VI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2014

За последние 30 лет доля сердечно-сосудистых заболеваний в структуре смертности населения России превышает 50% всех случаев смерти, а ведущее место среди данной патологии принадлежит артериальной гипертонии [3].

Артериальная гипертензия как патологическое состояние сопровождается увеличением сердечного выброса и повышением периферического сопротивления. Это включает вазоконстрикцию в ответ на давление и нейрогуморальную стимуляцию с последующим структурным уменьшением просвета сосудов вследствие утолщения их медиального слоя – ремоделирование, кроме этого претерпевает изменение цитоархитектоника клеточной мембраны клеток крови, в первую очередь это относится к эритроцитам [1, 2].

Цель исследования – установление нарушений состояния мембраны красных клеток крови у пациентов с гипертонической болезнью в зависимости от стадии заболевания.

Материалы и методы

В работе представлены данные обследования и лечения на базе ОБУЗ «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи» г. Курска 97 пациентов с верифицированным, согласно рекомендациям ВОЗ/МОГ (1999), диагнозом гипертоническая болезнь I, II, III стадий, основанном на данных комплекса клинико-инструментальных методов обследования. Ведущим критерием включения в исследование больных ЭАГ было наличие у них стойкой ночной гипертензии и «non-dipper» типа суточной кривой по результатам двойного СМАД для исключения влияния случайных факторов на профиль АД. Все больные находились на безнит-ратной диете.

Группу контроля составили 28 здоровых доноров (11 женщин и 17 мужчин), средний возраст которых составил 35,2±2,1 лет. Критерии включения пациентов в исследование: мужчины и женщины в возрасте 30-60 лет; артериальная гипертензия I, II или III стадии с анамнезом заболевания более 3 лет.

Электрофорез мембранных белков эритроцитов проводили в присутствии додецилсульфата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля, кроме этого определяли сорбционную способность эритроцитов (ССЭ) и сорбционную емкость их гликокаликса (СЕГ)[7, 8].

Эритроциты отмывали по методике E. Beutler [9], а мембраны эритроцитов получали методом G.T. Dodge [10]. Электрофорез проводили в присутствии додецилсульфата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K. Laemmli [12]. Белки окрашивали Кумаси голубым R-250 по модифицированной методике G. Fairbanks [111].

Все пациенты получали стандартную фармакотерапию: с I стадией гипертонической болезни монотерапию лизиноприлом, со II стадией – дополнительно гипохлортиазид, с III стадией получали помимо лизиноприла, гипохлортиазида еще и амлодипин. Тогда как 49 пациентов дополнительно к стандартной фармакотерапии получали милдронат (750 мг/сут в/в до 10 дней затем внутрь до 8 недель).

Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя параметрические и непараметрические методы [4].

Результаты

У пациентов с гипертонической болезнью I ст. в мембране красных клеток крови снижен уровень подфракций спектрина, анкирина и повышен уровень белка полосы 4.1 и дематина, что привело к снижению у данной категории пациентов СЕГ и ССЭ (табл. 1).

Таблица 1

Представительность белков и сорбционные свойств мембраны эритроцитов

у больных гипертонической болезнью (М±m)

