VI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2014

Введение. Метод клиновидной дегидратации биологических жидкостей был  разработан В.Н. Шабалиным и С.Н. Шатохиной (2001) и  является новой диагностической технологией, дающей возможность получения информации, заложенной в особенностях структурообразования биологических жидкостей. При  дегидратации  капли биологической жидкости информация, содержащаяся в жидкой фазе, представляется в виде различных структур, доступных для наблюдения под микроскопом. Процесс  структурообразования  при дегидратации   слюнной  жидкости  у детей различного  возраста  изучен  мало.

Целью данной работы явилось изучение  морфологических особенностей структур, формирующихся  при дегидратационной самоорганизации слюны  детей  в возрастном аспекте.

Материал и методы исследования. Проведено морфологическое исследование  структурного следа (фации) слюны  у  здоровых детей, среди которых  были девочки (n=30) и мальчики (n=31). Проведена оценка фаций  в  трёх  группах  детей, различающихся по возрасту: с  3 месяцев до 3 лет (n=20), с  3 до 7 лет (n=22) и  с  7 до 11 лет (n=19). Забор слюны (1,5-2 мл) проводился утром натощак с использованием  одноразового  устройства для сбора биологической жидкости. Слюна помещалась в пластиковые пробирки и центрифугировалась 10 мин при 3000 об/мин. Надосадочная жидкость (2 мкл) наносилась на поверхность сухого чистого обезжиренного предметного стекла и в строго горизонтальном положении подвергалась  высушиванию при температуре 20^оС в течение 24 часов. Для исследования фаций использовали микроскоп (Carl Zeiss, Jenna) с видеоокуляром (5 Мп) и конечным увеличением в 70 и 140 раз.

Результаты исследования. У всех детей  в  фациях слюны  визуализировались три зоны: периферическая (ободок), промежуточная и центральная. Площадь периферической зоны увеличивалась с возрастом детей (p<0,001). У детей раннего возраста периферическая зона представляла собой узкий ободок, в котором при большом увеличении визуализировались мелкие, беспорядочно расположенные глыбки. Структура фаций слюнной жидкости у детей в возрасте старше 3  лет заметно отличалась от описанной выше. В фациях  слюны старших  детей присутствовала широкая периферическая зона, имеющая отчетливый рисунок, представленный древовидными образованиями, ориентированными продольно или поперечно к плоскости ободка и содержащими ветви первого и второго порядка. У детей старшего возраста средний размер объектов ободка увеличивался по сравнению с детьми раннего возраста (p<0,001). Энтропия ободка уменьшалась с увеличением возраста детей с достоверностью  различий  в группах детей  от 3 до 7 лет и старше 7 лет (p<0,001). Между ободком и центральной частью фации имелось широкое  пространство (промежуточная зона). Промежуточная зона фации  была четко структурирована и содержала плотно расположенные  мелкие ветвистые структуры. Энтропия промежуточной зоны детей старших групп имела достоверность различий  с детьми до 3 лет (p<0,001). Площадь центральной зоны фаций слюны детей старшей возрастной группы снижалась (p<0,001). В центральной зоне фации слюны детей раннего возраста обнаруживались свободно расположенные крупные, длинные, радиально ориентированные осевые кристаллы, с отходящими, в основном под прямыми углами, короткими отростками в виде ветвей дерева или кустарника (так называемые скелетные или дендритные кристаллы) без вторичных ответвлений.  У детей старшего возраста центр фации был насыщен линейными кристаллическими образованиями. Средний размер этих объектов значительно превышал аналогичный показатель  у детей раннего возраста (p<0,001). В центральной зоне выявлялись плотно расположенные  крупные ветвистые структуры по типу «еловых веток», содержащие один длинный осевой кристалл с ветвями второго и третьего порядка, ориентированные перпендикулярно осевому кристаллу. На каждой осевой структуре число первичных ветвей значительно превышало количество аналогичных образований, выявляемых в фациях детей раннего возраста.

Заключение. Проведённое исследование позволило выявить  морфологические особенности  структурообразования в фациях  при клиновидной дегидратации слюны у здоровых  детей  разных возрастных групп, что необходимо учитывать при проведении исследования слюны в скрининговых диагностических программах как у здоровых детей, так и для выявления патологии.   Преимуществами данного метода являются его объективность, информативность, экономичность, неинвазивность, возможность многократного забора  материала для исследования и динамического контроля.