Но так или иначе любая техника подвергается износу оборудования, способна сломаться в любой момент. Поэтому приходится прибегать к общедоступным методам исследования крови, а именно использованию таких инструментов, как: камера Горяева, микроскоп, предметные стекла и т.д. В данном случае погрешность в подсчете резко возрастает.
Студенты часто сталкиваются с проблемой исследования крови методом микроскопирования. При подсчете эритроцитов в микроскопе в камере Горяева можно четко различить эритроциты в больших и малых квадратах камеры. Но так как приходится долго высчитывать количество клеток, изображение может расплываться из-за индивидуальных особенностей зрения, усталости и постоянного, долговременного напряжения глазного яблока. Именно поэтому может возникать погрешность при подсчете. Чтобы избежать этого я предлагаю использовать обыкновенный мобильный телефон с камерой не менее 8 Мп.
Начальный этап подготовки к подсчету эритроцитов такой же, как и в традиционном методе. Для этого производят взятие крови у больного животного для исследования. Предварительно набрав в пробирку антикоагулянт. Это может быть 1% водный раствор гепарина, в расчете 1 капля на 5 мл крови; 20% раствор лимоннокислого натрия из расчета 0,3-0,5 мл на 10 мл крови [1-36]. После этого кровь набирают в меланжер до отметки 0,5 или 1 мкл, затем разбавляют 0,85% раствором хлорида натрия до отметки 101. Получают разбавление крови в 200 и 100 раз соответственно. Затем, зажав пальцами начало и конец меланжера, кровь медленно перемешивают, чтобы избежать разрушения эритроцитов. Покровное стекло притирают к камере Горяева. Важно отметить, что камера должна быть полностью обезжирена, чтобы обеспечить плотное соприкосновение с покровным стеклом до образования радужных колец. После этого из меланжера 3 капли крови капают на ватный тампон, последующими заполняют камеру так, чтобы поверхность, на которую нанесена сетка была заполнена жидкостью равномерно, без воздушных пузырьков и без затекания в бороздки камеры. Выждав 2 минуты камеру кладут в микроскоп, используя объектив 8х, окуляр х15 в пяти больших квадратах, расположенных по диагонали, начиная с левого большого квадрата, разделенного на 16 маленьких.
Выбранную область для подсчета настраивают до максимальной четкости микровинтом микроскопа. Затем используя камеру мобильного телефона фотографируют квадрат, в котором следует произвести посчет клеток ( рис 1). Так же фотографируют и другие 5 больших квадратов, разделенные на 16 маленьких. Производят их подсчет.
Количество эритроцитов определяют по формуле:
Х = (А х 4000 х В) / Б, где Х- количество эритроцитов в 1 мкл крови, А - количество эритроцитов, сосчитанных в пяти больших квадратах; Б - количество малых квадратиков в пяти больших (5х8=80); В - степень разведения крови (200 или 100).
Таким образом мы узнаем количество эритроцитов в 1 мкл крови.
Данный метод позволяет почти без погрешности подсчитать количество эритроцитов. Для исключения ошибки можно распечатать фотографии, и отмечать подсчитанные клетки ручкой или маркером во избежание их повторного подсчета.
Таким образом, использование мобильного телефона позволяет без особого труда произвести подсчет не только эритроцитов, но и лейкоцитов, а так же вывести лейкоцитарную формулу. На экране телефона можно приблизить сфотографированное изображение и лучше рассмотреть клетки крови. Это позволяет судить о ходе патологического процесса, прогнозировать исход болезни.
Рис. 1 Фото камеры при подсчёте форменных элементов крови.
Список литературы:
Биохимические и некоторые иммунологические показатели крови у собак, при лечении инфицированных ран сорбентами природного происхождения/В. А. Ермолаев, Е. М. Марьин, C. Н. Хохлова, О. Н. Марьина//Известия Оренбургского ГАУ. 2009. -№4.-С. 174-177.
Биохимический профиль крови у коров с язвенными процессами в области копытец / В.К. Якоб, Е.М. Марьин, П.М. Ляшенко, А.В. Сапожников, В.А. Ермолаев // В сборнике: Молодежь и наука XXI века. Материалы IV Международной научно-практической конференции. 2014. С. 152-161.
Васильев, Ю. Г. Ветеринарная клиническая гематология: учебное пособие для студентов вузов, обучающихся по направлению подготовки (специальности) «Ветеринария» (квалификация «Ветеринарный врач») допущено УМО вузов РФ по образованию в области зоотехнии и ветеринарии / Ю. Г. Васильев, Е. И. Трошин, А. И. Любимов. - СПб. : Лань, 2015. - 656 с.
