XII Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2020

Сибирская язва (карбункул злокачественный, антракс, Anthrax) — особо опасная антропонозная инфекционная болезнь сельскохозяйственных и диких животных всех видов, а также человека, вызываемая бактерией Bacillus anthracis.

Этиологическим агентом сибирской язвы является грамположительная, палочкообразная, формирующая споры бактерия. Микроб встречается в трех формах: вегетативной, в виде палочки различной величины клеток (капсульных и бескапсульных), и споровой. Споры могут быть заключены в хорошо выраженный экзоспориум и находиться внутри и вне палочек в виде изолированных телец. В окрашенных препаратах из крови и тканей бациллы располагаются одиночно, попарно и в виде коротких цепочек. (рисунок 1) [1]

Рисунок 1-Bacillus anthracis

1 – спора, 2 – капсулы, 3 – капсулы

http://biologylib.ru/books/item/f00/s00/z0000015/st037.shtml

Рисунок 2-Микрофотография бацилл сибирской язвы. Окраска по Граму

https://ru.wikipedia.org/wiki/Сибирскаяязва

Бактериологическая диагностика. По Граму: окрашиваются грамположительно. Палочки располагаются короткими цепочками или попарно, концы их, обращенные друг к другу, резко обрублены, свободные концы обычно закруглены. В отдельных случаях (чаще в мазках от свиней) форма микробов сибирской язвы может быть нехарактерной (короткие толстые или изогнутые, иногда зернистые палочки со вздутием посередине или на конце, возможно наличие "теней" микробов).

В окрашенных специальными методами мазках из патологического материала и среды ГКИ сибиреязвенные палочки окружены капсулой. [3]

При окраске мазков из несвежего патологического материала микробы могут быть также несколько увеличены, концы закруглены, морфологическая стройность бацилл нарушена, они как бы "изъедены", иногда остаются "тени", а от капсулы могут оставаться одни обрывки, которые окрашиваются очень слабо.

Для обнаружения спор в некоторых образцах внешней среды после фиксации мазки окрашивают карболовым фуксином по Цилю-Нильсену. После фиксации мазка на стекло кладут полоску фильтровальной бумажки и на нее наливают карболовый фуксин Циля. Мазок с краской подогревают на пламени спиртовки до появления паров (но не до кипения) и краску оставляют на препарате без подогревания еще на 2-3 мин. Бумажку удаляют пинцетом, краску сливают, препарат промывают водой. Затем обесцвечивают 5%-й серной кислотой до желтоватого оттенка (3-5 с). Тщательно отмывают препарат водой, ополаскивают 5-10 с 96%-м спиртом, а потом – водой. Докрашивают мазок метиленовой синью Леффлера 3 мин, смывают водой и просушивают. Препарат просматривают в микроскопе с иммерсионной системой. В мазках наблюдают палочки синего цвета. Споры, в зависимости от степени их жизнеспособности, могут окрашиваться следующим образом: 1) розовые с более интенсивной окраской по периферии-жизнеспособные; 2) равномерно окрашенные в красный цвет-слабо жизнеспособные; 3) синие-не жизнеспособные. По результатам микроскопического исследования немедленно дают предварительный ответ.

Неподвижность истинных бактерий сибирской язвы (существенное отличие от банальных антракоидных или псевдосибиреязвенных бактерий, широко распространенных в природе — в почве, воде, пыли) контролируется при помощи исследования их в висячей капле.

МФА: мазки с нанесенными на них люминесцирующими иммуноглобулинами помещают во влажную камеру (чашку Петри или эксикатор с увлажненной 0,9%-м раствором натрия хлорида или дистиллированной водой фильтровальной бумагой или комочком ваты), выдерживают для окрашивания при 37 °С в течение 20 мин. После этого их тщательно промывают два раза по 10 мин в 0,9%-м растворе натрия хлорида, затем в дистиллированной воде и высушивают на воздухе. Препараты покрывают покровными стеклами или просматривают без покровных стекол. Мазки микроскопируют в люминесцентном микроскопе с системой подобранных светофильтров и иммерсионным объективом. При этом необходимо пользоваться нефлуоресцирующим иммерсионным маслом.

