IV Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2012

В ранее проведенных исследованиях нами было показано влияние антенатальной гипоксии на некоторые морфофункциональные показатели головного мозга новорожденных белых крыс [Симанкова А.А., Сазонова Е.Н., 2011]. Целью данной работы являлось выяснение поведенческих показателей у половозрелых  крыс, перенесших действие гипоксии с 14 по 19 сутки антенатального развития.

В работе использовали потомство рандомбредных 3-месячных белых крыс-самок, подвергнутых гипоксическому воздействию с 14 по 19 сутки гестации. Осуществляли наблюдение за подопытными животными до достижения ими  репродуктивного возраста (60 суток). Исследовали показатели крыс-самцов. Контролем служили крысы-самцы аналогичного возраста из потомства интактных самок. Оценивали массу тела  и массу мозга животных. Поведенческие реакции анализировали в тесте приподнятого крестообразного лабиринта. Кроме того исследовали показатели свободнорадикального окисления (СРО) в гомогенатах полушарий мозга хемилюминесцентным методом (ХМЛ). Регистрацию ХМЛ осуществляли на люминесцентном спектрометре LS 50B «PERKIN ELMER». Стандартизацию сигнала и математическую обработку кривых ХМЛ выполняли с помощью  встроенной программы "Finlab". Спонтанную и индуцированную Fe2+ ХМЛ исследовали по методу Владимирова Ю.А. и соавт. (1991). Определяли: светосумму за 1 мин. спонтанной ХМЛ (S_сп.), величина которой коррелирует с интенсивностью свободнорадикальных процессов; максимум быстрой вспышки (Н1) индуцированной ХМЛ, свидетельствующий о содержании гидроперекисей липидов; светосумму (S_инд.1) за 2 мин. после "быстрой" вспышки, отражающую скорость образования перекисных радикалов липидной природы. Кинетику ХМЛ, инициированную H₂O₂ в присутствии люминола, анализировали по двум параметрам: максимуму свечения (Н2), указывающему на потенциальную способность биологического объекта к перекисному окислению, и  светосумме за 2 мин ХМЛ (S_инд.2), величина которой свидетельствует об активности антиоксидантной антирадикальной защиты. Интенсивность ХМЛ, измеренную в милливольтах, рассчитывали на 1г влажной ткани и выражали в условных единицах.

Статистическую обработку полученных экспериментальных данных осуществляли  по критерию Стьюдента при помощи пакета прикладных программ «Statistika - 5,0». Всего в эксперименте было использовано  56 животных.

Результаты исследования:

Исследование массы тела половозрелых белых крыс, перенесших антенатальную гипоксию,   выявило достоверное снижение   показателя (Рисунок 1).  Мы зарегистрировали у половозрелых животных подопытной группы достоверно меньшую массу тела по сравнению с контрольными показателями. Сниженная масса тела у подопытных животных сопровождалась достоверным снижение массы мозга  (Рисунок 1). Эффект снижения массы мозга животных, перенесших антенатальную гипоксию, сохраняется  и при сопоставлении экспериментальных групп «контроль»-«гипоксия», стандартизованных по массе тела. Таким образом, снижение массы мозга подопытных животных  не может быть обусловлено только микросомией.

Наблюдаемые структурные нарушения сопровождались выраженными функциональными  изменениями. При тестировании 60-суточных самцов  в подопытной группе было выявлено достоверное увеличение двигательной активности на 93,7%. При этом у половозрелых животных подопытной группы регистрировалось значительное,  в 12,9 раза, увеличение среднего времени груминга. Отличие показателя было статистически недостоверно из-за  большой вариабельности, однако  можно говорить о статистической тенденции изменения параметра (р=0,07).

Поведенческие отклонения у половозрелых животных, подвергнутых антенатальной гипоксии, сопровождались интенсификацией в ЦНС процессов свободнорадикального окисления. Анализ ХМЛ-показателей гомогенатов головного мозга 60-суточных животных (Рисунок 2) продемонстрировал, что антенатальная гипоксия   интенсифицировала СРО в тканях головного   мозга крыс: величина S_сп. возросла в 1,86 раза. Значительный вклад в этот процесс вносит активация перекисного окисления липидов, о чем свидетельствуют: увеличение концентрации гидроперекисей (амплитуда H1 возросла в 1,83 раза) и ускорение образования перекисных радикалов (величина S_инд.1 возросла в 2,10 раза). Выявленные нарушения свободнорадикального статуса обусловлены ослаблением антиоксидантной антирадикальной защиты (величина S_инд.2 возросла в 1,37 раза, соответственно) и снижением резистентности к перекисному окислению (амплитуда Н2 увеличилась в 1,65 раза). Подобные изменения свободнорадикального статуса расцениваются  как наличие оксидативного стресса  на органном уровне.

Таким образом, антенатальная гипоксия индуцирует существенные структурно-функциональные нарушения в головном мозге млекопитающих, протекающие на фоне оксидативного стресса и сохраняющиеся  до половозрелого возраста. Результаты проведенного исследования  определяют необходимость дальнейших поисков  коррекции отдаленных последствий антенатальной гипоксии.

Выводы

1. Снижение   массы тела и массы мозга у белых крыс-самцов, перенесших антенатальную гипоксию, сохраняются как минимум до  60-суточного возраста.
2. У 60-суточных животных, перенесших антенатальную гипоксию, по тесту «приподнятого крестообразного лабиринта» наблюдается достоверное увеличение общей двигательной активности.
3. Поведенческие отклонения  у половозрелых животных, перенесших антенатальную гипоксию,  сопровождаются хемилюминесцентно регистрируемой активацией процессов свободнорадикального окисления на органном уровне.

          

 Таблица 1

Поведение 60-суточных самцов белых крыс, перенесших антенатальную гипоксию,в тесте «приподнятого крестообразного лабиринта»

Показатель	Контроль	Гипоксия
Время бездействия (с)	50,28 + 13,84	34,05 + 10,08
Время движения (с)	31,96 + 6,49	61,92+ 7,78 * р=0,01
Время нахождения в открытых рукавах (с)	55,69 + 17,90	47,44 + 10,13
Время нахождения в закрытых рукавах (с)	121,08 + 18,03	128,77+10,11
Количество заходов в открытые рукава	2,52 + 0,26	2,94 + 0,32
Количество свешиваний	2,42 + 0,56	2,78 + 0,45
Количество стоек	1,50 + 0,50	3,17 + 0,81
Время груминга (с)	0,36 + 0,22	4,64 + 1,84  р=0,07

 

Код для цитирования: Скопировать