Взаимосвязь между гемостазиологическими показателями при асептических и гнойных ранах у крупного рогатого скота / В.А.Ермолаев, В.И. Ермолаева //В сборнике: Фундаментальные и прикладные проблемы повышения продуктивности сельскохо-зяйственных животных. материалы международной научной конференции, посвященной 70-летию профессора С.А. Лапшина. Министерство общего и профессионального образования Российской Федерации, Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева; ответственный редактор С.А. Лапшин. 1998. С. 112-114.
Влияние гидрофильных мазей на гемостазиологические показатели плазмы крови у телят с гнойными ранами / П.М. Ляшенко, В.А. Ермолаев // В сборнике: Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения. Материалы V Международной научно-практической конференции. Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия; Главный редактор А.В. Дозоров; ответственные редакторы: В.А. Исайчев, И.И. Богданов. 2013. С. 104-107.
Влияние пептидных биорегуляторов на местный иммунитет при бронхопневмонии / С.И. Лютинский, О.В. Крячко, В.Х. Хавинсон, А.Л. Кожемякин //Ветеринария. 1993. № 1. С. 44-46.
Влияние тимогена на иммунную систему поросят при неспецифической бронхопневмонии / С.И. Лютинский, О.В. Крячко, В.Х. Хавинсон, С.В. Серый // Ветеринария. 1991. № 9. С. 30-32.
Гематология: учебное пособие /В.А. Ермолаев, Е.М. Марьин, А.В. Сапожников, П.М. Ляшенко, А.З. Мухитов, А.В. Киреев. –Ульяновск: Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина, 2016. – 135 с.
Динамика биохимических показателей крови при лечении гнойных кожно-мышечных ран у телят/И.С. Раксина, В.А.Ермолаев//Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии.2012. № 1. С. 95.
Динамика изменения гемостазиологических показателей при лечении гнойных ран у телят/Е.Н. Никулина, В.А. Ермолаев, П.М. Ляшенко//Известия Оренбургского госу-дарственного аграрного университета. 2012. Т. 4. № 36-1. С. 78-79.
Динамика показателей белкового обмена крови у коров, больных гнойным пододер-матитом / Е.М. Марьин, В.А. Ермолаев, О.Н. Марьина, В.В. Идогов // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. 2013. № 3 (23). С. 86-89.
Динамика показателей клинического анализа крови у ортопедически больных коров /В.А. Ермолаев, Е.М. Марьин, П.М. Ляшенко, А.В. Сапожников // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2016. № 10 (144). С. 116-122.
Ермолаев В.А. Гемостазиологические аспекты гнойной хирургической патологии крупного рогатого скота / В.А. Ермолаев // Актуальные проблемы ветеринарной хирургии: Мат. междунар. научно-методической конф. ВГАУ. -Воронеж, 1997. –С. 67-68.
Ермолаев, В.А., Никулина Е.Н. Динамика морфологических показателей крови телят с гнойными ранами / В.А. Ермолаев, Е.Н. Никулина // Материалы Международной научно-практической конференции «Кадровое и научное обеспечение инновационного развития отрасли животноводства»// Учёные записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. – Казань, 2010. – Т. 203. – С. 109-114.
Заживление инфицированных кожно-мышечных ран у собак под воздействием све-тодиодного излучения красного диапазона / А.В. Сапожников, В.А. Ермолаев, Е.М. Марьин, П.М. Ляшенко // В сборнике: Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения. Материалы V Международной научно-практической конференции. Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия; Главный редактор А.В. Дозоров; ответственные редакторы: В.А. Исайчев, И.И. Богданов. 2013. С. 137-142.
Зеленевский Н.В. Международная ветеринарная анатомическая номенклатура на латинском и русском языках. Nomina Anatomica Veterinaria/Н.В. Зеленевский.- СПб.:Лань, 2013.- 400 с.
Исследование клинических и гематологических показателей у коров с язвенными дефектами в области копытец / Е.М. Марьин, В.А. Ермолаев, В.К. Якоб, О.Н. Марьина // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. 2013. № 4 (24). С. 72-76.
Клиническая диагностика внутренних болезней животных/С.П. Ковалев, А.П. Курдеко, Е.Л. Братушкина, А.А. Волков, Ю.К. Коваленок, С.Н. Копылов, К.Х. Мурзагулов, И.А. Никулин, В.Д. Раднатаров, Г.Г. Щербаков, А.А. Эленшлегер, А.В. Яшин. – СПб.: Лань, 2016.-544 с.
