X Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2018

Алкоголизм является одной из важных медико-социальных проблем современного человека. Под влиянием алкоголя в организме человека происходят глубокие и необратимые изменения. Этанол является очень токсичным и коварным ядом. Печень, поджелудочная железа, головной мозг – это те органы, которые наиболее чувствительные к действию алкоголя [4,6].

В настоящее время существует очень большое количество причин, приводящих в развитию воспаления поджелудочной железы. Одним из основных, а можно сказать главенствующим, фактором, приводящим к развитию панкреатита, является злоупотребление алкоголем.

При длительном приеме алкоголя развивается вторичный иммунный дефицит, нарушаются структурно-функциональные свойства клеточных мембран эритроцитов [1-3, 5]. Алкоголь является одним из ведущих факторов в развитии патогенеза заболеваний гепатопанкреатобилиарной системы с последующим присоединение на этом фоне различной соматической патологии, которые требуют фармакологической коррекции [6-9]. В связи с этим, очевидна целесообразность дальнейшего изучения метаболических нарушений печени при интоксикации этанолом на фоне экспериментального острого деструктивного панкреатита и разработки новых методов фармакологической коррекции.

Целью работы - изучение влияния этанола на изменение биохимической активности гепатоцитовна фоне экспериментального острого деструктивного панкреатита и их последующая фармакологическая коррекция.

Материалы и методы: Исследования проведены на здоровых крысах Вистар. Все исследования проводили в одно и то же время суток с 8 до 12 ч., содержание и забой животных проводили с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986), и согласно правилам лабораторной практики РФ (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003г.). Для получения статистически достоверных результатов группы формировали из 10-15 животных. Животных выводили из эксперимента путем передозировки средств для наркоза.

Модель хронической алкогольной интоксикации (ХАИ) получали путем введения 20% раствора этанола в дозе 3 мл/кг внутрижелудочного в течение 30 дней каждые 24 часа. На 25 день после введения этанола экспериментально вызывали острый деструктивный панкреатит (ЭОДП). Для этого перевязывали протоки левой и правой долей поджелудочной железы и стимуляцию проводили путем введения прозерина в дозе 0,2 мг/кг три раза с интервалом 60 мин.

Коррекцию изменений биохимической активности клеток печенина фоне экспериментального острого деструктивного панкреатита проводили с помощью фармакологических препаратов. Были выбраны иммуномодуляторы – гепон и глутоксим, антиоксиданты – гипоксен и мексидол, гепатопротекторы – фосфоглив и гептрал.

Расчет дозы лекарственных препаратов для введения экспериментальным животным проводили при помощи коэффициентов пересчета доз (мг/кг на мг/м²) для крысы и человека в зависимости от массы тела (FreIreich E.J., 1966).

Экспериментальных животных делили на 5 групп: 1-я группа (контрольная) - 15 здоровых животных; 2-я группа ХАИ-30; 3-я группа – ХАИ-30 и ЭОДП без введения препаратов; 4-я группа - ХАИ-30 + ЭОДП и получала гепон (5 мг/кг, внутрь, через 24 часа, №14), гипоксен (750 мг/кг, внутрь в 1% крахмальной суспензии, №14) и фосфоглив (800 мг/кг, внутрь в 1% крахмальной суспензии, №14); 5-я группа - ХАИ-30 + ЭОДП и введение глутоксим (20 мг/кг, внутримышечно, через 24 часа, №5), мексидол (50 мг/кг внутрибрюшинно, через 24 часа, №5) и гептрал (760 мг/кг, внутрибрюшинно, через 24 часа, №5). Через 24 часа после последнего введения этанола и препаратов проводили забой крыс.

Для оценки изменения биохимической активности гепатоцитов, вызванного отравлением этанолана фоне экспериментального острого деструктивного панкреатита проводили с помощью стандартных наборов реактивов. Определяли активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), гамма-глутаминтранспептидазы (ГГТП), щелочной фосфатазы (ЩФ), билирубина, протромбинового индекса (ПТИ). Концентрацию фибриногена определяли методом Рутберга. Статистическую обработку результатов исследования проводилась с помощью вычисления средних арифметических, стандартных ошибок и ошибок средних. Существенность различий средних величин оценивали по критерию Стьюдента.

Результаты исследования: У животных введение этанола в течение 30 дней по сравнению с контрольной группой изменило все исследованные показатели функциональной активности гепатоцитов: повысились ПТИ, увеличилась активность АСТ, АЛТ, ГГТП и содержание билирубина, снизилась концентрация фибриногена. У крыс с ЭОДП на фоне ХАИ-30 наблюдалось более выраженное развитие цитолитического синдрома (повышение активности АЛТ и АСТ), внутриклеточного холестаза (повышение содержания билирубина, активности ЩФ и ГГТП), токсического поражения печени по воспалительному типу при сохранении на одном уровне синдрома недостаточности синтетических процессов (снижение уровня фибриногена) и активация свертывающей системы крови (повышение ПТИ) (таблица 1). Полученные результаты свидетельствуют о выраженном нарушении функциональной активности гепатоцитов. Повышение уровня ПТИ можно расценивать как маркер системных воспалительных изменений на фоне экспериментального острого деструктивного панкреатита (таблица 1).

Введение экспериментальным животным с ЭОДП на фоне 30-дневной интоксикации этанолом сочетания гепона, гипоксена и фосфоглива корригировало, но не до уровня здоровых животных, содержание АЛТ, ЩФ, билирубина (таблица 1).

