IX Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2017

Бактерии рода Klebsiella - возбудители многих заболеваний животных: маститы, эндометриты, расстройства кишечного тракта, сепсисы [1, 2]. Чаще всего причиной заболеваний животных являются виды K.pneumoniae, K. rhinoscleromatis, K.oxytoca. Бактерии данного рода представляют собой грамотрицательные факультативно-анаэробные бактерии. Оптимальными условиями культивирования являются температура роста 35-37˚С и время инкубирования- 20-24 часа. Непременной особенностью данного микроорганизма считают обильный рост с образованием крупных колоний на плотных питательных средах. Основным резервуаром возбудителя в животноводческих хозяйствах являются подстилочные материалы низкого качества, контаминированные корма и питьевая вода [3].

При первичной диагностике возбудителя применяют бактериологический метод и бактериоскопию. Бактериологический метод связан с высевом материала на дифференциально-диагностические питательные среды. В практике широко используются среды: Эндо, Левина, Плоскирева, ВСА [4, 5, 6]. В 1968 году King и Metzger для обнаружения и выделения патогенных энтеробактерий (включая Salmonella и Shigella) предложили селективный агар- Hektoen Enteric Agar (гектоеновый энтеро-агар)-HEA. Согласно King и Metzger, при сравнении с другими селективными средами, гектоеновый энтеро-агар обеспечивает хороший рост грамотрицательной микрофлоры, и в то же время подавляет развитие сопутствующих микроорганизмов [7, 8,9].

Цель исследований заключалась в изучении особенностей роста бактерий рода Klebsiella на питательных средах, используемых для первичной идентификации и дифференциации.

Материалы и методы исследований. Штаммы бактерий: 4 штамма Klebsiella, получены из коллекции кафедры МВЭиВСЭ (Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина). В качестве гетерогенных штаммов использовали бактерии семейства Enterobacteriaceae: E.cloaceae, S.marcescens. Посев на среды Эндо, Левина, Плоскирева и HEA суточных культур осуществляли после «подращивания» на мясопептонном бульоне в течение 24 часов. Суточную культуру каждого штамма высевали на питательную среду штрихом. Инкубировали посевы в течение 24 часов, при 37 ˚С (табл. 1) [4,6].

Результаты исследований. Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1

Характеристика роста штаммов бактерий Klebsiella на ДДС

Исследуемый штамм	Питательная среда	рН среды	Условия инкубация	Характеристика роста
K.oxytoca 1	Эндо	7,4+0,2	37 ˚С, 24 часа	Куполообразные слизистые колонии малинового цвета, лактозо(+), 2-4 мм.
	Левина	7,2+0,2	37 ˚С, 24 часа	Слизистые колонии сине-розового цвета, 1-3 мм.
	Плоскирева	7,0+0,2	37 ˚С, 24 часа	Светло- розовые колонии, 2-3 мм.
	HEA	7,5+0,2	37 ˚С, 24 часа	Колонии ярко-оранжевого цвета, круглой формы, с ровными краями, мелкие 1мм.
K.pneumoniae 244	Эндо	7,4+0,2	37 ˚С, 24 часа	Куполообразные слизистые колонии малинового цвета, лактозо(+), 3мм.
	Левина	7,2+0,2	37 ˚С, 24 часа	Слизистые колонии сине-розового цвета, 3 мм.
	Плоскирева	7,0+0,2	37 ˚С, 24 часа	Светло- розовые колонии, 2-3 мм.
	HEA	7,5+0,2	37 ˚С, 24 часа	Колонии ярко-оранжевого цвета, круглой формы, с ровными краями, мелкие 1-2мм.
K.oxytoca 24	Эндо	7,4+0,2	37 ˚С, 24 часа	Куполообразные слизистые колонии светло-розового цвета, лактозо(-), 1-2 мм.
	Левина	7,2+0,2	37 ˚С, 24 часа	Слизистые колонии сине-розового цвета, 1 мм.
	Плоскирева	7,0+0,2	37 ˚С, 24 часа	Светло- розовые колонии, 2-3 мм.
	HEA	7,5+0,2	37 ˚С, 24 часа	Колонии ярко-оранжевого цвета, круглой формы, с ровными краями, мелкие 1-2 мм.
K. pneumoniae 81	Эндо	7,4+0,2	37 ˚С, 24 часа	Куполообразные слизистые колонии малинового цвета, лактозо(+), 2-3 мм.
	Левина	7,2+0,2	37 ˚С, 24 часа	Слизистые колонии сине-розового цвета, 3-4 мм.
	Плоскирева	7,0+0,2	37 ˚С, 24 часа	Светло- розовые колонии, 3 мм.
	HEA	7,5+0,2	37 ˚С, 24 часа	Колонии ярко-оранжевого цвета, круглой формы, с ровными краями, мелкие 1-2 мм.

