

Метод трансплантации эмбрионов - повышает число потомства в десятки раз и ускоряет воспроизводство высокопродуктивных коров путём получения одного или нескольких эмбрионов высокоценных животных (доноров) и перенос этих эмбрионов к менее ценным животным (реципиентам) [3].

Влияющие факторы на результат трансплантации:

-физиологически полноценное течение половых циклов.

- определение точных сроков охоты.

- регулярное течение половых циклов.

- физиологическое состояние реципиентов (упитанность, правильная форма таза, хорошее развитие репродуктивных органов - без патологических изменений).

- высокая резистентность организма к условиям внешней среды [1].

Трансплантация эмбрионов - это сложный процесс состоящий из ряда последовательных этапов: отбор доноров, вызывание у них полиовуляции, их осеменение, извлечение эмбрионов, оценка развития эмбриона, культивирование, замораживание, их пересадка реципиентам. Каждый из этих этапов имеет значимое влияние на результативность, следовательно важно строго соблюдать всю технологию данного метода [8].

Организация подготовки эмбрионов включает в себя:

1. Отбор доноров. Донор - животное с высокой племенной ценностью, от которой получают эмбрионы после гормонального редуцирования суперовуляции и осеменения спермой выдающегося животного. Важные критерии отбора:

- высокая племенная ценность,

-хорошее физиологическое состояние,

-воспроизводительные качества [6].

Для получения большого количества эмбрионов отбирают маток – доноров, которым вводят гормональные препараты (содержащие ФСГ) что стимулирует у них высокую суперовуляцию.

2. Отбор производителей. Производитель – животное, осеменяющее донорскую яйцеклетку, обладающий высокой производительностью потомства, а так же улучшает их селекционные признаки. В целях трансплантации используют только тех производителей, которые имеют положительные результаты при спаривании с высокопродуктивными самками. Результативность метода зависит от условий кормлений и содержания животных, как и от сроков эффективности использования и длительности. С другой стороны более длительный срок приводит к ожирению и снижению эффективности производства эмбрионов [6].

Для вызывания супер овуляции у крупного рогатого используют гонадотропные препараты:

1. ГСЖК - гонадотропин сыворотки жеребых кобыл. Обладает комплексной фолликулостимулирующей и лютеинизирующей активностью. Период полураспада экзогенного ГСЖК у коров около 6 дней. Стимуляция роста фолликулов сопровождается увеличением массы яичников, образованием разного числа и величины желтых тел после овуляции. Из-за длительности распада ГСЖК в крови идет повышенная концентрация гормонов. При индукции суперовуляции ведёт к изменению эндокринного статуса и оказывает неблагоприятное действие на оплодотворяемость яйцеклеток, развитие зародышей и на физиологическое состояние половых органов [2].

Так же используют гипофизарные препараты. Такие, как ФСГ - фолликулостимулирующий гормон. Физиологическое действие – стимуляция роста и созревания филиалов яичника, образование фолликулярных гормонов (эстрогена)- регулирующий процесс течки.

ЛГ + ФСГ вызывает овуляцию и стимулирует образование жёлтого тела. При этом оно выполняет функцию гормональной железы - вырабатывая гормон прогестерон - обеспечивающий сохранение беременности. Основные используемые препараты на практике В США - (ФСГ- П), РОССИЯ – (ФСГ- супер), ЧЕХИЯ – Фолликотропин, ЛИТВА - фоллитропин. ФСГ- вводится многократно, так как период полураспада очень краткий ( 5- 6 час) в отличии от средств ГСЖК. Применение ФСГ+ простагландинами позволяет получить 5- 6 жизнеспособных эмбрионов и 10- 12 овуляций на донора. Эффективность трансплантации эмбриона зависим от способов извлечения. Оплодотворённые яйцеклетки из суперовулированных коров - доноров извлекаются тремя способами:

- После убоя коровы - донора. Является простым и надёжным. Практиковался на первых этапах основания трансплантации. В настоящее время не используется из-за потерь генетически ценных особей.

- Хирургическим вмешательством. Эффективность зависит от определения стадии развития эмбрионов и их местоположения в половых путях самки. В основном используются бластоцисты, после искусственного осеменения их извлекают на 7- е , 8 - е сутки. Извлекают двумя способами: лапаротомия (в области голодной ямки или по белой линии живота); разрез верхнего свода влагалища. Недостатки хирургического метода - трудоёмкость, дороговизна, однократное применение.

- Не хирургический. Преимущества - простота манипуляций, эмбрионы извлекают как в специальных помещениях, так и в производственных условиях. Извлечение эмбриона: в рог матки вводят продезинфицированный двух канальный резиновый (пластмасс) катетер с надувным баллончиком, в который нагнетают 10 – 15 воздуха перекрывая тем самым выход из рога матки. Затем вводят промывную жидкость (фосфатно солевой буфер - PBS)до 500 мл осторожно масируя, чтобы отделить эмбрионы от стен матки, повторяют 5-8 раз. Основанная часть эмбрионов извлекается в первых 3 - 4-х смывах. Промывание обоих рогов матки, введение катетеров - занимает 20-50 минут за это время извлекаются, эмбрионы в стадиях морулы или бластоцисты более 50% [4].

