Исходя из этого, объектом исследования был выбран открытый водоем, находящийся в городе Барыш Ульяновской области.
Данный пруд является излюбленным местом купания в летнее время. Поэтому цель нашей работы заключалась в выяснении опасности данного объекта исследования в отношении энтеробактерий, так как они являются возбудителями кишечных инфекций.
Со сред накопления нами были выделены чистые культуры микроорганизмов (культуры №1,2), сделаны мазки, которые окрасили по Граму. В результате получили ожидаемый результат – грамотрицательные палочки. Изучив культуральные и тинкториальные свойства, мы отнесли данные микроорганизмы к семейству Enterobacteriacea. Для дальнейшей идентификации штаммов были изучены биохимические свойства, а конкретно сахаролитические и редуцирующие. Определяли подвижность методом посева уколом в полужидкий агар, спорообразование, ставили тест на фермент каталазы. Результаты биохимических исследований представлены в таблице 1.
Таблица 1 Биохимические свойства выделенных микроорганизмов
Тест |
Неизвестный микроорганизм |
|||
Культура №1 |
Культура №2 |
|||
Ферментация -глюкозы |
+ |
+ |
||
-маннита |
+ |
_ |
||
-мальтозы |
+ |
_ |
||
-сахарозы |
_ |
_ |
||
-дульцита |
+ |
_ |
||
-сорбита |
+ |
_ |
||
-ксилозы |
+ |
+ |
||
-маннозы |
+ |
+ |
||
-инозита |
_ |
_ |
||
-лактоза |
+ |
_ |
||
Использование цитрата |
+ |
+ |
||
Образование индола |
_ |
_ |
||
Подвижность |
+ |
_ |
||
Спорообразование |
_ |
_ |
||
Образование H2S |
_ |
+ |
||
Каталаза |
+ |
+ |
||
Результат |
Citrobacter freundii |
Proteus mirabilis |
Изучив подробно все полученные нами результаты, мы определили род и вид исследуемых штаммов.
Культура №1 нами была отнесена к роду Citrobacter , виду Citrobacterfreundii.
Культура № 2 нами была отнесена к роду Proteus, виду Proteusmirabilis.
Немаловажным является тест на антибиотикочувствительность, который мы определяли диско-диффузионным методом.
В стерильные чашки Петри, расположенные на горизонтальной поверхности, разливали по 15-20 мл плотной питательной среды(чаще всего 2 % агар на переваре Хоттингера, содержащий 0,11 - 0,13 % аминного азота). На поверхность застывшего и слегка подсушенного агара наливали 1 мл суспензии суточной культуры микроба-возбудителя, эквивалентную стандарту мутности 0,5 по Мак-Фарланду. Бактериальную взвесь равномерно распределяли по поверхности агара, а ее избыток удалялиградуированной пипеткой. На поверхности засеянного агара пинцетом раскладывали диски с антибиотиками – по 5 – 6 дисков на каждую чашку на расстоянии 25 мм от центра чашки [1-8].
Результаты проведенных исследований представлены в таблице 3.
Таблица 3 Результаты антибиотикочувствительности
Антибиотик |
Citrobacterfreundii |
Proteusmirabilis |
неомицин |
1,9 см |
2,2 см |
полимиксин |
1,4 см |
1,5 см |
Ципрофлоксацин |
2,5 см |
2,7 см |
рифампицилин |
0 |
1,4 см |
олеандромицин |
0 |
1,1 см |
оксациллин |
0 |
0 |
ампициллин |
1,5 см |
0 |
цефазолин |
1,0 см |
0 |
Из проведенных исследований и таблицы видно, что выделенные бактерии семейства Enterobacteriaceaобладают высокой степенью устойчивости к антибиотикам и в случае возникновения заболевания нужно будет искать другие антибактериальные препараты.
Из проведенных исследований нами были выделены два вида представителей бактерий семейства Enterobacteriacea:Citrobacterfreundiiи Proteusmirabilisобладающих высокой степенью устойчивости к антибактериальным препаратам.
Библиографический список:
Пульчеровская, Л.П. Методические указания к выполнению лабораторно-практических занятий по санитарной микробиологии: учебно-методический комплекс для студентов факультета ветеринарной медицины/ Л.П. Пульчеровская, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин.- Ульяновск : УГСХА, 2011. - 68 с.
Васильев, Д.А. Руководство к практическим занятиям по микробиологии (малый практикум): учебно-методический комплекс для студентов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии/ Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, Е.А. Корнеев.- Ульяновск : УГСХА, 2007. - 82 с.
Голубева. Энтеробактерии. Руководство для врачей/ Голубева, Килессо, Киселева. Под ред. Покровского. М.: Медицина, 1985.- 321 с.
