XI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2019

Серый кит, или калифорнийский кит (Eschrichtius robustus) — морское млекопитающее подотряда усатых китов. Единственный вид семейства серых китов (Eschrichtiidae). Ареал распространения популяции серых китов охватывает субтропические, умеренные и холодные воды. К настоящему времени, благодаря развитию иммуногистохимических методов исследований, позволяющих на ультраструктурном уровне оценить строение и функции лимфатических узлов, лимфология приобрела значительные масштабы, так как произошло заметное увеличение количества поступающих сведений. Но несмотря на достаточную распространённость данного животного, научная литература не содержит исчерпывающей информации по особенностям цитоархитектоники лимфатических узлов брыжейки кишечника. Лимфатические узлы брыжейки принимают участие в механизмах иммунной защиты. Они являются своеобразным маркером состояния здоровья, отражают действие экзогенных факторов на иммунную систему пищеварительного тракта животного. В течение всей жизни живые организмы подвергаются самым разнообразным влияниям окружающей среды, среди которых далеко не каждое воздействие способствует нормальному физиологическому функционированию организма [3, с. 62]. В составе лимфоидных образований функционируют иммунокомпетентные клетки, участвующие в общих и местных иммунных реакциях, образуя единую иммунную систему [1, с. 17]. В анализируемой общедоступной литературе не обнаружены сведения о клеточном составе лимфатических узлов брыжейки, что и привело нас к изучению данной проблемы.

Целью работы является изучение цитоархитектоники лимфатических узлов у серого кита.

Материалами для исследования послужили лимфатические узлы брыжейки серого кита. Для гистологического исследования фиксировали брыжеечные лимфатические узлы в 10%- ном нейтральном формалине. Биоматериал по общепринятой методике заливали в парафин. На микротоме изготовляли срезы толщиной 4–5 мкм. Полученные срезы окрашивали гематоксилином Гарриса с докраской эозином. Подсчет клеточного состава по морфофункциональным зонам – в корковом веществе и герминативном центре производили под микроскопом Микромед-2, с помощью окулярной сеткой по методу случайного шага. Идентификацию учтенных в работе клеток проводили согласно методу Г.С. Катинас с соавт. [2, с. 51]. Полученные в работе цифровые данные обработаны методами вариационной статистики с помощью программы «Биостатистика» [4, с. 27].

Брыжеечные лимфатические узлы являются структурными элементами лимфатической системы организма, они расположены непосредственно в брыжейке кишечного отдела, между листками брюшной полости. На срезах брыжеечных лимфатических узлов выражен соединительнотканный каркас. Капсула лимфатического узла плотная, ее толщина достигает 1075,0±17,2 мкм (рис. 1).

Рисунок 1- Корковое вещество брыжеечного лимфатического узла серого кита (ув. 40 Х, ок. 10). Окраска гематоксилин - эозин.

Трабекулы выражены незначительно. Отсутствует четкое разделение между зонами лимфатического узла. Соотношение коркового и мозгового вещества 3:1. Лимфоидные фолликулы в лимфатическом узле располагаются хаотично, при анализе определенные структуры и последовательности расположения не замечены (рис. 2).

Рисунок 2 – Лимфоидные узелки брыжеечного лимфатического узла серого кита ( ув. 40 Х, ок. 10). Окраска гематоксилин эозин. 1 - Вторичные лимфоидные узелки.

Лимфоидные фолликулы представляют собой скопление лимфоидной ткани. На его уровне происходит первичное распознавание, а также дифференцировка В- клеток зародышевого центра [5, с. 166]. Количество на одном срезе лимфатического узла варьирует от 53 до 69 фолликулов. Размеры самых крупных фолликулов достигают 650,0±28,3 х 750,0±24,1 мкм. Размеры самых мелких фолликулов составляют 100,0±25,4 х 125±21,8 мкм. В основном, все лимфоидные фолликулы вторичные, то есть имеют герминативный центр.

Обнаружено небольшое количество первичных маленьких лимфоидных узелков количеством до 4 штук.

Количественное содержание клеток герминативного центра и коркового вещества представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Клеточный состав герминативного центра и коркового вещества

