Зверобой продырявленный (Hypericum perforatum L., сем. Зверобойные – Hypericaceae) является одним из популярных растений отечественной и зарубежной медицины и используется в качестве противовоспалительных, бактерицидных и антидепрессантных лекарственных средств. Трава зверобоя содержит флавоноиды (рутин, гиперозид, бисапигенин), антраценпроизводные (гиперицин, псевдогиперицин), дубильные вещества, витамин С, эфирное масло и другие биологически активные соединения (БАС) [1].
В зависимости от переработки сырья может происходить потеря БАС. Поэтому как и в любом товаре, в фитопрепаратах важно не только их качество, но и упаковка, которая помогает сохранить все необходимые БАС и донести их до потребителя в неизмененном виде.
Целью работы явилась сравнительная оценка содержания дубильных веществ в фильтр-пакетах и измельченном сырье травы зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.).
Материалы и методы
Объектами исследования явились: измельченное сырье и фильтр-пакеты травы зверобоя продырявленного (ООО ПКФ "ФитоФарм", г. Анапа).
Для проведения качественного анализа дубильных веществ готовили водные извлечения: 1 г измельченного растительного сырья заливают 100 мл воды. Нагревают на водяной бане 20-30 мин, процеживают через вату и проводили следующие реакции [2, 3]:
1. К 2 мл водного извлечения изучаемого сырья прибавляли несколько капель 1% раствора желатина. Появляется муть, исчезающая при добавлении избытка желатина.
2. При добавлении к 2-3 мл извлечения 4-5 капель раствора железоаммониевых квасцов в случае гидролизуемых дубильных веществ появляется черно-синее окрашивание или осадок, а конденсированных - черно-зеленое окрашивание или осадок.
3. К 1 мл извлечения добавляют 2 мл 10%-ной уксусной кислоты и 1 мл 10%-ной средней соли ацетата свинца - гидролизуемые дубильные вещества образуют осадок. При наличии конденсированных дубильных веществ фильтрат окрасится в черно-зеленый цвет от прибавления 5 капель 1%-ных железоаммониевых квасцов и 0,1 г ацетата свинца.
Количественное определение содержания дубильных веществ проводили спектрофотометрическим методом [4].
Получение извлечения. Около 0,8 г (точная навеска) измельченного до размера частиц 2 мм сырья заливали 100 мл воды и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 мин с последующим 30-минутным отстаиванием при комнатной температуре. Полученное извлечение фильтровали через складчатый бумажный фильтр в мерную колбу емкостью 100 мл, доводили водой до метки.
Спектрофотометрическое определение дубильных веществ. 5 мл полученного извлечения помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили до метки спиртом этиловым 70%, 2,5 мл полученного разведения помещали в мерную колбу на 25 мл и доводили до метки спиртом этиловым 70%. Измеряли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре «Shimadzu» UV 1240 mini (Япония) в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны от 274,5 до 277,5 нм (в зависимости от исходного растительного сырья) относительно спирта этилового 70%. Параллельно измеряли оптическую плотность раствора стандартного образца танина.
Примечание. Приготовление раствора стандартного образца танина. Около 0,0025 г (точная навеска) стандартного образца танина, высушенного до постоянной массы при температуре 100-105 °C, помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили до метки спиртом этиловым 70%, 2,5 мл полученного разведения помещали в мерную колбу на 25 мл и доводили до метки спиртом этиловым 70%. Суммарное содержание дубильных веществ в пересчете на воздушно-сухое сырье (X, %) определяли по формуле:
X= Dх*Мст* 100* 50* 25* 2,5*100Dст* Мх* 5* 2,5* 50* 25 = Dх*Мст*2000Dст *Мх
где Мст - масса танина, г; Мх - масса сырья, г; Dст - оптическая плотность раствора стандартного образца танина; Dх - оптическая плотность исследуемого раствора.
Результаты и их обсуждение.
Качественный анализ установил, что дубильные вещества (гидролизуемые) были обнаружены во всех исследуемых образцах лекарственного растительного сырья (табл. 1.).
Таблица 1.
Результаты качественного анализа дубильных веществ в фильтр-пакетах и измельченном сырье травы зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.)
Реактив |
Результат извлечения: |
|
Измельченное сырье |
Фильтр-пакеты |
|
1% раствор желатина |
Помутнение, исчезающее при добавлении реактива |
Помутнение, исчезающее при добавлении реактива |
Раствор железоаммониевых квасцов |
Черно-синее окрашивание |
Черно-синее окрашивание |
Раствор ацетата свинца |
Белый осадок |
Белый осадок |
Количественный анализ содержания дубильных веществ спектрофотометрическим методом в траве зверобоя продырявленного показал, что наибольшее содержание дубильных веществ было в фильтр-пакетах (7,37±0,74%), по сравнению с измельченным сырьем (9,91±0,19%) (рис 1.).
Рис. 1. Содержание дубильных веществ в фильтр-пакетах и измельченном сырье травы зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.).
Обсуждая полученные результаты, необходимо отметить, что установленное различие содержания дубильных веществ обнаруженное нами в фильтр-пакетах и измельченном сырье, можно объяснить тем, что высокая полнота экстракции из лекарственного растительного сырья в фильтр-пакетах характеризуется большим соотношением сырье/экстрагент. Также большое значение имеет степень измельченности и технология измельчения, так как фильтр-пакеты (размер частиц 1 - 0,2 мм) имеют незначительное содержание частиц менее 0,18 мм, которые могут затруднять процесс экстракции [5].
Список литературы
1. Правдивцева О.Е., Куркин В.А. Сравнительное исследование химического состава надземной части некоторых видов рода Hypericum L. Химия растительного сырья. 2009. №1. С.79-82.
2. Куркин В.А. Фармакогнозия: учебник. 2-е изд. перераб. и доп. Самара, 2007. 1239 с.
3. Федосеева Л.М. Изучение дубильных веществ подземных и надземных вегетативных органов бадана толстолистного, произрастающего на Алтае. Химия растительного сырья. 2005. № 3. С. 45-50.
4. Разарёнова К.Н., Жохова Е.В. Сравнительная оценка содержания дубильных веществ в некоторых видах рода Geranium L. флоры северо-запада. Химия растительного сырья. 2011. №4. С. 187-192.
5. Фармацевтический вестник." Фильтр-пакеты: удобство и простота". 01.03.2010. [Электронный ресурс]: http://m.pharmvestnik.ru/publs/staryj-arxiv-gazety/filjtr-pakety-udobstvo-i-prostota.html