Пульчеровская Л.П. Устойчивость бактерий рода CITROBAKTER к антиботикам/Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н., Пульчеровская Е.О. В сборнике: Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения Материалы Международной научно-практической конференции. Редколлегия: А.В. Дозоров, В.А. Исайчев, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин. 2009. С. 82-87.
Ефрейторова Е.О. Изучение основных фенотипических биологических свойств фагов бактерий рода SERRATIA/Ефрейторова Е.О., Пульчеровская Л.П., Васильев Д.А., Золотухин С.Н. Агробизнес и экология. 2015. Т. 2. № 2. С. 156-159.
Цапалина Е.В. Антибиотикорезистентность бактерий рода CITROBACTER/Цапалина Е.В., Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н.В сборнике: СТУДЕНЧЕСКИЙ НАУЧНЫЙ ФОРУМ -2014 VI Международная студенческая электронная научная конференция: Электронное издание. 2014.
Ширманова, К. Устойчивость бактерий SERRATIA MARCESCENS к антибиотикам/ Ширманова К., Ефрейторова Е.О., Пульчеровская Л.П. В сборнике: Студенческий научный форум - 2016 VIII Международная студенческая электронная научная конференция, электронное издание. 2016.
Пульчеровская, Л.П. Бактерии рода Citrobacter и их бактериофаги // Л.П.Пульчеровская, С.Н.Золотухин, Д.А.Васильев. - Вопросы микробиологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы. Сборник научных трудов, Ульяновск, - 2000. - С. 53-58.
Васильева Ю.Б. Зооантропонозные инфекции УМК/ Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов – Ульяновск: УГСХА, 2016. – 99 с.
Васильева Ю.Б. Интерактивные формы обучения студентов / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов, С.Н. Золотухин, О.Н. Марьина / Материалы научно-методической конференции профессорско-преподавательского состава академии «Инновационные технологии в высшем профессиональном образовании». - 2013. - С. 39-42.
Васильева Ю.Б. Эпизоотология и инфекционные болезни животных / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов / Учебное пособие для студентов по специальности "Ветеринарно-санитарная экспертиза" / Ульяновск, 2015.
Васильева Ю.Б. Эпизоотология и инфекционные болезни животных / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов / Учебное пособие для студентов по специальности "Ветеринария" / Ульяновск, 2015.
Мухин Е.Б. Разработка препарата на основе бактериофагов / Е.Б. Мухин, Ю.Б. Васильева, А.Г. Семанин, А.Г. Загуменнов, Е.И. Суркова / Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны. - 2015. - С. 147-148.
Найденова В.А. Инфекции: неизбежность или безответственность? / В.А. Найденова, Ю.Б. Васильева / VII Международная студенческая электронная научная конференция: «Студенческий научный форум – 2015». - Электронное издание. - 2015. - http://www.scienceforum.ru/2015/1064/10921
Нафеев А.А. Вопросы эпидемиолого-эпизоотологического надзора за зоонозными инфекциями / А.А. Нафеев, Н.И. Пелевина, Ю.Б. Васильева / Дезинфекционное дело. - 2014. - № 1. - С. 39-43.
Нафеев А.А. Зоонозные инфекции, с природной очаговостью, с позиции эпидемиологического и эпизоотологического диагнозов / А.А. Нафеев, Д.А. Васильев,, С.Н. Золотухин, Ю.Б. Васильева / Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной науки.». - 2015. - С. 50-53.
Общая эпизоотология / Ю.Б. Никульшина, А.И. Козин, Д.А. Васильев, Э.А. Афонин. - Ульяновск: УГСХА, 2007. - 209 с.
Пирюшова А.Н. Анализ эпизоотической ситуации по карантинным инфекциям / А.Н. Пирюшова, Ю.Б. Васильева / VI Международная студенческая электронная научная конференция: «Студенческий научный форум -2014». Электронное издание. 2014. -http://www.scienceforum.ru/2014/645/5113
Пирюшова А.Н. Особо опасные инфекции из-за рубежа / А.Н. Пирюшова, Ю.А. Журавкова, Ю.Б. Васильева / VII Международная студенческая электронная научная конференция: «Студенческий научный форум – 2015». - Электронное издание. - 2015. - http://www.scienceforum.ru/2015/1064/10924
Пульчеровская Л.П. Организация самостоятельной работы студентов при изучении клинических дисциплин кафедры МВЭ и ВСЭ / Л.П. Пульчеровская, Н.И. Молофеева, Ю.Б. Васильева, Д.А. Васильев / Материалы научно-методической конференции профессорско-преподавательского состава академии «Инновационные технологии в высшем профессиональном образовании». - 2015. - С. 144-146.