Во второй половине прошлого столетия было показано, что нейроэндокринная регулирующая система тесно сотрудничает с иммунной системой в процессах регуляции гомеостатических функций. Наличие рецепторов к нейромедиаторам (гистамину, катехоламинам, серотонину, ацетилхолину) на лимфоидных клетках доказывает подчиненность иммунной системы нейрогуморальному воздействию [1]. В частности, гормон поджелудочной железы инсулин способен изменять содержание биогенных аминов в лимфатических узлах, тимусе, селезенке [4]. Есть данные о направленности изменения уровня гистамина (Г) в структурах лимфатических узлов под действием этого гормона [2]. Однако влияние инсулина на содержание катехоламинов (КА), корреляционные связи между биоаминсодержащими структурами недостаточно изучены.
В связи с этим мы считаем необходимым дать характеристику обеспеченности структур лимфатических узлов катехоламинами в норме и при введении инсулина.
Нами были поставлены следующие задачи: 1) определить количественное содержание КА в биоаминсодержащих структурах брыжеечных лимфатических узлов; 2) изучить корреляционные связи между катехоламинсодержащими структурами; 3)изучить уровень корреляции между биоаминами в паре КА-серотонин (СТ) и в паре КА-гистамин;
Методы исследования.Исследования проведены на 22 белых беспородных мышах-самцах массой 40-50 г. Эксперимент заключался во введении животным препарата «Актрапид» - человеческого, генно-инженерного инсулина короткого действия. Животные при этом были разделены на 2 группы: интактные(10) и подопытные(12), которым внутримышечно вводили 75 ЕД препарата. Материал для исследования (брыжеечные лимфатические узлы) забирали на 3-и, 7-е и 14-е сутки введения препарата. Интактные мыши служили контролем.
Для выявления моноаминсодержащих структур (С и КА) пользовались люминесцентно-гистохимическим методом Фалька-Хилларпа в модификации Е. М. Крохиной (Крохина Е. М., Александров П. Н.,1969); методом Кросса, Эвена, Роста(Cross, Ewen, Rost, 1971) определяли гистаминсодержащие структуры. Цитоспектрофлуориметрией определяли количественное содержание катехоламинов с помощью люминесцентного микроскопа ЛЮМАМ-4 с дополнительной насадкой ФМЕЛ-1А. Показания снимали с табло усилителя в условных единицах (у.е.) Полученные цифровые данные обрабатывали статистически с использованием табличного редактора Excel из пакета прикладных программ Microsoft Office 2003. Корреляционный анализ проводили для установления корреляционных взаимосвязей между биоаминами в каждой структуре лимфатического узла.
Собственные результаты и обсуждение. Содержание КА после введения инсулина изменяется следующим образом (Таблица 1): во внутрифолликулярных клетках увеличивается на всех сроках введения инсулина по сравнении с контрольным значением. Это можно рассматривать как активацию их пролиферации, так как КА стимулирующе действуют на иммунные процессы. В береговых клетках уровень КА подвержен волнообразным колебаниям. В микроокружении береговых клеток, в паракортикальных клетках и микроокружении паракортикальных клеток содержание КА на всех сроках эксперимента ниже, чем у интактных животных.
Таблица 1.
Уровень КА в структурах лимфатического узла в норме и при введении инсулина
контроль |
3 дня |
7 дней |
14 дней |
|
Внутрифолликулярные клетки |
3,74±0,02 |
7,6±0,17 |
6,49±0,05 |
7,09±0,05 |
Микроокружение внутрифолликулярных клеток |
2,7±0,03 |
2,45±0,27 |
1,94±0,02 |
5,71±0,07 |
Береговые клетки |
5,52±0,04 |
6,3±0,11 |
2,6±0,03 |
7,34±0,06 |
Микроокружение береговых клеток |
3,26±0,03 |
2,83±0,02 |
2,04±0,02 |
1,85±0,02 |
Паракортикальные клетки |
6,06±0,05 |
3,49±0,04 |
1,38±0,02 |
3,87±0,04 |
Микроокружение паракортикальных клеток |
6,31±0,03 |
1,17±0,02 |
1,33±0,03 |
2,56±0,06 |
Исследование корреляционных взаимосвязей между КА-содержащими структурами брыжеечных лимфатических узлов (Таблица 2) показывает высокий уровень корреляции во всех исследуемых структурах на 14-е сутки введения препарата. Это свидетельствует о согласованном одновременном получении катехоламинов обоими членами пары[3].
Таблица 2.
Коэффициент корреляции между КА-содержащими структурами лимфатического узла в норме и при введении инсулина.
норма |
3дня |
7дней |
14дней |
|
Внутрифолликулярные клетки и их микроокружение |
0,19 |
0,23 |
0,04 |
0,85* |
Береговые клетки и их микроокружение |
-0,13 |
0,39 |
-0,43 |
0,62* |
Паракортикальные клетки и их микроокружение |
-0,52 |
0,36 |
-0,44 |
0,55* |
При изучении коэффициента корреляции между биоаминами в паре СТ-КА (Таблица 3) у контрольных животных прослеживается средний уровень корреляционной связи во внутрифолликулярных клетках. На 3-и сутки проведения эксперимента сильная корреляционная связь наблюдается в береговых клетках. Это говорит о том, что эти два биоамина действуют однонаправленно. На 14-е сутки уровень корреляционной связи в береговых клетках принимает высокое отрицательное значение, то есть происходит трансформация корреляционной связи в паре СТ-КА. Сильная отрицательная корреляция может указывать на истощение структур или на их антагонистическое отношение друг к другу.
Таблица 3.
Коэффициент корреляции между биоаминами в паре катехоламины-серотонин в структурах лимфатического узла у интактных животных и при введении инсулина.
норма |
3 дня |
7 дней |
14 дней |
|
Внутрифолликулярные клетки |
-0,56* |
0,28 |
0,47 |
0,21 |
Береговые клетки |
0,36 |
0,68* |
-0,33 |
-0,63* |
Паракортикальные клетки |
-0,26 |
0,50 |
-0,33 |
0,17 |
*-достоверность P |