Показатели

Здоровые доноры

Гипертоническая болезнь

I стадия

II стадия

III стадия

1

2

3

4

α-спектрин

114,3±8,8

98,2±4,7^*1

101,1±5,1^*1

76,2±3,91^*1-3

β-спектрин

106,6±7,6

91,8±3,81^*1

75,3±4,72^*1,2

65,7±2,19^*1-3

Анкирин

113,3±8,2

62,6±4,5^*1

70,2±5,82^*1

39,5±2,81^*1-3

Анионтранспортный белок

189,6±6,4

188,6±9,31

239,6±17,8^*1,2

226,2±10,5^*1,2

Белок полосы 4.1

43,3±4,1

74,2±3,34^*1

53,2±3,82^*1,2

92,1±8,4^*1-3

Паллидин

56,6±3,1

61,4±3,73

46,5±2,14^*1,2

77,1±4,3^*1-3

Белок полосы 4.5

98,2±7,5

89,2±7,7

126,6±9,05^*1,2

78,9±6,35^*1-3

Дематин

20,1±2,1

36,8±2,82^*1

22,1±1,87^*2

50,1±4,8^*1-3

Актин

102,1±8,9

108,1±7,41

110,3±8,26

136,2±11,7^*1-3

Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа

37,8±2,6

39,8±2,81

21,2±1,93^*1,2

42,4±4,81^*3

Тропомиозин

68,8±4,6

63,7±3,06

69,5±4,2

75,1±5,03^*2

Глутатион-S-трансфераза

49,3±4,1

55,5±3,02

46,3±3,82^*2

58,9±4,51^*1,3

СЕГ

1,42±0,1

1,13±0,12^*1

1,29±0,08^*1,2

1,25±0,09^*1,2

ССЭ

32,8±1,2

22,1±2,41^*1

21,3±1,13^*1

20,2±1,72^*1

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (p < 0,05); цифры рядом со звездочкой – по отношению к показателям какой группы эти различия.

У больных с гипертонической болезнью II ст. в эритроцитарной мембране, по сравнению с предыдущей группой больных, в большей стадии снижена представительность β-спектрина, дополнительно возрастает уровень анионтранспортного белка, белка полосы 4.5 и снижается представительность паллидина и глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (табл. 1).

У пациентов с III ст. гипертонической болезни резко снижен уровень в мембране эритроцитов подфракций анкирина, спектрина, белка полосы 4.5 и повышен уровень белка полосы 4.1, актина и дематина (табл. 1).

Нами был определен уровень нейтральных липидов и фосфолипидов в мембране красных клеток крови. Так, при I ст. гипертонической болезни возрастает уровень лизофосфатидилхолина, сфингимиелина, фосфатидилинозитола и холестрина и снижается представительность триглицеридов, эфиров холестерина и фосфатидилхолина, тогда как у больных с II ст. дополнительно повышен уровень моно- и диглицеридов и снижена представительность фосфатидилинозитола (табл. 2).

Таблица 2

Представительность липидов в мембране эритроцитов

у больных гипертонической болезнью (М±m)

Показатели

Здоровые доноры

Гипертоническая болезнь

I стадия

II стадия

III стадия

1

2

3

4

Лизофосфатидилхолин

5,38±0,17

6,4±0,11^*1

7,7±0,23^*1,2

10,1±0,48^*1-3

Сфингомиелин

11,02±0,52

14,1±0,61^*1

11,2±0,41^*2

9,9±0,22^*1-3

Фосфатидилинозитол

19,7±0,69

22,1±0,51^*1

23,6±1,22^*1

17,4±1,1^*1-3

Фосфатидилхолин

23,01±0,71

19,4±0,68^*1

18,8±0,91^*1

17,6±0,77^*1,2

Фосфатидилэтаноламин

23,45±0,97

23,3±1,24

19,6±0,43^*1,2

20,0±0,87^*1,2

Холестерин

47,79±1,38

54,2±2,17^*1

54,9±2,0^*1

59,7±2,33^*1-3

Моно и диглицериды

9,55±0,49

10,2±0,31

11,5±0,48^*1,2

11,5±0,52^*1,2

Свободные жирные кислоты

2,98±0,17

3,0±0,13

3,4±0,31

3,2±0,11

Триглицериды

14,48±0,67

12,7±0,81^*1

14,8±1,2^*2

12,4±1,33^*1,3

Эфиры холестерина

46,19±1,62

34,6±2,4^*1

34,6±3,3^*1

31,2±2,88^*1

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (p < 0,05); цифры рядом со звездочкой – по отношению к показателям какой группы эти различия.

У больных гипертонической болезнью III ст. в эритроцитарной мембране выраженность изменений представительности липидов максимальна: в большей степени возросла представительность лизофосфатидилхолина и холестерина и снизился уровень сфингимиелинга и фосфатидилхолина (табл. 2).