Пересадка эмбрионов реципиентам. Осуществляется не хирургическим методом. В колбу со свежей питательной средой и пузырьком воздуха помещают основной объем среды с эмбрионом, затем поместив в катетер Кассу оставляют в термостате при t = 37 °С до момента пересадки. Под ректальным контролем пропускают катетер через шейку матки, вводят, в рог матки на 5-7 см выдавив содержимое пайетты с эмбрионами. Эффективность метода зависит от синхронности проявления охоты у донора и реципиента. У КРС возросшее число беременностей получили после синхронной пересадки - введением эмбрионов в оба рога матки. Этот метод высокоэффективен и успешно применяем для получения двойного приплода ( пересадка 7-мм дневных эмбрионов осеменённому животному в рог противоположный яичнику с жёлтым телом. По окончании процедуры в матку вводят раствор антибиотиков с целью антисептики. При правильном проведении процедуры не нарушается воспроизводительная способность доноров и повышается многократность использования для получения от них большего числа потомков [1, 5, 8].

Хранение эмбрионов. Период между извлечением и пересадкой эмбрионов требует эффективного метода их хранения. Эмбрионы извлекаются чаще всего - утром, пересаживаются - в конце дня. Замораживают по способу глубокой заморозки. В целях трансплантации используются особи с положительными результатами при спаривании с самками, не должны иметь хромосомных мутаций, а их потомства - наследственные недостатки. Главной целью является получение максимального количества ценных в генетическом отношении животных - трансплантатов от высокопродуктивных самок и самцов, проверенных по качеству потомства [9].

В России в настоящее время технология трансплантации эмбрионов КРС очень актуальна по многим причинам, главная из которых дефицит племенного скота, возникший из-за сокращения числа крупных племенных предприятий. Каждый год создаются центры по трансплантации эмбрионов. В РФ трансплантацией занимаются: ООО "Научно-производственное предприятие "Южно-Уральский центр трансплантации эмбрионов", Научно-исследовательский центр биотехнологии, репродукции сельскохозяйственных животных при Уральской госакадемии ветеринарной медицины (Троицк, Челябинская область) и т.д.

В Башкирии трансплантацией эмбрионов занимается ОАО «Агропромышленное хозяйство « Алатау». В 2010 году на молочном комплексе «Алатау» начала функционировать эмбриональная лаборатория. В Республике Башкортостан эмбриональная лаборатория молочного комплекса «Алатау» единственная, занимающаяся полным циклом трансплантации и вымыванием (данные на 2011 год). В настоящий момент в банке эмбрионов хранится более 50 замороженных эмбрионов. Работа по эмбриональному направлению на молочном комплексе ведется каждый день. Приживаемость эмбрионов составляет в среднем 53 % [7].

Библиографический список.

1. Бирюков, В.С. Основы промышленной биотехнологии / В.С. Бирюков.- Москва: КолосС, 2004. - 296 с.

2. Вызывание суперовуляции у коров-доноров [Электронный ресурс]// Студопедия. – Режим доступа: https://studopedia.ru/15_126984_vizivanie-superovulyatsii-u-korov-donorov.html. –Дата обращения: 20.11.2019.

3. Голубец, Л.В. Оценка качества ооцитов и эмбрионов крупного рогатого скота: учеб. - метод. пособие / Л.В. Голубец, И.С. Кысса, А.С. Дешко и др. — Гродно : ГГАУ, 2011. – 68 с.

4. Извлечение и оценка эмбрионов [Электронный ресурс]// Студопедия. – Режим доступа: https://studopedia.ru/11_184713_izvlechenie-i-otsenka-embrionov.html. –Дата обращения: 20.11.2019.

5. Коростелева, Н.И. Биотехнология: учебное пособие / Н.И. Коростелева, Т.В. Громова, И.Г. Жукова. — Барнаул: Изд-во АГАУ, 2006.- 127 с.

6. Мырзахметов, Т. М. Роль биотехнологии в развитии животноводства: Аналитический обзор / Т.М. Мырзахметов, Г.З. Оспанова. - Алматы: НЦ НТИ, 2009. –51 с.

7. Первые результаты работы эмбриональной лаборатории на молочном комплексе «Алатау» в республике Башкортостан [Электронный ресурс]// Сельское хозяйство. – Режим доступа: https://www.dairynews.ru/presentation/pervyje_rezultaty_raboty_embrionalnoj_laboratorii_.html. –Дата обращения: 20.11.2019.

8. Самоделкин, А. Трансплантация эмбрионов с мясном скотоводстве / А. Самоделкин, А. Колягин // Молочное и мясное скотоводство.- 2008.- №6-С.35-39

9. Хранение эмбрионов [Электронный ресурс]// Сельское хозяйство. – Режим доступа: https://vuzlit.ru/333695/hranenie_embrionov. –Дата обращения: 20.11.2019.

Код для цитирования: Скопировать