Для эффективного культивирования бактерий в лабораторных условиях важно, чтобы питательная среда имела оптимальную концентрацию водородных ионов — уровень pH, так как только при оптимальной реакции среды, влияющей на проницаемость оболочки, микроорганизмы могут усваивать питательные вещества [1, 3, 6, 7].
Целью нашей работы явилось изучение оптимальных параметров рН среды для роста бордетелл.
Исследования проводили на базе научно-исследовательского инновационного центра микробиологии и биотехнологии кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ. В работе использовали пять лабораторных штаммовB.bronchiseptica.
Работу проводили согласно общепринятым в микробиологии методам, используя для этого соответствующие среды и реактивы [1-7, 8-14].
В результате проведенных исследований были получены следующие результаты (таблица 1).
Таблица 1 - Культивирование штаммов B.bronchiseptica при разных показателях рН
Культура |
Показатель рН |
Характеристика роста |
КОЕ |
||
ЧП № 1 |
ЧП № 2 |
ЧП № 3 |
|||
BBR 1 |
1 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
2 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
3 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
4 |
рост по штриху |
15 |
14 |
12 |
|
5 |
рост по штриху |
17 |
15 |
22 |
|
6 |
рост по штриху |
14 |
18 |
24 |
|
7 |
рост по штриху |
22 |
18 |
23 |
|
8 |
рост по штриху |
21 |
14 |
18 |
|
9 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
10 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
BBR 7 |
1 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
2 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
3 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
4 |
рост по штриху |
4 |
2 |
8 |
|
5 |
рост по штриху |
2 |
8 |
6 |
|
6 |
рост по штриху |
6 |
7 |
3 |
|
7 |
рост по штриху |
7 |
4 |
10 |
|
8 |
рост по штриху |
3 |
5 |
7 |
|
9 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
10 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
BBR 22-067 |
1 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
2 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
3 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
4 |
рост по штриху |
5 |
3 |
8 |
|
5 |
рост по штриху |
6 |
7 |
9 |
|
6 |
рост по штриху |
12 |
6 |
8 |
|
7 |
рост по штриху |
11 |
5 |
7 |
|
8 |
рост по штриху |
3 |
7 |
9 |
|
9 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
10 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
BBR 8344 |
1 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
2 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
3 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
4 |
рост по штриху |
6 |
3 |
9 |
|
5 |
рост по штриху |
5 |
7 |
9 |
|
6 |
рост по штриху |
4 |
15 |
7 |
|
7 |
рост по штриху |
7 |
12 |
7 |
|
8 |
рост по штриху |
0 |
0 |
0 |
|
9 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
10 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
BBR 214 |
1 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
2 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
3 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
4 |
рост по штриху |
5 |
7 |
2 |
|
5 |
рост по штриху |
7 |
4 |
15 |
|
6 |
рост по штриху |
13 |
6 |
8 |
|
7 |
рост по штриху |
7 |
9 |
14 |
|
8 |
рост по штриху |
4 |
7 |
9 |
|
9 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
|
10 |
роста нет |
0 |
0 |
0 |
1
2
3
4
5
3
Рис. 1. Рост референс-штаммов B.bronchiseptica на среде с рН = 3:
№1 - B.bronchiseptica 214, №2 - B.bronchiseptica 8344, №3 - B.bronchiseptica 22-067, №4 - B.bronchiseptica 7, №5 - B.bronchiseptica 1
На средах с уровнями рН от 1 до 3 регистрировали отсутствие роста всех лабораторных штаммов B.bronchiseptica. На средах просматривались только штрихи от бактериологической петли (рис. 1).
1
2
3
4
5
Рис. 2. Рост референс-штаммов B.bronchiseptica, на среде с рН = 4:
№1 - B.bronchiseptica 8344, №2 - B.bronchiseptica 214, №3 - B.bronchiseptica 1, №4 – B.bronchiseptica 22-067, №5 - B.bronchiseptica 7
На средах с уровнями рН от 4 до 7 наблюдали хороший рост всех штаммов B.bronchiseptica (рис.2).
Рис. 3. Рост референс-штаммов B.bronchiseptica на среде с рН = 8:
№1 - B.bronchiseptica 8344, №2 - B.bronchiseptica 214, №3 - B.bronchiseptica 1, №4 – B.bronchiseptica 22-067, №5 - B.bronchiseptica 7
На средах с рН 8 наблюдали хороший рост четырех штаммов бордетелли отсутствие роста штамма B.bronchiseptica 8344(рис.3).