Таблица 1

Коррекция нарушений функциональной активности гепатоцитов

при ЭОДП на фоне 30-дневной ХАИ

Показатели	Единицы измерения	1	2	3	4	5
		Контроль	ХАИ-30	ЭОДП на фоне 30-дневной ХАИ
				Без введения препаратов	Введение гепона, гипоксена и фосфоглива	Введение глутоксима, мексидола и гептрала
АЛТ	Е/л	20,2±2,39	41,1±3,49*1	51,67±11,9*1	37,57±5,51*1,2	26,7±1,5*1-3
АСТ	Е/л	21,2±1,59	36,4±2,8*1	43,1±3,89*1,2	22,5±2,7*2,3	22,4±2,17*1-4
ГГТП	Е/л	4,9±0,23	7,63±1,01*1	28,83±1,56*1,2	30,4±2,52*1,2	14,8±1,5*1-3
ЩФ	Е/л	250,3±18,7	292,2±26,1	472,3±16,6*1,2	328,7±23,2*1,3	267,0±49,8*2,3
Билирубин	мкмоль/л	5,84±1,29	8,03±1,09*1	16,38±1,61*1,2	11,05±2,23*1,2	6,6±1,13*2,3
ПТИ	%	63,1±1,65	72,5±0,96*1	71,2±2,27*1	69,8±2,27*1	59,0±3,57*2,3
Фибриноген	г/л	3,22±0,08	2,34±0,25*1	2,55±0,13*1	2,85±0,24*1	3,05±0,25*2,3

Примечание: * – p=0,05, цифра рядом со звездочкой указывает, по отношению к показателю какой группы различия достоверны.

Данная фармакологическая комбинация не оказывала влияния на измененные концентрации в плазме крови ГГТП, ПТИ и фибриногена. Комбинация таких препаратов как глутоксим, мексидол и гептрал была более эффективна: уровень ЩФ, билирубина, ПТИ, фибриногена в крови приближался к показателя здоровых животных, а так же корригировало активность АЛТ, АСТ и ГГТП (таблица 1).

Выводы: Полученные нами данные позволяет заключить, у животных с ЭОДП на фоне интоксикации этанолом наблюдается развитие основных биохимических синдромов поражения печени: цитолитического, внутриклеточного холестаза, токсического поражения по воспалительному типу и недостаточности синтетических процессов.

Применение сочетания глутоксимом, мексидола и гептрала в качестве фармакологической коррекции оказалось более эффективным по сравнению с введением гепона, гипоксена и фосфоглива. Данный эффект можно объяснить тем, что все три препарата, которые вводились крысам пятой группы, обладают выраженной противовоспалительной активностью, антиоксидантными и гепатопротективными эффектами, и следовательно, они более предпочтительны в разгар развития метаболического каскада воспаления печени.

Список литературы

Белково-липидный спектр мембраны и внутриклеточный метаболизм эритроцитов при экспериментальном остром деструктивном панкреатите; коррекция нарушений производными 3-оксипиридина / Рагулина В.А., Долгарева С.А., Конопля Н.А. и др. // Вестник новых медицинских технологий. 2016. Т. 23. № 4. С. 71-78.

Бушмина О.Н., Долгарева С.А., Быстрова Н.А., Локтионова А.В. Функционально-метаболическая активность полиморфноядерных лейкоцитов периферической крови при экспериментальном остром панкреатите на фоне алкогольной интоксикации // Современные проблемы науки и образования. – 2017. – № 1.; URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=26065

Коррекция адаптивных и врожденных форм иммунного ответа при остром деструктивном панкреатите на фоне хронической алкогольной интоксикации / Бушмина О.Н., Локтионова А.В., Долгарева С.А. и др. // Медицинская иммунология. 2017. Т. 19. № S. С. 22.

Летуновский, А.В. Метаболические изменения в органах и крови при алкоголизации и экспериментальном хроническом алкогольном панкреатите / А.В. Летуновский, З.И.Микашинович // Вестник ВолгГМУ. -2011. - Выпуск 3(39). - С. 60-62.

Литвинова Е.С., Сорокин А.В., Долгарева С.А., Бушмина О.Н., Харченко А.В., Конопля Н.А. Белки и липиды мембраны эритроцитов при острой и хронической алкогольной интоксикации // Современные проблемы науки и образования. – 2017. – № 2.; URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=26351 Метаболические нарушения в условиях экспериментального острого деструктивного панкреатита и воздействия этанола / О.Н. Бушмина, С.А. Долгарева, А.Л. Локтионов, А.И. Конопля // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2015. - Т.14, №3. - С.396-403.

Морфологические особенности действия пептидных препаратов при остром отравлении этиловым спиртом в эксперименте / Д. А. Халютин, Т. С. Соловьёва, B.C. Чирский и др. // Токсикологический вестник. -2015. –Т. 133, №4. –С. 31-37.

Фармакологическая коррекция метаболических нарушений при экспериментальном деструктивном панкреатите в условиях алкогольной интоксикации / О.Н. Бушмина, А.Л. Локтионов, С.А. Долгарева и др. // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье».- 2015. - № 3. – С. 63-67.

Фармакологическая реабилитация иммунометаболических нарушений при хронической интоксикации этанолом / Бушмина О.Н., Локтионов А.Л., Долгарева С.А., Быстрова Н.А. // Аллергология и иммунология. 2016. Т. 17. № 1. С. 65-66.

Хроническая интоксикация этанолом: метаболические изменения, коррекция нарушений / А.И. Конопля, А.Л. Локтионов, В.В. Дудка, С.А. Долгарева и др. // Токсикологический вестник. - 2015. - №5. - С.25-30.

Код для цитирования: Скопировать