Для качественного обнаружения полисахаридов брали 25,0г сырья, измельченного до размера частиц 1-1,5мм, заливали 75 мл дистиллированной воды и нагревали на кипящей водяной бане с обратным холодильником 1 час. Извлечение фильтровали через складчатый фильтр. Экстракцию проводили еще дважды новыми порциями растворителя. Объединенные извлечения упаривали до 30 мл и полисахариды осаждали трехкратным объемом 96% этилового спирта, при этом образовывался рыхлый осадок, который отделяли, растворяли в воде, переосаждали, промывали спиртом и высушивали.
2%-ный раствор полученных веществ давал положительные реакции с реактивом Фелинга и 5%-ным раствором меди сульфата (кирпично-красное окрашивание).
Для определения моносахаридного состава водорастворимых полисахаридов, пектиновых веществ и гемицеллюлоз полисахариды гидролизовали (2 М серной кислотой при 1000С в течение 4 ч.). Идентифицировали моносахариды методом бумажной хроматографии при сравнении с достоверными свидетелями. Применяли систему растворителей: н-бутанол – уксусная кислота – вода (4:1:5). Наличие коричневых пятен на хроматограмме, совпадающих по значениям Rf с соответствующими свидетелями (Rf арабинозы, галактозы, глюкозы соответственно равны 0,35; 0,29; 0,3).
Моносахаридный состав представлен, в основном, арабинозой, глюкозой.
Таблица - Моносахаридный состав полисахаридных фракций
Исследуемый орган растения |
Фракции |
Моносахаридный состав |
||
арабиноза |
глюкоза |
галактоза |
||
Листья |
ВРПС |
- |
+ |
- |
ПВ |
+ |
- |
- |
|
ГЦ А |
- |
+ |
+ |
|
ГЦ В |
+ |
- |
- |
Литература:
Кочеткова Н.К. Химия биологически активных природных соединений.- М., 1970.- 486 с.
Кусова Р.Д.Нормативные исследования сырья Centaurium umbelatum Cilib. Среднегорного пояса. В книге: Химия и химическое образование. XXI век. Владикавказ, 2014. С. 133-136.