Рис. 4. Рост референс-штаммов B.bronchiseptica 1, 7, 214, 22-067, 8344 на среде с рН = 9.
При повышении уровня рН до 9 и более регистрировали отсутствие роста всех исследуемых штаммов. Видимые на рисунке светлые вкрапления в среде – это изменения компонентов среды из-за высокого рН (рис. 4).
Таким образом, штаммы B.bronchiseptica 1, 7, 214, 22-067 показали хороший рост в диапазоне рН среды от 4 до 8, штамм 8344 - при рН от 4 до 7. Рост всех исследуемых штаммов бордетелл отсутствовал при рН от 1 до 3-х и от 9 до 10.
Библиографический список:
Васильев Д.А. Выделение и идентификация Bordetella bronchiseptica от животных / Д.А. Васильев, А.В. Мастиленко, Д.Г. Сверкалова, Ю.Б. Васильева // Естественные и технические науки. – 2010. - № 5. – С. 233-235.
Васильев Д.А. Изучение основных биологических свойств бактериофагов Bordetella bronchiseptica, выделенных методом индукции / Д.А. Васильев, Е.Н. Семанина, С.Н. Золотухин, Ю.Б. Васильева [и др.] // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2011. - №1 (13). - С. 59–62.
Васильева Ю.Б. Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики бордетеллёза // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 4; URL: http://www.science-education.ru/110-9751.
Васильева Ю.Б. Особенности биологии бактерий вида Bordetella bronchiseptica // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 4; URL: http://www.science-education.ru/110-9927.
Васильева Ю.Б. Новая тест-система идентификации возбудителя бордетеллёза – Bordetella bronchiseptica // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 10. – Ч.1.
Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований / А.С. Лабинская - М.: Медицина, 1978. – 394с.
Никульшина Ю.Б. Разработка методов индикации и идентификации Bordetella bronchiseptica, выделенных от домашних животных / Ю.Б. Никульшина, Д.Г. Сверкалова, Е.Н. Никулина // Ветеринарная патология. - 2007. - №4. (23). –– С. 103-106.
Семанин А.Г., Скорик А.С., Суркова Е.И., Васильева Ю.Б., Марьина О.Н. АНАЛИЗ РАСПРОСТРАНЕНИЯ БОРДЕТЕЛЛЕЗА ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ // Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» URL: www.scienceforum.ru/2014/645/2957
Суркова Е.И., Скорик А.С., Семанин А.Г., Васильева Ю.Б., Мастиленко А.В. УСТОЙЧИВОСТЬ БАКТЕРИЙ BORDETELLA BRONCHISEPTICA К НЕКОТОРЫМ ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ // Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» URL: www.scienceforum.ru/2014/645/2954
Голоушкина А.С., Зимукова С.Э., Феоктистова Н.А., Лыдина М.А., Васильев Д.А. РАЗРАБОТКА ФАГОВОГО БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ПРОТЕЙНОЙ ИНФЕКЦИИ // Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» URL: www.scienceforum.ru/2014/645/2960 (дата обращения: 21.01.2014).
Пирюшова А.Н., Журавкова Ю.А., Феоктистова Н.А., Васильев Д.А. ФАГОИДЕНТИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ BACILLUS SUBTILIS // Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» URL: www.scienceforum.ru/2014/645/2964 (дата обращения: 21.01.2014).
Галушко И.С., Еремина Т.А., Барт Н.Г. ВЫДЕЛЕНИЕ ФАГОВ БАКТЕРИЙ РОДА PROVIDENCIA ИЗ ОБЪЕКТОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ И ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА // Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» URL: www.scienceforum.ru/2014/666/2961 (дата обращения: 21.01.2014).
Воротников А.П., Молофеева Н.И. ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БАКТЕРИОФАГОВ ESCHERICHIA COLI О157 // Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» URL: www.scienceforum.ru/2014/666/2967 (дата обращения: 21.01.2014).
Кудряшова К.В., Феоктистова Н.А., Васильев Д.А. МЕТОДИКА ВЫДЕЛЕНИЯ ФИТОПАТОГЕННЫХ БАЦИЛЛ // Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» URL: www.scienceforum.ru/2014/666/2963 (дата обращения: 21.01.2014).