Материалы и методы. Экспериментальные исследования выполнены на 100 взрослых крысах-самцах линии Вистар массой 250-300 г. Животные были разделены на 4 группы и содержались на стандартном пищевом рационе, 1-я группа являлась контролем (n = 24). Животные контрольной группы потребляли бутилированную воду из местных артезианских источников. Животным 2-й группы (n = 26) на протяжении 45-и суток в питьевую воду добавляли Fe2+ из расчета 0,5 ПДК, животным 3-й группы (n = 24) 2,4-ДА из расчета 1 ПДК, животные 4-й группы (n = 26) с питьевой водой получали смесь 0,5 ПДК железа (П) и 1 ПДК 2,4-ДА. По окончании эксперимента животных под эфирным рауш-наркозом декапитировали в соответствии с этическими нормами и рекомендациями по гуманизации работы с лабораторными животными.
В лизатах эритроцитов определяли активность супероксиддисмутазы (СОД) по скорости аутоокисления адреналина в адренохром и активность каталазы кинетическим методом прямой регистрации разложения пероксида водорода на спектрофотометре Genesys 5 (США) [7,15]. С татистическую обработку проводили при помощи программ Microsoft Exel ХР и STATISTICA 6.0, математическую - методами непараметрической статистики, независимые выборки сравнивали с помощью U-критерия Манна-Уитни.
Результаты исследованийи их обсуждение.
Как видно из приведенных данных, у животных опытных групп отмечено примерно равное снижение СОД в сыворотке на 38-40%, каталазы на 15-45% относительно контрольной группы, причем более выраженный эффект депрессии каталазы наблюдался у животных 3-й группы (2,4-ДА), минимальный – в 4-й группе (сочетанное воздействие). Полученные результаты демонстрируют чувствительность антиоксидантных ферментов эритроцита к воздействию нетоксичных концентраций Fe2+, гербицида 2,4-ДА, а также их комбинации.
Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что введение как катионов железа, так и 2,4-ДА в дозах, составляющих 0,5 и 1 ПДК соответственно, вызывает умеренную активацию процессов СРО. Вместе с тем их комбинированное поступление в организм приводит к наиболее выраженному оксидативному стрессу. На наш взгляд, основная причина потенцирующего влияния друг на друга указанных веществ связана с тем, что Fe2+ и 2,4-ДА активируют процессы СРО с помощью разных механизмов. Например, Fe2+ ведет к активации ПОЛ через механизм реакции Фентона [11, 13]: Fe2+ + Н2О2 = Fe3+ + ОН. + ОН-
Таблица 1
Показатели интенсивности процессов ПОЛ в сыворотке подопытных животных, M ± m
Показатель |
1 группа интактные n = 24 |
2группа Железо (П) n = 26 |
3группа 2,4- ДА n = 24 |
4группа железо(П) + 2,4- ДА n = 26 |
Достовер ность различий |
СОД, у.е./гНв |
257,0± 26,192 |
157,81± 9,031 |
159,04± 8,025 |
155,58± 9,792 |
P1-2, 1-3, 1-4 < 0,01 |
Каталаза, у.е./гНв |
200,77± 28,489 |
131,11± 9,202 |
109,04± 6,900 |
169,02± 24,140 |
P1-2 |