Такое свечение называется специфическим, в отличие от неспецифического, характеризующегося равномерным неярким свечением всей поверхности клеток. Для учета результатов используется арбитражная система оценки по интенсивности свечения и количеству специфически светящихся клеток. [1]

Дифференциальная диагностика. Диагноз сибирской язвы считают установленным при наличии соответствующей клинической картины, эпидемиологического анамнеза, подтвержденных одним из нижеперечисленных способов:

- выделение из патологического материала культуры антракса, гибель хотя бы одного зараженного лабораторного животного и выделение из его органов культуры со свойствами, характерными для возбудителя;

- выделение вирулентной культуры В. anthracis из предполагаемого источника или фактора передачи;

- положительная антраксиновая проба.

Если по прошествию 72 часов положительные результаты не получены, окончательное отрицательное заключение может быть сделано не ранее 10 суток после заражения биопробных животных (отрицательной биопробы). [4]

Специальная профилактика. Переболевание животного сибирской язвой или же его вакцинация сопровождаются развитием гиперчувствительности замедленного типа. В результате естественного заражения и переболевания сибирской язвой у животных возникает длительный иммунитет. Активная защита животных от сибирской язвы путём вакцинации. Применяют живые споровые сибиреязвенный вакцины: вакцина из бескапсульного штамма 55 в сухом и жидком виде (иммунитет наступает через 10 дней и сохраняется не менее 1 года). (рисунок 3)

Рисунок 3-Вакцина против сибирской язвы животных из штамма 55-ВНИИВВиМ живая сухая, жидкая

http://www.biofabrika.com/catalog.html?cid=13

Наиболее широко при сибирской язве применяют антибиотики. В ряде работ сообщается об эффективности лечения пенициллином. При этом отмечается быстрое исчезновение возбудителя из мест поражения.

Пенициллин наиболее активен, однако при его использовании иногда наблюдаются аллергические реакции, и он неэффективен при местных поражениях. Предполагается, что пенициллин не может нейтрализовать тканеповреждающий фактор, выделяемый бациллами.

Специфическое лечение при сибирской язве целесообразно сочетать с применением симптоматических средств, из которых особого внимания заслуживают сердечные, а также глюкоза (внутривенно). [2]

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Воронин, Е. С. Электронный дидактический комплекс. Ветеринарная микробиология и иммунология: курс для студентов по специальности "Ветеринария" – 36.05.01 / Е. С. Воронин [и др.]. – Новосибирск: НГАУ, 2015. – Режим доступа: 08.12.2019

2. Галиуллин, А. К. Мониторинг сибирской язвы в современных условиях [Электронный ресурс] / А. К. Галиуллин, И. М. Хисамиев. – 2015. – Режим доступа: https://cyberleninka.ru/article/n/monitoring-sibirskoy-yazvy-v-sovremennyh-usloviyah – 08.12.2019

3. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Лабораторная диагностика и обнаружение возбудителя сибирской язвы [Электронный ресурс]: МУК 4.2.2413-08. – [утв. Роспотребнадзором 29.07.2008] – Режим доступа: 08.12.2019

4. Саяпина, Л. В. Современные состояние лабораторной диагностики сибирской язвы: обнаружение и идентификация Bacillus anthracis [Электронный ресурс] / Л. В. Саяпина, Р. Н. Лобач, В. П. Бондарев, Н. Ф. Никитюк. – 2016. – Режим доступа: https://cyperleninka.ru/article/n/sovremennoe-sostoyanie-laboratornoy-diagnostiki-sibirskoy-yazvy-obnaruzhenie-i-identifikatsiya-bacillus-anthracis – 08.12.2019