XI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2019

Для получения МАТ используют взвесь клеток (с большим содержанием В-лимфоцитов), полученных из селезенки иммунизированной мыши. При слиянии их с опухолевой клеткой образуются гибридные клетки - гибридомы [1]. Отбор продуктивных гибридных клеток проводится при длительной

инкубации первичной культуры в среде, содержащей гипоксантин, аденозин и тимидин – ГАТ-среде. Клетки селезенки могут преодолевать действие ингибитора, используя для синтеза ДНК гипоксантин и тимидин. В результате получают гибридому, продуцирующую моноклональные антитела. Производство моноклональных антител этими клетками осуществляют in vitro в биореакторе или in vivo в асцитной жидкости мыши. (рис.1)

Рис. 1. Схема получения МАТ.

А, В, С - многокомпонентная смесь антигенов, использованная для иммунизации (или сложные антигены с множеством антигенных детерминант);

АОК - антителообразующие клетки селезенки;

Пл - клетки плазмоцитомы, не растущие в селективной ГАТ- среде;

ПЭГ - полиэтиленгликоль;

ГАТ - среда, содержащая гипоксантин, аминоптерин, тимидин; анти-А, анти-В, анти-С - моноклональные антитела соответственно к А-, В-, С-антигенам (или антигенным детерминантам).

В терапии онкологических заболеваний используются как неконъюгированные МАТ, не связанные с цитотоксическими веществами, так и конъюгированные, лечебный эффект которых обусловлен присоединенными к ним веществами (радиоактивными частицами, цитостатиками или токсинами). Большинство из них связывается с антигенами опухолевых клеток, но при этом они зачастую могут взаимодействовать с антигенами на здоровых клетках, а также другими свободными белковыми рецепторами [6].

Большинство из применяемых в онкологии МАТ-неконъюгированные, которые в различной степени реализуют свое воздействие на злокачественную опухоль. Одни антитела, связываясь с соответствующим антигеном, запускают естественные механизмы иммунного ответа организма и разрушают опухолевые клетки. Другие - не взаимодействуют с иммунной системой человека. Их эффект реализуется через связывание с антигенами, обеспечивая пролиферацию клеток или рост опухоли [5, 6].

Важно отметить, что полученный с помощью гибридомы клеточный клон является мышиным иммуноглобулином, который при попадании в организм человека вызовет реакцию отторжения. Однако благодаря рекомбинантным технологиям, взяв фрагмент мышиного моноклона и соединив его с фрагментом человеческого иммуноглобулина, были получены гибридомы, получившие название химерных

Первые МАТ, одобренные для применения в терапии онкологических заболеваний, это ритуксимаб (ритуксан, мабтера), представляющий собой химерные моноклональные антитела мыши / человека специфически связывающиеся с антигеном CD20+ (рис. 2).

Рис. 2. Химерные моноклональные антитела мыши / человека.

Данный антиген локализуется на поверхности В-лимфоцитов, но отсутствует на стволовых гемопоэтических клетках и здоровых клетках других тканей. Другие гуманизированные МАТ, связывающееся с антигеном CD52 –алемтузумаб (кампат, кэмпас). Эти антигены экспрессируются на мембране большинства опухолевых T- и В- лимфоцитов с очень высокой плотностью [6].

Перспективным направлением в создании новых препаратов на основе моноклональных антител, является использование каталитических антител - абзимов. Эти молекулы обладают свойствами антител, т.к. могут связываться с определенными эпитопами, и в то же время они являются биокатализаторами биохимических реакций, участвуя в опухолевой инвазии и метастазировании [5].

Список литературы:

1. Будчанов Ю.И. Моноклональные антитела. Использование в диагностике заболеваний и лечебные моноклональные антитела. Тверь. 2012г.,С.5-9.

2. Патент на изобретение RUS 2003680. Штамм гибридных культивируемых клеток mus muscukus l., используемый для получения преципитирующих моноклональных антител к IgM человека / Ефетов К.А., Тэтин С.Ю., Князева О.А., Троицкий Г.В. –Опубл. 10.01.1992.

3. Ефетов К.А., Князева О.А. Применение моноклональных антител к иммуноглобулинам человека в реакции иммунопреципитации // Иммунология. - 1994. - Т. 15, № 3. - С. 57-58.

4.Князeвa, O.A. Взaимoдeйcтвиe кoмплeмeнтa c иммyнoглoбyлинaми G и кoнфopмaциoнныe измeнeния кoмпoнeнтa C3 пpи нeoплacтичecких пpoцeccaх: дис. ... д-ра биол. наук: 03.00.04, 03.00.02 / Князeвa Oльгa Aлeкcaндpoвнa. – Уфа, 2008. – 288 c.

5. Князева О.А., Камилов Ф.Х. Комплемент и антитела при онкологических заболеваниях. Результаты исследований. Германия: LAP LAMBERT Academic Publishing, 2011. – 284 c.

6. Кеннет Р. Г., Мак-Керн Т. Дж., Бехтол К. Б. Моноклональные антитела: Гибридомы: новый уровень биологического анализа. М.: Медицина, 1983. – 169 с