В экспериментах генерация дендритных клеток из самых различных источников: клеток-предшестве, изнников костномозгового происхождения, в том числе и бластных форм больных миелоидным лейкозом, из клеток-предшественников эмбриональной печени мышей, моноцитов периферической крови с применением разнообразных иммуномодуляторов [2, 3, 4, 5, 6, 7, 8], . Исследование проводилось на мышах линии CBA. ДК получали из клеток костного мозга мышей линии СВА, используя стандартную методику культивирования. В качестве индукторов созревания использовали рекомбинантные GM - CSF и IL- 4 по 10 нг/мл, а в качестве факторов дозревания использовали ВП-4 (50 мкг/мл), липополисахарид (ЛПС) К. pneumoniae (0,125 мкг/мл) или фактор некроза опухоли (TNF-α) для индукции созревания ДК.
Фазово-контрастная микроскопия клеток, полученных при данных условиях, выявляла звездчатые клеточные формы с характерными цитоплазматическим отростками. Клетки имели вуалевидный характер с многочисленными длинными тонкими отростками на поверхности.
Дендритные клетки, обладающие фенотипическими признаками незрелых, имели низкий уровень экспрессии костимулирующих и MHC молекул. Использование ЛПС К.pneumoniae, вакцины ВП - 4 и TNF- α в качестве индукторов созревания позволило генерировать зрелые ДК, характеризующиеся типичным фенотипом CD34-, CD38+, CD40+, CD80+, CD86+, MHC I+, MHC II+, F4/80low.
ДК обладали высокой фагоцитарной активностью по отношению к частицам латекса и условно - патогенным микроорганизмам. Способность к фагоцитозу снижалась по мере созревания клеток.
Список литературы::
Атауллаханов Р.И., Гинцбург А.Л. Иммунитет и инфекция: динамичное противостояние живых систем // Детские инфекции. 2005. Т.4. №1. С.1121.
Генерация дендритных клеток из клеток-предшественников костномозгового происхождения / Макашин А.И., Кузовлев Е.Н., Ахматова Н.К. и др. // Успехи современного естествознания. – 2005. – № 4. – С. 58-59.
Лебединская О.В. Генерация дендритных клеток с применением бактериальных иммуномодуляторов / Лебединская О.В., Ахматова Н.К. // Вестник Уральской медицинской академической науки. 2011. № 2-2 (35). С. 37-38.
Иммуномодулирующее действие препарата "профеталь" на мононуклеарные лейкоциты периферической крови человека и генерированные из них дендритные клетки / Черешнев В.А., Лебединская О.В., Родионов С.Ю. и др. // Иммунология. – 2006. – Т. 27. – № 3. – С. 132-140.
Использование нуклеината натрия для генерации зрелых дендритныхклеток / Бродовский М.Б., Лебединская Е.А., Лебединская О.В., Ахматова Н.К. // Вестник Уральской медицинской академической науки. 2011. № 2-2 (35). С. 11-12.
Морфологические особенности и иммунофенотип дендритных клеток, полученных из моноцитов периферической крови человека // Khalturina E.O., Lebedinskaya O.V., Shubina I.J et. al. // Morphology. – 2004. – № 3. – С. 89.
Особенности иммунофенотипа и функциональной активности дендритных клеток, генерированных из клеток эмбриональной печени мышей / Ахматова Н.К., Лебединская О.В., Киселевский М.В. и др. // Молекулярная медицина. – 2005. – № 2. – С. 51-56.
Сравнительная характеристика дендритных клеток, генерированных из клеток-предшественников периферической крови доноров и бластных форм костного мозга больных острым миелоидным лейкозом / Лебединская О.В., Шубина И.Ж., Добреньков К.В. и др. // Пермский медицинский журнал. – 2009. – Т. 26. – № 4. – С. 5-13.
Смольникова М.В. Клиническая иммуногенетика заболеваний человека / Смольникова М.В., Коненков В.И. // Медицинская иммунология 2001. Т. 3. № 3. С.379-38