Основными клетками лимфоидного ряда в герминативном центре и корковом веществе лимфатических узлов брыжейки являются лимфоциты, составляющие 85,2±0,8% и 93,3±0,4% соответственно. При световой микроскопии они видны в виде округлых темноокрашенных клеток. Лимфоциты - главные клетки иммунной системы, обеспечивают гуморальный иммунитет (выработка антител), клеточный иммунитет (контактное взаимодействие с клетками-жертвами), а также регулируют деятельность клеток других типов. Кроме лимфоцитов встречаются в меньшей степени ретикулярные клетки, иммунобласты, плазмобласты, плазмоциты, макрофаги, митотически делящиеся клетки. Количество ретикулярных клеток больше в корковом веществе, оно составляет 2,2±1,2%, а в герминативном центре только 1,0±0,7%. Вероятно, это объясняется такой функцией ретикулярных клеток, как участие в образовании стромы органов иммунной системы. При световой микроскопии они видны в виде вытянутых клеток с длинными отростками. Иммунобласты составляют 2,2±0,5% в герминативном центре и 1,8±0,3% в корковом веществе. Это активно делящиеся клетки лимфоидного ряда, из которых образуются плазмоциты или активные Т-лимфоциты. При световой микроскопии – клетки большого размера (самые крупные клетки лимфоидного ряда), со светлоокрашенной цитоплазмой, ядро бледнее, чем у лимфоцитов. Плазмобласты также превалируют в герминативном центре и составляют 3,0±1,3%, когда как в корковом веществе 2,0±0,9%. Ядро несколько меньше, чем у иммунобласта, и в подавляющем большинстве случаев располагается эксцентрично. Плазмобласты являются предшественниками плазмоцитов при дифференцировке В-лимфоцитов. Количество зрелых плазмоцитов незначительно, и составляет в герминативном центре 0,4±0,2%, а в корковом веществе 0,1±0,2%. Зрелые плазматические клетки круглой или овальной формы, имеют маленькие размеры. Плазмоциты - основные клетки, продуцирующие антитела в организме. Являются конечным этапом развития B-лимфоцита. Митотически делящиеся клетки, в основном, преобладают в герминативном центре и составляют 6,6±1,1%, в корковом же веществе их количество составило 2,6±1,3%. Макрофаги встречаются непостоянно, их общее количество составило 1,6±0,8%. Макрофаги образуются из моноцитов и являются главными структурами фагоцитоза – процесса захвата и переваривания чужеродных веществ или патогенных возбудителей, угрожающих нормальной жизнедеятельности организма животного. Регулируют механизмы специфического адаптивного иммунитета посредством моноцитарно-макрофагальной системы, продуцируют цитокины.

На основании проведенного исследования клеточный состав лимфатических узлов брыжейки представлен лимфоцитами, иммунобластами, плазмобластами, зрелыми плазмоцитами, макрофагами, ретикулярными и митотически делящимися клетками. Проанализировав вышеизложенное, можно сделать следующие выводы: главными клетками лимфатических узлов брыжейки у серого кита являются лимфоциты. Их число колеблется от 85,2±0,8% до 91,3±0,4%. Вторичными клетками по количеству являются митотически делящиеся клетки (2,6±1,3 – 6,6±1,1%), причем большая их часть находится в герминативной зоне, а также ретикулоциты, которые преобладают в корковом веществе и достигают 2,2±1,2%. Иммунобласты (1,8±0,3 – 2,2±0,5%), плазмобласты (2±0,9 – 3±1,3%), зрелые плазматические клетки (0,1±0,2 – 0,4±0,2%), макрофаги (1,6±0,8%) немногочисленны и наиболее часто встречаются в герминативных центрах. Лимфатические фолликулы отвечают за местный иммунитет организма. В результате контактирования лимфоцитарных клеток с антигенами активируется антигензависимая пролиферации лимфоцитов, что и объясняет большое количество митотически делящихся клеток и переходных форм. Достаточно значимые проявления действия факторов окружающей среды фиксируются в структурах лимфатической системы, выполняющих дренажную, детоксикационную и иммунную функции. Одной из таких структур является лимфатический узел, дренирующий участки, наиболее часто контактирующие с факторами внешней среды. Значительные нагрузки испытывает иммунная система пищеварительного тракта, поэтому изучение морфогенеза ее структур является действительно значимой задачей.

Список литературы:

1. Алаотс, Я.В.О фило- и онтогенетическом аспекте иммунитета /Я.В. Алаотс // Сб. науч. тр. Эстонской с.х. академии. - 1983. - №141. - С. 11–19.

2. Катинас,Г.С. Динамика количества клеток лимфоидного ряда в паракортикальной зоне лимфатических узлов у мышей С57В / Г.С. Катинас, О.Г. Ляшко, И.А. Баженова // Временная и пространственная организация тканей. Л.: Изд. 1-го Лен. мед. ин-та., 1981. - С. 47–54.

3. Койгушская Г. П., Евтушенко В. М., Федосеева О. В. Брыжеечный лимфатический узел как маркер экзогенных факторов на иммунную систему пищеварительного тракта // ППМБПФВС. - 2008. - №5. – С. 61-63.

4. Стефанов, С.Б. Ускоренный способ количественного сравнения морфологических признаков: методические рекомендации. Благовещенск: РИО Амурупрполиграфиздата, 1988. – 27 с.

5. Топтыгина, А.П. Лимфоидный фолликул — территория иммунного ответа // Иммунология. - 2012. - №3. – С. 162-168