III Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум - 2011

Цитогенетические методы заключаются в цитологическом анализе генетических структур и явлений с целью сопоставления генетических явлений со структурой и поведением хромосом и их участков (анализ хромосомных и геномных мутаций, построение цитологических карт хромосом, цитохимическое изучение активности генов и т. п.). Частные случаи цитогенетического метода - кариологический, кариотипический, геномный анализ.

Методы получения митотических препаратов еще не потеряли своей актуальности и остаются важными по сей день в генетике. Костный мозг, ткани семенника и хорион имеют достаточный митотический индекс для того, чтобы использовать эти объекты для цитогенетических целей.

Цель исследования: изучить влияние различных температурных режимов на уровень гипотонизации клеток.

Материалы и методы. Эксперименты производились на 60 беспородных половозрелых белых мышах, весом 24-28 грамм, с учетом международных норм и правил по работе с лабораторными животными. Препараты красного костного мозга получали по стандартной методике [Хабриев, Серединин, 2009].

Дизайн эксперимента:

1. Серия: 0,56% раствор KCl температурный режим - 36,3С, время 7,5 минут

2.Серия: 0,56% раствор KCl температурный режим - 36,3С, время 15 мин

3. Серия: 0,56% раствор KCl температурный режим - 37С, время 7,5мин

4. Серия: 0,56% раствор KCl температурный режим - 37С, время 1,5мин

5. Серия: 1% раствор цитрата натрия температурный режим - 36,3С, время 7,5 минут

6. Серия: 1% раствор цитрата натрия температурный режим - 36,3С, время 15 минут

7. Серия: 1% раствор цитрата натрия температурный режим - 37С, время 7,5мин

8. Серия: 1% раствор цитрата натрия температурный режим - 37С, время 15 минут

Анализ препаратов проводился на микроскопе «Люмам И 2» при увеличении 10х2,5х90. Качество препаратов оценивали в баллах по оригинальной шкале.

Наибольший процент метафазных пластинок определялся в препаратах, полученных в ходе 2-й и 6-й серии экспериментов, при этом уровень метафазных пластинок пригодных для цитогенетической оценки был выше в препаратах 2-й серии. Таким образом, режим термостатирования клеток красного костного мозга мышей с 0,56% раствором KCl в течении 15 мин при температуре 36,3С обеспечивает лучшую гипотонию клеток и наибольший выход дискретных метафазных пластинок.