Клинический ветеринарный лексикон/ В.Н. Байматов, В.М. Мешков, А.П. Жуков, В.А. Ермолаев. – М.: КолосС, 2009. - 327 с.
Коррекция системы гемостаза при болезнях пальцев у крупного рогатого скота/ П.М. Ляшенко, В.А. Ермолаев, Е.М. Марьин // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2013. № 6 (44). С. 80-81.
Крячко О.В. Применение пептидных биорегуляторов при бронхопневмонии поросят / О.В. Крячко // Ветеринария. 2003. № 11. С. 45-49.
Крячко О.В. Влияние ронколейкина на гематологические показатели у лошадей при дерматите / О.В. Крячко, О.В. Романова // Ветеринария. 2007. № 6. С. 45-48.
Крячко О.В. Нагрузочные тесты как показатель перспективности назначения имму-номодуляторов при бронхопневмонии поросят / О.В. Крячко// Ветеринария. 1999. № 3. С. 36-37.
Крячко О.В. Применение тимогена для терапии неспецифической бронхопневмонии поросят: Рекомендации/ О.В. Крячко, С.И. Лютинский. - СПб., Великие Луки: СПбГАВМ –ВГСХА.- 2002. - 18с.
Крячко О.В. Ронколейкин в качестве средства монотерапии при хронических об-структивных болезнях легких у лошадей / О.В. Крячко, О.В. Романова, Е.А. Шевченко // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2005. № 4. С. 22-23.
Крячко О.В. Системный анализ иммунобиологических показателей у поросят при острой неспецифической бронхопневмонии / О.В. Крячко, С.И.Лютинский, В.В. Томсон, С.М. Сулейманов. Великие Луки – СПб.-Воронеж, 1999.- 27 с.
Ляшенко, П.М. Влияние гидрофильных мазей на гемостазиологические показатели плазмы крови у телят с гнойными ранами/П.М. Ляшенко, В.А. Ермолаев//Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения Материалы V Международной научно-практической конференции. – Ульяновск: УГСХА им. П.А. Столыпина, 2013. -С. 104-107.
Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики/ И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И. Левченко, Г.А. Таланов, Л.А. Фролова, В.Е. Новиков В.Э.; под редакцией И.П. Кондрахин и В.Н. Сайтаниди. - М.: Колос, 2004. - 520 с.
Методы исследования системы гемостаза в ветеринарии : Методические рекомендации / В.А. Ермолаев, Б.С. Семенов, С.И. Лютинский. – Ульяновск: Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия, 1998. – 73 с.
Минеральный обмен крови у коров, больных гнойным пододерматитом / Е.М. Марьин, В.А. Ермолаев, В.В. Идогов // Вестник Ульяновской государственной сельскохо-зяйственной академии. 2016. № 1 (33). С. 111-114.
Никулина, Е.Н. Динамика гематологических показателей при лечении гнойных ран у телят / Е.Н. Никулина, П.М. Ляшенко, В.А. Ермолаев // Ветеринарная медицина. Со-временные проблемы и перспективы развития: Материалы Международной научно-практической конференции. ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ». – Саратов: ИЦ «Наука», 2010. – С. 315-317.
Никулина, Е.Н. Динамика изменения гемостазиологических показателей при лечении гнойных ран у телят/ Е.Н. Никулина, В.А. Ермолаев, П.М. Ляшенко//Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2012. Т. 4. № 36-1. С. 78-79.
Регенерационные и дисрегенерационные процессы при лечении пододерматитов у коров / В.А. Ермолаев, Е.М. Марьин, П.М. Ляшенко, А.В. Сапожников // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2016. № 12 (146). С. 120-130.
Сапожников, А.В. Клинико-морфологические показатели крови при лечении ран светодиодным излучением красного диапазона/А.В. Сапожников, И.С. Сухина, В.А. Ермолаев//«Молодёжь и наука XXI века»: Материалы II Открытой Всероссийской научно-практической конференции молодых учёных. -Ульяновск: УГСХА, 2007. -Часть 1. -С.148-151.
Симонян, Г.А. Ветеринарная гематология/ Г.А. Симонян, Ф.Ф. Хисамутдинов. - М.: Колос, 1995. — 256 с.
Состояние системы гемостаза, распространенность, этиология и некоторые иммуно-биохимические показатели крови у коров симментальской породы с болезнями копытец/ Е.М. Марьин, В.А. Ермолаев, П.М. Ляшенко, А.В. Сапожников, О.Н. Марьина// Научный вестник Технологического института - филиала ФГБОУ ВПО Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина. 2013. № 12. С. 267-273.