XI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2019

Искусственно синтезированные глипролины относятся к аналогам эндогенных пептидов обладающих широким спектром фармакологических эффектов, среди которых: антистрессорная активность, гастропротекция на различных моделях язвообразования, угнетение желудочной секреции HCL у крыс, нормализация липидного профиля крови (снижение лпНп и повышение лпВп), ингибирование агрегации тромбоцитов и т.д.), а также, что немаловажно, минимальное количество побочных эффектов.

Целью исследования является изучение влияния глипролина (лейцинсодержащего аналога PGP) PGP-Leu в дозах 0,1 и 1,0 мг/кг на активность зон ядрышко-организующих регионов (далее ЯОР) эпителиальных тканей желудочно-кишечного тракта (далее ЖКТ) белых крыс в физиологических условиях.

Исследуемый пептид был разработан в институте молекулярной генетики РАН совместно

ЗАО «инновационный научно-производственный центр Пептоген» и предоставлен для исследования доктором химических наук, профессором, академиком РАН Мясоедовым Николаем Федоровичем.

Эксперимент проводился на беспородных белых крысах-самцах из вивария ЦНИЛ ДВГМУ. Для исследования было сформировано 3 группы крыс по 9 особей мужского пола в каждой. Вес животных составлял 280 – 340 г.

Первой (контрольной) группе ежедневно, в течение 5 суток, вводили 1мл изотонического раствора натрия хлорида внутрибрюшинно. Животным второй и третьей групп по такой же схеме, вводили глипролин PGP -Leu в оптимальных для исследования эффектов препарата дозах 0,1 мг/кг и 1,0 мг/кг массы тела, соответственно. Эффективные дозы для исследования были определены на основании ранее проведенных исследований на базе ЦНИЛ. На шестой день животные выводились из эксперимента.

Ткани крыс (биоптаты языка, желудка и тонкой кишки) фиксировали в 10% забуференном формалине. После промывки образцов проводилась стандартная гистологическая проводка - дегидратация и пропитка фрагментов тканей парафиновой средой (гистоваксом). Из парафиновых блоков на микротоме Leica SM2010R приготавливались срезы толщиной 4 микрона. Препараты сушились в течение суток при 370 С.

Для визуализации зон ЯОР депарафинизированные пепараты окрашивались по методу AgNORS, предложенным Мамаевым Н.Н. (окраска 50% раствором азотнокислым серебром)[1]. Окрашенные ядра и ядрышки приобретают коричневый цвет. Препараты заключались под покровные стекла с использованием канадского бальзама.

Морфометрические показатели зон ЯОР измеряли с помощью ПО «МЕКОС-Ц». Видеозахват препаратов осуществлялся объективом х100 на бинокулярном микроскопе «ЛОМО» с иммерсионным маслом. На введенных в систему снимках оценивались средняя площадь ядра (S), суммарная площадь зон ЯОР (∑S) и количество ядрышек (n). Для анализа показателей морфометрии просматривались 50 клеток каждого препарата. После выделения зон ЯОР все данные экспортировались в «Еxcel» для дальнейшей сортировки и обработки в Statistica 10.0

ходе исследования были получены следующие результаты: глипролин PGP-Leu вызвал угнетение зон ЯОР в эпителии языка и желудка с дозой 1,0 мг/кг по сравнению с контролем. После введения глипролина в дозе 0,1 мг/кг мы наблюдали активацию зон ЯОР в эпителии кишечника по сравнению с контролем.

Литература

Мамаев Н.Н., Бебия Н.М., Мамаева С.Е. И др. //Бюл. эксперим. Биологии и медицины. 1985. №4. С. 477 - 478