VII Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2015

Целью нашей работы было изучить зависимость секреторной активности моноцитов человека от дозы токсина сальмонелл.

Исследование секреторной активности проводилось на культурах моноцитов, выделенных из периферической крови 83 практически здоровых лиц мужского пола 20-23 лет. Идентификацию сальмонелл проводили с использованием диагностических наборов «Энтеротест 24» производства фирмы Микро-ЛА-Тест, АО «Лахема», Чехия. С целью определения ЛД50 сальмонеллезного энтеротоксина использовали супернатант суточной бульонной культуры S. cholerae-suis. Исходя из объёма супернатанта, содержащего ЛД50 сальмонеллёзного энтеротоксина, разведения энтеротоксина, использованные для стимуляции моноцитов, составили по отношению к исходному объёму 1:100-1:10-1:2-1:1 ЛД50 сальмонеллёзного энтеротоксина. Содержание ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-α определяли в супернатантах клеток, полученных после центрифугирования, иммуноферментным методом с использованием тест-систем производства фирмы R&D Systems, США. Определение ПГЕ2 и ЛТС4, циклических нуклеотидов (цАМФ и цГМФ) в моноцитах и нейтрофилах проводили радиоиммунным методом с использованием коммерческих тест-систем фирмы Amersham (Great Britain).

В результате проведенного исследования было установлено, что непосредственный контакт in vitro энтеротоксина S. cholerae-suis и моноцитов крови человека сопровождается увеличением секреции последними ряда провоспалительных медиаторов, таких как ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-α, ПГЕ2 и ЛТС4. Просекреторный эффект сальмонеллёзного энтеротоксина носит чётко выраженный дозозависимый характер. Наибольшая стимуляция секреторной функции моноцитов наблюдается при наибольшей действующей концентрации энтеротоксина, и наоборот. При разведении энтеротоксина 1:100 уровень ИЛ-1β составил в среднем 516±25 пг/мл, против 365±20 пг/мл для референтной нормы (увеличение секреции – 1,41 раза), уровень секреции ИЛ-6 увеличился относительно соответствующей референтной нормы в 1,35 раза. Для ИЛ-8 прирост секреции составил 1,47 раза, а для ФНО-α, ПГЕ2 и ЛТС4 – 1,40, 1,61 и 1,44 раза соответственно. Более высокая секреторная активность моноцитов наблюдалась при их контакте in vitro с энтеротоксином S. cholerae-suis в разведении 1:10 (уровень секреции ИЛ-1β в культурах моноцитов составил в среднем 867±44 пг/мл, что оказалось в 2,38 раза выше аналогичного показателя референтной нормы. В присутствии сальмонеллёзного энтеротоксина, разведённого 1:10, продукция ИЛ-6 возросла относительно референтной нормы в 2,92 раза, ИЛ-8 – в 2,43 раза, ФНО-α – в 2,0 раза, тогда как для ПГЕ2 и ЛТС4 подобные увеличения секреции составили 2,67 и 2,13 раза соответственно. Внесение в культуры моноцитов энтеротоксина S. cholerae-suis в разведении 1:2 вызвало увеличение секреции ИЛ-1β в 5,84 раза, ИЛ-6 – в 5,29 раза, ИЛ-8 – в 5,28 раза, ФНО-α – в 5,29 раза, ПГЕ2 и ЛТС4 – соответственно в 4,64 и в 4,14 раза против референтной нормы. Наибольшая стимуляция секреторной способности моноцитов была при их контакте in vitro с энтеротоксином S. cholerae-suis в 1:1, средний уровень секреции ИЛ-1β составил 3428±286 пг/мл, что было выше референтной нормы в 9,39 раза. Под влиянием сальмонеллёзного энтеротоксина (разведение 1:1) уровень секреции ИЛ-6 в конце эксперимента в 9,53 раза превышал показатель референтной нормы, а уровни ИЛ-8, ФНО-α, ПГЕ2 и ЛТС4 оказались выше соответствующих референтных норм в 9,32, в 11,6, в 11,18 и в 8,0 раз, соответственно.

Код для цитирования: Скопировать