Обсуждение

Таким образом, исходя из функций интегральных и периферических белков мембраны эритроцитов, можно заключить, что выявленные изменения у больных гипертонической болезнью направлены на уменьшение прочности и деформируемости эритроцитарной мембраны (снижение уровня анкирина, спектрина), снижение общей сорбционной способности эритроцитов и их гликокаликса и повышение их метаболической активности (повышение уровня анионтранспортного белка), что ускоряет процессы старения красных клеток крови, тогда как у пациентов с гипертонической болезнью III ст. данные изменения более выражены [1, 3].

У больных гипертонической болезнью в мембране эритроцитов выявлены различные изменения в липидном спектре, что в свою очередь сказывается и на организации мембраны в целом. Так, повышенный уровень холестерина уменьшает подвижность жирных кислот, снижает латеральную диффузию липидов и белков, изменяет функцию последних, снижение сфингомиелина при III cтадии обуславливает снижение микровязкости липидной фазы мембраны, тогда как низкий уровень фосфатидилхолина снижает проницаемость мембраны и уменьшает метаболизм холестерина [3, 6].

Поэтому очевидна необходимость коррекции у больных гипертонической болезнью нарушений структурно-функциональных свойств красных клеток крови, которые могут быть достигнуты использованием препаратов, обладающих антиоксидантной активностью.

Список литературы

1. Белов Ю.В., Ваксин В.А. Современные представления о постинфарктном ремоделировании левого желудочка // Рус. мед. журн. – 2002. – № 2. – С. 5-10.

2. Васюк Ю.А., Хаджеганова А.Б., Ющук Е.Н. Гибернирующий миокард и процессы постинфарктного ремоделирования левого желудочка // Сердечная недостаточность. – 2001 . – № 4 . – С. 180-186.

3. Кодин А.В., Березин М.В., Березина А.М. и др. Нарушения реологических свойств эритроцитов у больных стенокардией напряжения III функционального класса в сочетании с гипертонической болезнью и их коррекция // Вестник Ивановской медицинской академии. – 2008. - Т. 13, №1-2. – С. 40-45.

4. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. – М.: Высш. школа, 1980.– 293с.

5. Маколкин В.И. Состояние микроциркуляции при гипертонической болезни // Кардиология. – 2003. – № 5. – С. 60-67.

6. Рязанцева, Н.В. Типовые нарушения молекулярной организации мембраны эритроцита при соматической и психической патологии / Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий // Успехи физиологических наук. – 2004. – Т. 1, № 1. – С. 53–65.

7. Семко Г.А. Структурно-функциональные изменения мембран и внешних примембранных слоев эритроцитов при гиперэпидермопоэзе // Украинский биохимический журнал. – 1998. – Т. 70, № 3. – С. 113–118.

8. Тогайбаев А.А, Кургузкин А.В., Рикун И.В. Способ диагностики эндогенной интоксикации // Лабораторное дело. – 1988. – № 9. – С. 22–24.7. Beutler E. How do red cell enzymes age a new perspective // Brit. J. Haemat. – 1985. – V. 61. – P. 377-384.

9. Beutler E. How do red cell enzymes age a new perspective // Brit. J. Haemat. – 1985. – V. 61. – P. 377-384.

10. Dodge G.T., Mitchell C., Hanahan D.J. The preparation and chemical characteristics of hemoglobin free ghosts of human eryrhrocytes // Arch. Biochem. Biophys. – 1963. – V. 100. – P. 119-130.

11. Fairbanks G., Steck T. Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane // Biochemistry. – 1971. – V. 10. – P. 2606-2616.

12. Laemli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterophage T4 // Nature. – 1970. – V. 227. – P. 680.

13. Lévy, B. I. The importance of microcirculation and tissue perfusion in hypertension / B. I. Lévy // Curr. Med. Res. Opin. – 2005. – Vol. 21. – N 5. – P. 1-6.

Код для цитирования: Скопировать