VII Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2015

Введение

Одним из ценных источников лекарственных препаратов является черника обыкновенная (Vaccinium myrtillus L.) - растение, широко используемое в народной и официальной медицине. Фармакопейным сырьем являются плоды (fructus Vaccinium myrtillus) и побеги (cormi Vaccinium myrtillus) [2]. Лекарственное растительное сырье, содержащее дубильные вещества широко применяется для получения лекарственных препаратов, обладающих вяжущим, противовоспалительным действием. Внутрь его принимают в основном при заболевании желудочно-кишечного тракта [5]. И для плодов, и для побегов черники обыкновенной недостаточно проработана стандартизация по группам действующих соединений. На данный момент в России существует фармакопейная статья только на плоды черники [1]. Согласно литературным данным, существуют различные методы количественного определения дубильных веществ в лекарственном растительном сырье, [2] среди которых одними из наиболее часто применяемых являются: спектрофотометрия и перманганатометрическое титрование.

Целью данной работы явился сравнительный анализ методов спектрофотометрии и перманганатометрии, применяемых для количественного определения дубильных веществ в побегах черники обыкновенной.

Материалы и методы

В качестве объекта исследования использовали побеги черники обыкновенной (Vaccinium myrtillus) ООО "Компания ХОРСТ" г. Барнаул.

Количественное определение содержания дубильных веществ прово-дилось методами спектрофотометрии и перманганатометрического титрования [1,3].

Спектрофотометрическое определение осуществляли по методике, описанной Разарёновой [3]: около 0,8 г (точная навеска) измельченного до размера частиц 2 мм сырья заливали 100 мл воды и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 мин с последующим 30-минутным отстаиванием при комнатной температуре. Полученное извлечение фильтровали через складчатый бумажный фильтр в мерную колбу емкостью 100 мл, доводили водой до метки.  5 мл полученного извлечения помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили до метки спиртом этиловым 70%, 2,5 мл полученного разведения помещали в мерную колбу на 25 мл и доводили до метки спиртом этиловым 70%. Измеряли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре «Shimadzu» UV 1240 mini (Япония) в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны от 274,5 до 277,5 нм (в зависимости от исходного растительного сырья) относительно спирта этилового 70%. Параллельно измеряли оптическую плотность раствора стандартного образца танина. Приготовление раствора стандартного образца танина проводили по следующей схеме: около 0,0025 г (точная навеска) стандартного образца танина, высушенного до постоянной массы при температуре 100-105°C, помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили до метки спиртом этиловым 70%, 2,5 мл полученного разведения помещали в мерную колбу на 25 мл и доводили до метки спиртом этиловым 70%. 
Суммарное содержание дубильных веществ в пересчете на воздушно-сухое сырье (X, %) определяли по формуле: 

          X=  = ,

где M_cm - масса танина, г; М_х - масса сырья, г; D_сm - оптическая плотность раствора стандартного образца танина; D_х - оптическая плотность исследуемого раствора. 

Определение дубильных веществ методом перманганатометрического титрования осуществленного по методике, рекомендованной ГФ XI [1]. Около 2 г (точная навеска) измельченного сырья, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в коническую колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят с обратным холодильником на электрической плитке с закрытой спиралью в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Жидкость охлаждают до комнатной температуры и процеживают около 100 мл в коническую колбу вместимостью 200-250 мл через вату так, чтобы частицы сырья не попали в колбу. Затем отбирают пипеткой 25 мл полученного извлечения в другую коническую колбу вместимостью 750 мл, прибавляют 500 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании раствором перманганата калия (0,02 моль/л) до золотисто - желтого окрашивания. Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл раствора перманганата калия (0,02 моль/л) соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчете на танин. Содержание дубильных веществ (X,%) в процентах в пересчете на абсолютное сухое сырье вычисляют по формуле:

          X= ,

где V - объем раствора перманганата калия (0,02 моль/л), израсходованного на титрование извлечения, в миллилитрах; V₁ - объем раствора перманганата калия (0,02 моль/л), израсходованного на титрование в контрольном опыте, в миллилитрах; 0,004157 - количество дубильных веществ, соответствующее 1 мл раствора перманганата калия (0,02 моль/л) (в пересчете на танин), в граммах; m - масса сырья в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах; 250 - общий объем извлечения в миллилитрах;

Математический анализ экспериментальных данных выполнен с применением программы Microsoft Excel 2010.

Результаты и обсуждение

В результате количественного определения содержания дубильных веществ в чернике обыкновенной спектрофотометрическим методом было установлено среднее значение 7,75±0,15%; при перманганатометрии - 13,95±0,1% (таблица 1).

Таблица 1.

Результаты определения дубильных веществ

Нами было проведено сравнение выше описанных методик с использованием методов математического анализа. Согласно критерию Стьюдента, так как t_{рассчитаное} больше, чем t_{табличное}, различие значений данных методов оказывается значимым. В тоже время сравнение по методу Фишера выявило незначимое различие дисперсии (F_{рассчитанное}<F_{табличное}), что может свидетельствовать о высокой точности данных результатов (таблица 2).

Таблица 2.

Сравнение методов определения дубильных веществ

Различие в содержании дубильных веществ количественного определения спектрофотометрией и перманганатометрическим титрованием может быть обусловлено, на наш взгляд, с одной стороны высокой окислительной способностью перманганата калия, с другой стороны сложностью установки контрольной точки титрования [4].

Список литературы

1.Государственная Фармакопея СССР ХI издания, вып. 2. Общие методы анализа Лекарственное растительное сырье Москва: "Медицина", 1990. - 399с.

2.Куркин В.А. Фармакогнозия: учебник. 2-е изд. перераб. и доп. Самара, 2007. - 1239 с.

3.Разарёнова К.Н. Жохова Е.В. Сравнительная оценка содержания дубильных веществ в некоторых видах рода GeraniumL. Флоры Северо-Запада// Химия растительного сырья. 2011 №4 C. 187-192.

4. Рудакова Ю. Г., Дмитриев А. Б., Попова О. И. Содержание дубильных веществ в спиртовом извлечении травы дубровника белого (Teucrium polium L.) и определение его антиоксидантной активности // Химия растит. сырья. - 2014. - № 1. - С. 203-208.

5. Государственный реестр лекарственных средств [http://grls.rosminzdrav.ru] база данных содержит данные о всех лекарственных средствах России- М. [2015] - режим доступа: http://grls.rosminzdrav.ru/grls.aspx (дата обращения 24.02.2015).