Установлено наличие сесквитерпеновых лактонов в корневище полыни горькой и полыни обыкновенной, путем качественного анализа лекарственного растительного сырья методом тонкослойной хроматографии.
Растения семейства Asteracea активно применяются в народной медицине для лечения широкого спектра заболеваний, в том числе и опухолевых. Основными действующими веществами растений данного семейства являются сесквитерпеновые лактоны. В настоящее время сесквитерпеновые лактоны рассматриваются как перспективный источник новых препаратов в связи с возможностью легкого культивирования этих растений и высокого содержания лактонов в ряде видов растений. Биологически активны только те члены этого обширного семейства растительных метаболитов, лактонная группа которых содержит экзометиленовое звено. Механизм противоопухолевого действия сесквитерпеновых лактонов связывают с наличием в их структуре двух алкилирующих функциональных групп: ненасыщенного лактона и α-β-ненасыщенной кетонной или эпоксидной группы.[3]
В настоящее время для выделения сесквитерпеновых лактонов из лекарственного растительного сырья (ЛРС) применятся следующие методики:
1) Сырье обрабатывается петролейным эфиром с последующей отгонкой растворителя под вакуумом. Остаток растворяется в 60% спирте и упаривается. Смолку растворяют в хлороформе и хроматографируют. [2]
2) Извлечение эфирного масла перегонкой с водяным паром с одновременной экстракцией хлороформом. Хлороформ отгоняют на роторном испарителе. Масло, содержащее сесквитерпеновые лактоны, выкристаллизовывается.
3)Экстракция сесквитерпеновых лактонов диоксидом углерода в сепараторах с дальнейшим хроматографированием.[4]
В работе была использована методика Рыбалко К. С.: ЛРС обрабатывается ацетоном в соотношении 1:5 и выдерживается при комнатной температуре 2-3 дня. Ацетоновое извлечение упаривают под вакуумом.[2]
Для подтверждения наличия сесквитерпеновых лактонов в ЛРС используется ИК - спектроскопия. Этот метод применяют для извлечений, полученных при обработке сырья петролейным эфиром, хлороформом, этилацетатом, ацетоном, этанолом. g-Лактоны содержат полосу поглощения лактонного карбонила в области 1740 - 1800 см - 1.[1]
В настоящее время одной из наиболее эффективных методик определения сесквитерпеновых лактонов является тонкослойная хроматография (ТСХ). Для хроматографической очистки и разделения чаще всего используют нейтральную окись алюминия IV степени активности, реже III степени, а в последнее время стали широко применять силикагель. Лактоны вымывают петролейным эфиром, бензолом, хлороформом, этиловым эфиром, этилацетатом, ацетоном, спиртом и их смесями в различных соотношениях.[5]
Для получения хроматограмм в ТСХ были использованы следующие системы растворителей[2]:
1)Бензол: этанол 8:2
2)Петролейный эфир:бензол:хлороформ:этанол 5:4:2:1
3)Диэтиловый эфир: ацетон 3:1
4)бензол: этанол 9: 1
Наилучшие результаты разделения показала система -
бензол: этанол 9:1.
Для идентификации соединений сесквитерпеновой природы используются следующие проявители: ванилин, фосрфорномолибденовая кислота (ФМК), перманганат калия и пары йода. Перманганат калия и пары йода используются для обнаружения ненасыщенных соединений, а терпеноиды, дитерпеновые кислоты, сесквитерпеновые спирты, сесквитерпеновые лактоны, азулены, высшие спирты, кетоны дают реакции с ванилином и ФМК.
Ниже приведена сводная таблица результатов исследований.
№ |
Подвижность Rf * 100 |
Наличие в : |
Окраска |
||||
Полынь горькая |
Полынь обыкновенная |
ФМК |
Ванилин |
KMnO4 |
I2 |
||
1 |
98,1-96,0 |
+ |
+ |
голубое |
|
|
+ |
2 |
61,8-57,7 |
|
+ |
|
|
|
+ |
3 |
56,3-45,3 |
+ |
|
коричневатое |
розоватая |
+ |
+ |
4 |
48,7-48,6 |
|
+ |
синеватая |
сиреневатая |
|
|
5 |
44,7-43,6 |
|
+ |
|
|
+ |
|
6 |
37,9-37,7 |
+ |
|
сиреневатая |
|
|
|
7 |
34,8-29,2 |
+ |
+ |
красноватая |
розоватая |
+ |
+ |
8 |
28,0-24,1 |
+ |
|
синяя |
малиновый |
|
|
9 |
26,0-22,4 |
|
+ |
|
|
+ |
+ |
10 |
22,1 -19,6 |
|
+ |
коричневое |
|
+ |
+ |
11 |
20,4-16,0 |
+ |
|
коричневатое |
малиновая |
|
+ |
12 |
18,3-15,8 |
|
+ |
|
розоватое |
+ |
+ |
13 |
14,6-10,0 |
+ |
+ |
синее |
|
+ |
+ |
14 |
9,0-4,5 |
+ |
+ |
синее |
Серо-сиреневое |
|
|
В ходе проведенных экспериментов было установлено наличие ненасыщенных соединений сесквитерпеновой природы: спиртов, лактоны, азуленов, а также высших спиртов и дитерпеновых кислот в корневищах полыни горькой и полыни обыкновенной.
В дальнейшем планируется продолжить работу по разделению смеси выделенных лактонов, проведению скрининга биологической и фармакологической активности.
Список использованной литературы: