X Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2018

Работапосвящена определению спектра литической активности бактериофагов Providencia. Используя метод нанесения капель бактериофагов на газон исследуемой культуры авторами установлено, что изученные фаги обладали разным диапазоном литической активности, от 10^-5 до 10^-10 по Аппельману и от 10⁸ до 10⁹ по Грациа.

Введение. Литическая активность бактериофага оценивается по его способности вызывать лизис бактериальной культуры в жидких или плотных питательных средах. Активность по методу Аппельмана выражается максимальным разведением, в котором испытуемый бактериофаг проявил свое литическое действие. Более точным методом оценки литической активности бактериофага является определение количества активных корпускул фага в единице объема по методу Грациа.

Материалы и методы исследований. В качестве исследуемых культур использовали 28 (2 референс штамма и 26 выделенных нами «полевых») штаммов бактерий рода Providencia.

На поверхность МПА в чашках Петри пипеткой наносили 3-4 капли 18-24 часовой бульонной культуры исследуемых микроорганизмов. Затем равномерно распределяли по поверхности среды стерильным шпателем. Чашки ставили в термостат для подсушивания на 15-20 минут. После чего размечали чашки маркером на три сектора: на два сектора засеянного агара легким прикосновением пипетки, наносили каплю исследуемого фага; на третий сектор по центру в качестве контроля наносили стерильный МПБ, наклоняли чашку так, чтобы капли стекли, а затем инкубировали при температуре 37 °С. Выявление лизиса бактериального газона проводили через 18-24 часа.

Результаты исследований и их обсуждение. В результате проведенных исследований нами установлено, что изученные фаги обладали разным диапазоном литической активности (табл. 1). Широким диапазоном по отношению к изучаемым культурам обладают фаги F-73 УГСХА и F-17 УГСХА – 60,7 %, F-20 УГСХА, F-1 УГСХА и F-28 УГСХА – 64,3 %, F- 9 УГСХА и F-41 УГСХА – 53,6 %, F-67 УГСХА – 85,7%, F-87 УГСХА – 82,1%.

Таблица 1 – Спектр литической активности бактериофагов Providencia

№ пп	Фаги	Количество испытанных штаммов провиденций
		28
		Из них чувствительных к фагу	% лизируемых штаммов
1	F-73 УГСХА	17	60,7
2	F-45 УГСХА	5	17,9
3	F-17 УГСХА	17	60,7
4	F-20 УГСХА	18	64,3
5	F-1 УГСХА	18	64,3
6	F-70 УГСХА	4	14,3
7	F-9 УГСХА	15	53,6
8	F-7 УГСХА	5	17,9
9	F-67 УГСХА	24	85,7
10	F-87 УГСХА	23	82,1
11	F-36 УГСХА	13	46,4
12	F-38 УГСХА	5	17,9
13	F-28 УГСХА	18	64,3
14	F-41 УГСХА	15	53,6

Для дальнейшего изучения отобрали два бактериофага с наибольшим диапазоном по отношению к изучаемым культурам – фаг F-87 УГСХА, который лизировал 82,1 % и фаг F-67 УГСХА – 85,7 % штаммов бактерий рода Providencia, а в сумме фаги проявили литическое действие в отношении 96,4 % всех исследованных культур (табл. 2).

Таблица 2 – Спектр литической активности фагов F – 67 УГСХА и F – 87 УГСХА

Фаги	Кол-во исследованных штаммов культур	Общее кол-во лизируемых штаммов культур	Кол-во лизируемых штаммов культур	% лизируемых штаммов культур
F-87 УГСХА	28	27	24	85,7
F-67 УГСХА			23	82,1
Общий % лизируемых штаммов культур	96,4

Заключение. Проведенныеисследования показали, что наибольшим спектром литической активности обладали два бактериофага Providencia, это F – 67 УГСХА и F – 87 УГСХА. Данные штаммы фагов были отобраны для конструирования диагностического биопрепарата.

Библиографический список:

Список литературы

Адамс М. Бактериофаги (перевод с английского) // - М., - 1961. -521С.

Барт Н.Г. Биологические свойства бактериофагов Providencia / Н.Г. Барт, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // Актуальные вопросы аграрной науки и образования: Материалы Международной научно-практической конференции. – Ульяновск, 2009. – С. 6-8.

Барт Н.Г. Спектр литической активности бактериофагов Providencia / Н.Г. Барт, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // Актуальные вопросы аграрной науки и образования: Материалы Международной научно-практической конференции. – Ульяновск, 2013. – С. 12-15.

Васильев, Д.А. Характеристика биологических свойств бактериофагов вида Bacillussubtilis / Д.А. Васильев Д.А., Н.А. Феоктистова М.А. Юдина [и др.] //Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2011. - № 1. - С. 79-83.

Ганюшкин В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии // Учебное пособие – Ульяновск. – 1988. – С.45.

Гольдфарб Д.М. Бактериофагия.// -М.: Медгиз. -1961. – С.297.

Барт Н.Г. Исследование бактериофагов рода Providenciaна наличие в составе их генетического аппарата профага / Н.Г. Барт, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // Аграрная наука и образование нразвития: опыт, проблемы и пути их решенияа современном этапе : Материалы VII Международной научно-практической конференции. – Ульяновск, 2016. – С. 196-203.

Код для цитирования: Скопировать