Во второй половине прошлого столетия было показано, что нейроэндокринная регулирующая система тесно сотрудничает с иммунной системой в процессах регуляции гомеостатических функций. Наличие рецепторов к нейромедиаторам (гистамину, катехоламинам, серотонину, ацетилхолину) на лимфоидных клетках доказывает подчиненность иммунной системы нейрогуморальному воздействию [1]. В частности, гормон поджелудочной железы инсулин способен изменять содержание биогенных аминов в лимфатических узлах, тимусе, селезенке [4]. Есть данные о направленности изменения уровня гистамина (Г) в структурах лимфатических узлов под действием этого гормона [2]. Однако влияние инсулина на содержание катехоламинов (КА), корреляционные связи между биоаминсодержащими структурами недостаточно изучены.
В связи с этим мы считаем необходимым дать характеристику обеспеченности структур лимфатических узлов катехоламинами в норме и при введении инсулина.
Нами были поставлены следующие задачи: 1) определить количественное содержание КА в биоаминсодержащих структурах брыжеечных лимфатических узлов; 2) изучить корреляционные связи между катехоламинсодержащими структурами; 3)изучить уровень корреляции между биоаминами в паре КА-серотонин (СТ) и в паре КА-гистамин;
Методы исследования.Исследования проведены на 22 белых беспородных мышах-самцах массой 40-50 г. Эксперимент заключался во введении животным препарата «Актрапид» - человеческого, генно-инженерного инсулина короткого действия. Животные при этом были разделены на 2 группы: интактные(10) и подопытные(12), которым внутримышечно вводили 75 ЕД препарата. Материал для исследования (брыжеечные лимфатические узлы) забирали на 3-и, 7-е и 14-е сутки введения препарата. Интактные мыши служили контролем.
Для выявления моноаминсодержащих структур (С и КА) пользовались люминесцентно-гистохимическим методом Фалька-Хилларпа в модификации Е. М. Крохиной (Крохина Е. М., Александров П. Н.,1969); методом Кросса, Эвена, Роста(Cross, Ewen, Rost, 1971) определяли гистаминсодержащие структуры. Цитоспектрофлуориметрией определяли количественное содержание катехоламинов с помощью люминесцентного микроскопа ЛЮМАМ-4 с дополнительной насадкой ФМЕЛ-1А. Показания снимали с табло усилителя в условных единицах (у.е.) Полученные цифровые данные обрабатывали статистически с использованием табличного редактора Excel из пакета прикладных программ Microsoft Office 2003. Корреляционный анализ проводили для установления корреляционных взаимосвязей между биоаминами в каждой структуре лимфатического узла.
Собственные результаты и обсуждение. Содержание КА после введения инсулина изменяется следующим образом (Таблица 1): во внутрифолликулярных клетках увеличивается на всех сроках введения инсулина по сравнении с контрольным значением. Это можно рассматривать как активацию их пролиферации, так как КА стимулирующе действуют на иммунные процессы. В береговых клетках уровень КА подвержен волнообразным колебаниям. В микроокружении береговых клеток, в паракортикальных клетках и микроокружении паракортикальных клеток содержание КА на всех сроках эксперимента ниже, чем у интактных животных.
Таблица 1.
Уровень КА в структурах лимфатического узла в норме и при введении инсулина
|   
			 контроль  |   
			  
			 3 дня  |   
			  
			 7 дней  |   
			  
			 14 дней  |  
		|
|   
			 Внутрифолликулярные клетки  |   
			  
			 3,74±0,02  |   
			  
			 7,6±0,17  |   
			  
			 6,49±0,05  |   
			  
			 7,09±0,05  |  
		
|   
			 Микроокружение внутрифолликулярных клеток  |   
			  
			 2,7±0,03  |   
			  
			 2,45±0,27  |   
			  
			 1,94±0,02  |   
			  
			 5,71±0,07  |  
		
|   
			 Береговые клетки  |   
			  
			 5,52±0,04  |   
			  
			 6,3±0,11  |   
			  
			 2,6±0,03  |   
			  
			 7,34±0,06  |  
		
|   
			 Микроокружение береговых клеток  |   
			  
			 3,26±0,03  |   
			  
			 2,83±0,02  |   
			  
			 2,04±0,02  |   
			  
			 1,85±0,02  |  
		
|   
			 Паракортикальные клетки  |   
			  
			 6,06±0,05  |   
			  
			 3,49±0,04  |   
			  
			 1,38±0,02  |   
			  
			 3,87±0,04  |  
		
|   
			 Микроокружение паракортикальных клеток  |   
			  
			 6,31±0,03  |   
			  
			 1,17±0,02  |   
			  
			 1,33±0,03  |   
			  
			 2,56±0,06  |  
		
Исследование корреляционных взаимосвязей между КА-содержащими структурами брыжеечных лимфатических узлов (Таблица 2) показывает высокий уровень корреляции во всех исследуемых структурах на 14-е сутки введения препарата. Это свидетельствует о согласованном одновременном получении катехоламинов обоими членами пары[3].
Таблица 2.
Коэффициент корреляции между КА-содержащими структурами лимфатического узла в норме и при введении инсулина.
|   
			 норма  |   
			  
			 3дня  |   
			  
			 7дней  |   
			  
			 14дней  |  
		|
|   
			 Внутрифолликулярные клетки и их микроокружение  |   
			  
			 0,19  |   
			  
			 0,23  |   
			  
			 0,04  |   
			  
			 0,85*  |  
		
|   
			 Береговые клетки и их микроокружение  |   
			  
			 -0,13  |   
			  
			 0,39  |   
			  
			 -0,43  |   
			  
			 0,62*  |  
		
|   
			 Паракортикальные клетки и их микроокружение  |   
			  
			 -0,52  |   
			  
			 0,36  |   
			  
			 -0,44  |   
			  
			 0,55*  |  
		
При изучении коэффициента корреляции между биоаминами в паре СТ-КА (Таблица 3) у контрольных животных прослеживается средний уровень корреляционной связи во внутрифолликулярных клетках. На 3-и сутки проведения эксперимента сильная корреляционная связь наблюдается в береговых клетках. Это говорит о том, что эти два биоамина действуют однонаправленно. На 14-е сутки уровень корреляционной связи в береговых клетках принимает высокое отрицательное значение, то есть происходит трансформация корреляционной связи в паре СТ-КА. Сильная отрицательная корреляция может указывать на истощение структур или на их антагонистическое отношение друг к другу.
Таблица 3.
Коэффициент корреляции между биоаминами в паре катехоламины-серотонин в структурах лимфатического узла у интактных животных и при введении инсулина.
|   
			 норма  |   
			  
			 3 дня  |   
			  
			 7 дней  |   
			  
			 14 дней  |  
		|
|   
			 Внутрифолликулярные клетки  |   
			  
			 -0,56*  |   
			  
			 0,28  |   
			  
			 0,47  |   
			  
			 0,21  |  
		
|   
			 Береговые клетки  |   
			  
			 0,36  |   
			  
			 0,68*  |   
			  
			 -0,33  |   
			  
			 -0,63*  |  
		
|   
			 Паракортикальные клетки  |   
			  
			 -0,26  |   
			  
			 0,50  |   
			  
			 -0,33  |   
			  
			 0,17  |  
		
|   
			 *-достоверность P  | 
		||||