Цель исследования – оценка влияния орхидэктомии на пролиферативный ответ спленоцитов крыс в культурах с Т-клеточным митогеном – конканавалином А.
Материалы и методы. Эксперимент выполнен на самцах нелинейных белых крыс в возрасте 4-6 месяцев. Операцию орхидэктомии проводили под эфирным наркозом общепринятым методом за 60 суток до основного эксперимента. Пролиферативный ответ клеток селезенки экспериментальных животных оценивали в 72-часовых культурах с Т- клеточным митогеном – конканавалином А (Con A, Sigma-Aldrich, C0412). Культивирование спленоцитов (5×105 клеток/лунку) проводили в 96-луночных круглодонных планшетах (TPP, Швейцария) в среде RPMI-1640 без L-глутамина с добавлением 2 мМ GlutaMAXTM, 1 мМ пирувата натрия, 1% заменимых аминокислот в MEM (все Gibco, Invitrogen), 10 мМ HEPES (Sigma-Aldrich), 10-5 М 2-меркаптоэтанола (Sigma-Aldrich) и 10% эмбриональной телячьей сыворотки (SC-Biol, Биолот). Выраженность пролиферации оценивали по включению в кислотонерастворимую фракцию метил-3Н-тимидина. Анализ результатов проводили методами описательной статистики с учетом log-нормального распределения показателей пролиферации клеток, различия между двумя группами оценивали с помощью непарного варианта t-критерия Стьюдента.
Результаты. Установлено, что после орхидэктомии развивается повышение пролиферативного ответа спленоцитов в культурах с внесением Т-клеточного митогена (ConA в концентрации 5 мкг/мл) по сравнению с аналогичными показателями интактных самцов крыс (p=0,004593). Орхидэктомия не влияет на пролиферацию спленоцитов в культурах без митогена (p>0,05).
Выводы. Таким образом, дефицит андрогенов, вызванный орхидэктомией, приводит к повышению пролиферативного ответа спленоцитов крыс на Т-клеточный митоген.
Список литературы:
Кеворков Н.Н., Шилов Ю.И., Ширшев С.В., Черешнев В.А. Гормоны репродукции в регуляции процессов иммунитета. – Екатеринбург: Наука, 1993. - 172 с. (Усл. печ. л. 11,0). ISBN 5-02-007352-0.
Шилов С.Ю., , Шилов Ю.И., Ибрагимова Л.Р. Влияние орхидэктомии и тестостерона пропионата на стрессорные изменения иммунного ответа у крыс // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2011. - № 2/1 (35). – С. 78-79.
Шилов С.Ю. Влияние орхидэктомии на стрессорные изменения количественного состава лейкоцитов и фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови самцов крыс // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2011. - № 4/1 (38). -С. 160-161.
Шилов Ю.И., Шилов С.Ю., Валиева Ю.В. Изменения нейтрофильного фагоцитоза при старении самцов и самок крыс и введении им дегидроэпиандростерона // Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2014. - № 3. - С. 47-48.
Шилов Ю.И., Шилов С.Ю., Шилов Д.Ю., Куделькина В.Г., Ибрагимова Л.Р. Половые стероиды в модуляции иммунного ответа при стрессе // Российский иммунологический журнал. - 2010. - Т. 4(13), № 4. - С. 391-391.