Целью нашего исследования явилась разработка фагосодержащего препарата для лечения отита у животных.
Оригинальность препарата обусловлена его составом, включающим композицию бактериофагов специфичных против вредоносной микрофлоры и фитокомпозицию.
Работа выполнялась на базе научно-исследовательского инновационного центра микробиологии и биотехнологии кафедры «Микробиология, вирусология, эпизоотология и ВСЭ» ФГБОУ ВО Ульяновская ГСХА. Бактериологические исследования проводили по общепринятым в микробиологии методам [1-25].
В работе нами были использованы 10 референс-штаммов пиогенных бактерий и 10 бактериофагов из коллекции кафедры МВЭиВСЭ. Бактерии и бактериофаги обладали типичными для данных видов свойствами.
Питательные среды и реактивы: мясопептонный бульон, мясопептонный агар (НПО «Питательные среды», г. Махачкала), буфер фосфатный (pH-7,6), Oxford-agar (Oxoid, Англия).
Лабораторные животные: самки кролика (n = 6) пород Серый великан и Бабочка.
Для подбора бактериофагов было изучено 6 кроликов диагнозом отит. После чего выделили чистые культуры для следующего посева.
Было установлено, что основными возбудителями отита является стафилококки. Для получения чистых линий фагов и повышения их литической активности проводили селекцию клонов бактериофагов методом пассирования выделенных изолятовна индикаторных культурах, до получения их однородной популяции [2].
В результате проведенных опытов, нами были пассированы стафилококковые фаги.
Далее были изучены основные биологические свойства подобранных бактериофагов. Определяли морфологию негативных колоний, литическую активность (Таб. 1.)
Таблица 1. Литическая активность
№ п/п |
Опытный образец фагов |
Активность по Аппельману, степень разведения |
Активность по Грациа, количество корпускул в 1 мл |
1 |
1 фаг (стафилококковый) |
5,3×±2,7× |
|
2 |
2 фаг (стафилококковый) |
1,5×±3,2× |
В результате проведенных исследований нами подобрана композиция бактериофагов и дополнительных компонентов. Установлено отсутствие местно раздражающего, аллергического действия и высокий лечебно-профилактический эффект. В качестве дополнительных компонентов для дальнейших испытаний подобрали: эфирное масло гвоздики, экстракт ромашки и мелиссы.
Библиографический список:
Бактериофаги микроорганизмов значимых для животных, растений и человека / Васильев Д.А., Золотухин С.Н., Алёшкин А.В., Барт Н.Г., Богданов И.И., Васильева Ю.Б., Викторов Д.А., Золотухин Д.С., Журавская Н.П., Калдыркаев А.И., Карамышева Н.Н., Ковалева Е.Н., Коритняк Б.М., Ляшенко Е.А., Молофеева Н.И., Пожарникова Е.Н., Пульчеровская Л.П., Семанина Е.Н., Феоктистова Н.А., Шестаков А.Г. и др. - Ульяновск, 2013
Васильев Д.А. Бактериофаги рода Bacillus / Васильев Д.А., Феоктистова Н.А., Золотухин С.Н., Алешкин А.В. / Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия; НИИЦМиБ. Ульяновск, 2013.
Васильев Д.А. Разработка методов фагоидентификации и фагодетекции бактерий Pseudomonas fluorescens / Д.А. Васильев, Д.А. Викторов, А.М. Артамонов, Т.А. Гринева, Е.А. Ляшенко / Фундаментальные исследования. 2014. № 5-1. С. 55-58