СРАВНИТЕЛЬНЫЙ ФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ ТЕСТ IN VIVO НА ВЫЯВЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ - Студенческий научный форум

V Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2013

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ ФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ ТЕСТ IN VIVO НА ВЫЯВЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ

Аронов Д.А., Миронов А.В., Ахвледиани С.Д., Свирщевская Е.В. 4, Моисеева Е.В. 4, Аронов Д.А., Миронов А.В.
4Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова
 Комментарии
Текст работы размещён без изображений и формул.
Полная версия работы доступна во вкладке "Файлы работы" в формате PDF
Введение. Исследование рака молочной железы (РМЖ) является актуальным, так как, несмотря на многие годы исследований и врачебной практики, до сих пор трудно подобрать оптимальный метод лечения [1]. Тогда как иммунотерапия интерлейкином-2 (ИЛ-2) меланомы и рака почки достаточно широко применяется в клинической практике, этот вид иммунотерапии как метод лечения РМЖ изучен недостаточно. Ранее мы показали, что эффект терапии ИЛ-2 в летальной клинической модели перевитого РМЖ мыши in vivo может как угнетать, так и стимулировать рост опухоли [1, 2]. Целью настоящего исследования было сравнить эффекты однократной инъекции иммуностимуляторов ИЛ-2 и Имунофана (ИМФ) в предстартовой модели (до перевивки опухолевых клеток РМЖ) на последующее проявление и рост опухоли.

Материалы и методы. Опухолевые клетки (ОК) были получены от самки линии A/WhySnJCitMoise (далее, A/Sn) со спонтанным РМЖ и культивированы invitro в среде RPMI-1640. На день 0 сингенные самцы A/Sn (n=33, возраст 20±1 недель, вес 30.0±0.5 г) с индивидуальными метками были однократно пролечены ИЛ-2 («Novartis», 103МЕ/мышь, n=11), ИМФ (НПП «БИОНОКС», 0.2 мл 1% раствора/мышь, n=10). Контрольная группа получила инъекцию растворителя (0.2 мл 0.9% NaCl, n=12) аналогичным образом и в те же сроки. Через 3 дня мышам были подкожно инокулированы ОК (5х105/мышь) под правую переднюю лапу, в район жировой подушечки. Еженедельно в течение 15 недель оценивали динамику проявления (путем пальпирования) и роста опухолей (измерение диаметра). Ежедневно следили за выживанием мышей. Сравнение результатов производилось с помощью непарного двухконцевого t-критерия Стьюдента.

Результаты. Опухоли проявились раньше у мышей, пролеченных ИЛ-2 и ИМФ (у 73% и 70% мышей, соответственно, против 50% в контроле на 8 неделю, динамика представлена в таблице 1).

Таблица 1. Доля мышей с РМЖ по группам.

Группы

Процент мышей с РМЖ по неделям

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

15

Контроль, n=12

8

25

33

33

42

50

58

67

75

83

83

ИЛ-2, n=11

18

36

36

55

73

73

73

73

73

73

73

ИМФ, n=10

30

40

70

70

70

70

70

70

70

70

70

Была выявлена достоверная стимуляция опухолевого роста под действием иммуномодуляторов по сравнению с контролем (динамика роста опухоли представлена в таблице 2).

Таблица 2. Динамика роста РМЖ.

Опухоленосители

Динамика роста опухолей по неделям, мм

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

15

Контроль, n=10/12

0.2

0.6

1.1

2.5

4.9

4.5

6.9

8.4

10.3

11.0

15.4

ИЛ-2, n=8/11

1.1

2.0

2.8

4.6

8.8

10.9

13.9

13.9

17.1

16.9

*

ИМФ, n=7/10

0.5

1.1

2.3

3.4

6.7

8.9

14.1

14.7

15.4

15.8

*

t-критерий: контроль – ИЛ-2

0.351

0.326

0.283

0.438

0.271

0.096

0.092

0.190

0.132

0.118

 

t-критерий: контроль – ИМФ

0.383

0.414

0.070

0.568

0.474

0.092

0.029

0.056

0.077

0.064

 

* - в группе осталось менее трех мышей

Пролеченные ИЛ-2 и ИМФ опухоленосители погибли раньше (75% и 100% мышей, соответственно, против 40% в контроле, на 15 неделю). Однако на конец эксперимента среди пролеченных ИЛ-2 и ИМФ осталось 27% и 30% мышей, соответственно, без пальпируемых опухолей, тогда как в контроле – только 17%. Полученные результаты показали, что как ИЛ-2, так и ИМФ в одинаковой мере ускорили проявление и рост перевитого РМЖ. Таким образом, иммуномодулирующая активность ИМФ в используемой дозе в данной модели соответствовала активности известного иммуномодулятора ИЛ-2 в дозе 103/мышь.

Выводы. Однократное применение ИЛ-2 и ИМФ до перевивки РМЖ ускорило проявление и рост перевитой опухоли у большинства реципиентов и ухудшило картину выживания мышей-опухоленосителей. Но в пролеченных группах доля мышей, у которых рак не проявился, была выше.

Заключение. Используемую предстартовую модель РМЖ можно использовать в качестве сравнительного функционального теста для выявления иммуностимулирующих свойств лекарственных препаратов с предполагаемой иммуномодулирующей активности.

Список литературы.

1. Moiseeva E. Anti-breast cancer drug testing. Original Approaches. Novel Set of Mouse Models - Lambert Ac. Publ, 2009. -p.p. 220

2. Моисеева Е.В., Семушина С.Г., Аронов Д.А., Мурашев А.Н., Шишкин А.М., Боженко В.К. Иммунотерапия перевиваемого рака молочных желез интерлейкином-2: зависимость продолжительности жизни от изначального гематологического статуса. – Москва. –Вестник РНЦРР .- №12 .- 2012. Доступно по URL: http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/v12/papers/mois_v12.htm

Просмотров работы: 1834