Выводы. Сходства в характеристиках роста гетерогенных штаммов на представленных питательных средах (форма колоний, размер колоний, цвет колоний и т.д.), позволяет заключить о неэффективности их использования при первичной идентификации бактерий рода Klebsiella. В связи с этим, точное определение принадлежности культур к клебсиеллам будет основываться на постановке целого ряда подтверждающих тестов (тесты на подвижность, сероводород, мочевину, фенилаланиндезаминазу, цитрат Симмонса, малонат, лизиндекарбоксилазу, инозит и т.д.), а, следовательно, расхода значительного времени и материальных затрат.

Библиографический список:

1. Сельников О.П. Микробиологическая и патоморфологическая характеристика клебсиеллезной инфекции // Журн. микробиол. – 1992. – Т. 54. – № 2. – С. 75 – 80.

2. Поздеев, О.К. Энтеробактерии: руководство для врачей. / О.К Поздеев, Р.В.Федоров-М.:ГЭОТАР-Медиа, 2007.-720с.

3. Садртдинова Г.Р. Агрегация бактерий Klebsiellaoxytoca и Klebsiellapneumoniae под влиянием химического фактора// Инфекция и иммунитет.2015-№.4-С.377-381.

4. Садртдинова Г.Р. Биохимические тесты для ускоренной внутриродовой детекции бактерий Klebsiella/ Г.Р.Садртдинова, Д.А.Васильев// Электронный периодический научный журнал «SCI-ARTICLE.RU».- 2015.-№17- С.11-15.

5. Садртдинова Г.Р. Биохимическая активность бактерий вида Klebsiellaoxytoca/ С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев, Г.Р.Садртдинова // Материалы VII Международной научно-практической конферен­ции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» / - Ульяновск: УГСХА, 2016. Т. III. – С.261-265.

6. Родионова А.В. Сравнительная оценка дифференциально- диагностических свойств питательных сред, используемых для выделения бактерий рода Klebsiella// Материалы IX-й Международной студенческой научной конферен­ции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехноло­гии»/ - Ульяновск: УГСХА, 2016. Т. II. - C.184-187.

7. Садртдинова Г.Р. Эффективность использования гектоенового энтеро-агара идентификации бактерий Klebsiella oxytoca//Достижения молодых ученых в ветеринарную практику: Материалы IV Международной научной конференции, посвященной 55-летию аспирантуры ФГБУ «ВНИИЗЖ», 6 декабря 2016 г. / под редакцией Д.А. Лозового. – Владимир: ФГБУ «ВНИИЗЖ», 2016. –С.134-137.

8. Садртдинова Г.Р .Повышение селективных и дифференциально- диагностических свойств плотной агаровой среды, предназначенной для выделения бактерий рода Klebsiella// Материалы IV Международной научно-практической конференции молодых ученых «Молодежь и наука XXI века».2014.-С.122-127.

9. Садртдинова Г.Р. Создание селективной среды для выделения, дифференцирования и идентификации бактерий рода Klebsiella/ С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев, Г.Р. Садртдинова// Материалы VII Международной научно-практической конферен­ции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» / - Ульяновск: УГСХА, 2016. Т. III. – С.266-269.

Код для цитирования: Скопировать